【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫层析诊断领域，具体涉及一种甲型流感病毒的裂解液、检测试剂盒及其用途。
技术介绍
1、流行性感冒病毒(influenza virus)，是正黏液病毒科(orthomyxoviridae)的代表种，简称流感病毒，包括人流感病毒和动物流感病毒，人流感病毒分为甲(a)、乙(b)、丙(c)三型，是流行性感冒(流感)的病原体。主要通过咳嗽和打喷嚏传播，一般春季和冬季爆发，这种疾病通常表现为发热、寒颤、头痛、肌肉酸痛和干咳，在没有并发症的情况下，这些症状会在一周内缓解。a型流感病毒具有极强的变异性，b型病毒次之，而c型病毒则非常稳定，故a型病毒比b型病毒更为流行和严重。实验室诊断金标准方法是病毒分离培养法，细胞培养鉴定周期是14天，严重影响临床中对病人及时用药指导，该法在临床应用中受到限制。反转录-聚合酶链式反应(pt-pcr)与细胞培养法比较，灵敏度较高，但由于pt-pcr法耗费昂贵，需要6小时，仅在专业实验室进行，故现场应用受到限制。目前，在疫病快速诊断检测领域，胶体金免疫层析技术具有快速、便捷、检测效果直观和不需要检测仪器等优势，应用在流感病毒检测的一线。但是目前的流感病毒检测试纸仍然存在灵敏度低、特异性差的缺陷。
技术实现思路
1、因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中的流感病毒检测试纸存在灵敏度低、特异性差的缺陷缺陷，从而提供一种甲型流感病毒的裂解液、检测试剂盒及其用途。
2、为此，本专利技术提供了如下的技术方案：
3、一种甲型流感
4、可选的，所述裂解液包括tris-hcl为2mol/l，sds为质量百分比1％，pvp质量百分比0.5％，edta-二钠质量百分比为0.02％。
5、一种甲型流感病毒检测试剂盒，包括所述的甲型流感病毒裂解液和试纸条；
6、所述试纸条为包括底板和在所述底板上依次重叠搭接的样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫：所述的抗体承载膜上设置有相间隔的检测线t和质控线c，所述检测线t靠近所述胶体金吸附垫，所述质控线c靠近所述吸水垫；
7、胶体金吸附垫上包被有胶体金标记的甲型流感病毒单克隆抗体和与甲型流感病毒无关的动物单抗；
8、所述检测线t包被甲型流感病毒单克隆抗体；所述质控线上包被与所述动物单抗结合的动物多抗。
9、可选的，所述检测线t包被甲型流感病毒单克隆抗体为鼠抗甲型流感单抗2a9mb；鼠抗甲型流感单抗2a9mb所针对的甲型流感病毒的抗原表位如seq id no.1所示；
10、所述胶体金标记的甲型流感病毒单克隆抗体为鼠抗甲型流感单抗5h8m；鼠抗甲型流感单抗5h8m所针对的甲型流感病毒的抗原表位如seq id no.2所示。
11、可选的，所述检测线t包被甲型流感病毒单克隆抗体的包被浓度为0.8～1.2mg/ml；
12、和/或，所述胶体金标记的甲型流感病毒单克隆抗体中，甲型流感病毒单克隆抗体的标记浓度为8～10μg/ml。
13、可选的，所述质控线c包被抗鼠igg多抗；
14、可选的，所述质控线c包被抗鼠igg多抗的包被浓度为1.5～2.0mg/ml。
15、可选的，胶体金吸附垫上包被的胶体金标记的与甲型流感病毒无关的动物单抗为胶体金标记的鼠igg抗体；
16、可选的，胶体金标记的鼠igg抗体中，鼠igg抗体的标记浓度为3～6μg/ml。
17、可选的，所述抗体承载膜为硝酸纤维素膜。
18、可选的，所述试纸条的制备方法包括：样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫的制备；
19、抗体承载膜的制备：将用于包被检测线t的甲型流感病毒单克隆抗体稀释至0.8～1.2mg/ml，进行划膜；将用于包被质控线c的抗鼠igg抗体稀释至1.5～2.0mg/ml，进行划膜；
20、胶体金吸附垫的制备：将胶体金标记的甲型流感病毒单克隆抗体溶液喷涂在胶体金吸附垫上，甲型流感病毒单克隆抗体标记的浓度为8～10μg/ml；将胶体金标记的鼠igg抗体溶液喷涂在胶体金吸附垫上，鼠igg抗体标记的浓度为3～6μg/ml。
21、一种所述的甲型流感病毒检测试剂盒在制备检测甲型流感病毒的产品中的用途；
22、可选的，待测样品包括鼻腔分泌物和咽喉分泌物。
23、本专利技术技术方案，具有如下优点：
24、1.本专利技术提供的一种甲型流感病毒的裂解液，包括：1.8-2.2mol/ltris-hcl(ph9.0)，质量百分比为0.9％-1.1％ sds，质量百分比为0.5％-0.8％pvp，质量百分比为0.02％-0.03％edta-二钠，ph8.0-9.0；本专利技术在研究中发现，已有的样品处理液在处理不同来源的样品时不能充分裂解样品，而且对于不同亚型的甲流病毒的裂解效果存在较大差异，对于目前比较流行的甲流病毒毒株的样品裂解效果较差，导致甲型流感病毒检测的灵敏度和特异性差，为此，本专利技术提供了一种甲型流感病毒的裂解液，所述裂解液可以对不同来源且目前的流行的甲流病毒毒株的样品进行充分裂解，将病毒甲型流感病毒蛋白抗原充分暴露出来，可以提高检测的灵敏度和特异性。
25、2、一种甲型流感病毒检测试剂盒，包括所述的甲型流感病毒裂解液和试纸条；所述试纸条为包括底板和在所述底板上依次重叠搭接的样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫：所述的抗体承载膜上设置有相间隔的检测线t和质控线c，所述检测线t靠近所述胶体金吸附垫，所述质控线c靠近所述吸水垫；所述检测线t包被甲型流感病毒单克隆抗体；胶体金吸附垫上包被有胶体金标记的甲型流感病毒单克隆抗体；所述试剂盒中，采用所述甲型流感病毒裂解液裂解后的样品，适合于双抗体夹心法原理及免疫层析金标记技术检测样本中甲型(a型)流感病毒，具有高灵敏度和特异性。检测原理为：在胶体金吸附垫上预包被金标记小鼠抗-甲型流感单抗和鼠单抗，在抗体承载膜的检测线和质控线处分别包被重组鼠源抗-甲型流感抗体和动物多抗(如抗鼠igg抗体)。测定时，将处理后的待测样品滴入试纸加样区内，然后混合物在毛细效应下向上层析。当样本中含甲型流感病毒抗原时，甲流抗原首先和胶体金标记的小鼠抗-甲型流感单抗结合，形成"甲流抗原﹣甲流抗体﹣胶体金"复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组鼠源抗-甲型流感抗体结合形成胶体金标记的双抗体夹心复合物，从而在检测线处显示紫红色条带。如是阴性，则测试区内将没有红色条带。
26、3.本专利技术提供的一种甲型流感病毒检测试剂盒，所述检测线t包被甲型流感病毒单克隆抗体为鼠抗甲型流感单抗2a9mb，鼠抗甲型流感单抗2a9mb所针对的甲型流感病毒的抗原表位如seq id no.1所示；所述胶体本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种甲型流感病毒的裂解液，其特征在于，包括：Tris-HCl为1.8-2.2mol/L，SDS为质量百分比0.9％-1.1％，PVP为质量百分比0.5％-0.8％，EDTA-二钠质量百分比为0.02％-0.03％，pH8.0-9.0。
2.根据权利要求1所述的甲型流感病毒裂解液，其特征在于，所述裂解液包括Tris-HCl为2mol/L，SDS为质量百分比1％，PVP质量百分比0.5％，EDTA-二钠质量百分比为0.02％。
3.一种甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1中所述的甲型流感病毒裂解液和试纸条；
4.根据权利要求3所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，
5.根据权利要求3或4所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述检测线T包被甲型流感病毒单克隆抗体的包被浓度为0.8～1.2mg/ml；
6.根据权利要求3-5任一项所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述质控线C包被抗鼠IgG多抗；
7.根据权利要求3-6任一项所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，胶体金吸附垫上包
8.根据权利要求3-7任一项所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述抗体承载膜为硝酸纤维素膜。
9.根据权利要求3-8任一项所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述试纸条的制备方法包括：样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫的制备；
10.一种如1-8任一项所述的甲型流感病毒检测试剂盒在制备检测甲型流感病毒的产品中的用途；
...【技术特征摘要】
1.一种甲型流感病毒的裂解液，其特征在于，包括：tris-hcl为1.8-2.2mol/l，sds为质量百分比0.9％-1.1％，pvp为质量百分比0.5％-0.8％，edta-二钠质量百分比为0.02％-0.03％，ph8.0-9.0。
2.根据权利要求1所述的甲型流感病毒裂解液，其特征在于，所述裂解液包括tris-hcl为2mol/l，sds为质量百分比1％，pvp质量百分比0.5％，edta-二钠质量百分比为0.02％。
3.一种甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1中所述的甲型流感病毒裂解液和试纸条；
4.根据权利要求3所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，
5.根据权利要求3或4所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述检测线t包被甲型...
【专利技术属性】
技术研发人员：顾飞，欧卫军，褚晖，黄海亮，
申请(专利权)人：南通伊仕生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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