用于淋巴细胞定量检测的标记物和淋巴细胞定量检测方法技术

本申请公开了一种用于淋巴细胞定量检测标记物和定量检测方法。本申请标记物，为DNA片段或含有DNA片段的质粒，DNA片段5’到3’端依序包括V区、M区和J区，V区由前导区基因和/或V基因全部或部分序列组成，J区由J基因全部或部分序列组成，M区包括外源核苷酸片段。本申请的标记物，在免疫组库建库时添加到gDNA中一起建库测序，定量标记物获得淋巴细胞数目。本申请的淋巴细胞定量方法，简单快速、明白直接；对生物实验要求和依赖度不高；可分析得致病克隆在PBMC/BMMC/有核细胞的比例，使基于高通量测序监控致病克隆比例成为现实，对免疫相关疾病早期诊断、预后监控、指导临床治疗有重要意义。

Quantitative markers for lymphocytes and quantitative detection of lymphocytes

The invention discloses a quantitative detection marker for lymphocytes and a quantitative detection method. The application marker is DNA fragment or plasmid containing DNA fragment. The DNA fragment 5 'to 3' end includes V, M and J regions. The V region is composed of all or partial sequences of the preamble and / or V genes. The J region is composed of all or part of the J gene, and the M region includes the exogenous nucleotide fragments. The markers of this application were added to the gDNA library during the establishment of the immune library. The lymphocytic quantitative method of this application is simple, quick and direct; the requirement and dependence of the biological experiment are not high; the proportion of the pathogenic clones in PBMC/BMMC/ nucleated cells can be analyzed, and the proportion of the pathogenic clone based on high throughput sequencing is the reality, the early diagnosis, the prognosis monitoring, and the clinical guidance of the immune related diseases, the clinical guidance, and the clinical guidance. Treatment is of great significance.

【技术实现步骤摘要】
用于淋巴细胞定量检测的标记物和淋巴细胞定量检测方法
本申请涉及淋巴细胞检测领域，特别是涉及一种用于淋巴细胞定量检测的标记物，以及采用该标记物的淋巴细胞定量检测方法。
技术介绍
对免疫相关疾病而言，预后监控是尤为重要的。患者经过治疗后，微小残留往往会成为疾病复发的罪魁祸首。以白血病为例，经过治疗体内残留的白血病细胞通常低达109个以下。目前对于残留细胞的检测通常采用的是流式细胞仪，但是，流式细胞仪对于外周血中微量的残留细胞检测敏感性和特异性不好，会导致假阴性结果，不利于预后监控。因此，亟需一种可以对免疫相关疾病微小残留细胞进行检测和监控的技术，以便于预后监控或早期诊断。
技术实现思路
本申请的目的是提供一种用于淋巴细胞定量检测的标记物，以及采用该标记物的淋巴细胞定量检测方法。为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：本申请的一方面公开了一种用于淋巴细胞定量检测的标记物，标记物为DNA片段或者含有该DNA片段的质粒，该DNA片段从5’端到3’端依序包括V区、M区和J区，其中，V区由前导区基因和/或V基因全部或部分连续序列组成，J区由J基因的全部或部分连续序列组成，M区包括外源核苷酸片段。需本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于淋巴细胞定量检测的标记物，其特征在于：所述标记物为DNA片段或者含有所述DNA片段的质粒，所述DNA片段从5’端到3’端依序包括V区、M区和J区，所述V区由前导区基因和/或V基因全部或部分连续序列组成，所述J区由J基因的全部或部分连续序列组成，所述M区包括外源核苷酸片段。

【技术特征摘要】
1.一种用于淋巴细胞定量检测的标记物，其特征在于：所述标记物为DNA片段或者含有所述DNA片段的质粒，所述DNA片段从5’端到3’端依序包括V区、M区和J区，所述V区由前导区基因和/或V基因全部或部分连续序列组成，所述J区由J基因的全部或部分连续序列组成，所述M区包括外源核苷酸片段。2.根据权利要求1所述的标记物，其特征在于：所述M区中，外源核苷酸片段为barcode；优选的，所述M区还包括D基因的全部或部分连续序列；优选的，所述D基因的全部或部分连续序列的长度为0bp-100bp。3.根据权利要求1所述的标记物，其特征在于：所述V区的长度为10bp-400bp。4.根据权利要求1所述的标记物，其特征在于：所述J区的长度为10bp-100bp。5.根据权利要求1-4任一项所述的标记物，其特征在于：所述DNA片段的总长度为100-500bp。6.根据权利要求1-5任一项所述的标记物在淋巴细胞定量检测中的应用。7.根据权利要求1-5任一项所述的标记物...

【专利技术属性】
技术研发人员：李新洋，武靖华，刘晓，王长希，
申请(专利权)人：深圳华大基因研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44