神经兴奋性损伤相关多肽在预防、缓解或治疗疼痛的用途制造技术

本申请提供了含有氨基酸序列YEKLLDTEI或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物在制备预防、缓解或治疗疼痛特别是伤害感受性疼痛的药物中的用途，以及预防、缓解或治疗疼痛的方法。

The use of neuroexcitatory damage related peptides in the prevention, mitigation, or treatment of pain

The invention provides a pharmaceutical composition containing the amino acid sequence of YEKLLDTEI or its functional variants of the peptide or containing the peptide in the preparation of prevention or treatment of pain relief, especially hurt pain perception in drug use, as well as a method of preventing, alleviating or treating pain.

【技术实现步骤摘要】
神经兴奋性损伤相关多肽在预防、缓解或治疗疼痛的用途专利
本申请大体上涉及医学领域，具体而言，本申请提供了神经兴奋损伤相关多肽在预防、缓解或治疗疼痛中的应用。专利技术背景疼痛是人们一生中经常遇到的不愉快的感觉。它提供躯体受到威胁的警报信号，是生命不可缺少的一种特殊保护功能。另一方面，它又是各种疾病最常见的症状，也是当今困扰人类健康最严重的问题之一。疼痛是机制非常复杂的神经活动。疼痛研究已经成为当前神经科学研究的重要课题之一。现有的研究表明，N-甲基-D-天冬氨酸(N-methy-D-spartate，NMDA)受体的NR2B亚基参与脊髓神经元的兴奋性突触传递、中枢敏化以及慢性痛等生理病理过程。背根神经节(dorsalrootganglion，DRG)的神经元有外周突和中枢突，外周突末梢直接接受伤害性刺激，通过Aδ纤维和C纤维传递至脊髓背角浅层的中枢突末梢，释放神经递质，如谷氨酸、天冬氨酸、SP和CGRP等，谷氨酸再结合到NMDA受体和AMPA受体。由于Mg2+阻断了NMDA受体离子通道，只有AMPA受体被激活，AMPA受体持续激活Na+流入细胞，导致膜的去极化，消除了Mg2+对通道的阻断，增加Ca2+通透性，大量进入细胞的Ca2+激活了PKC，PKC磷酸化NMDA受体，改变不同NMDA受体亚型的表达比例，同时使NMDA受体的沉默突触转化为有功能的突触。NMDA相关的NOS受Ca2+浓度影响，NOS在PSD-95和PSD-93的PDZ位点发生酶促反应，生成NO并激活鸟甘酸环化酶，合成鸟甘酸，增强PSD钙调蛋白依赖性磷酸化，调节突触递质的释放，改变神经元的兴奋性。这种反馈放大效应将伤害性信息进一步向中枢传递，引起痛觉敏感和放大疼痛信号。在上述过程中，我们可以看出Ca2+浓度以及NR2B和PSD-95相互作用是放大疼痛信号的关键条件，因此限制这其中一个条件均可能弱化疼痛信号。故而，PSD95的抑制剂的研发对于疼痛的治疗具有重要意义。专利技术概述第一方面，本申请提供了含有氨基酸序列YEKLLDTEI(SEQIDNO:1)或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物在制备预防、缓解或治疗个体的疼痛的药物中的用途。第二方面，本申请提供了预防、缓解或治疗疼痛的方法，所述方法包括：向有需要的个体给予含有氨基酸序列YEKLLDTEI或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物。在第一方面所述的用途或第二方面所述的方法的一些实施方案中，功能性变体为YEKLLDTEI中的LDTEI部分发生一处或多处保守型取代后产生的变体。在一些实施方案中，保守型取代选自D和E之间的取代，L、V和I之间的取代以及T和S之间的取代。在一些实施方案中，功能性变体为YEKLLDTEI中的LDTEI部分被替换为下述任一序列后产生的变体：LDTEL、LDTEV、LDTDI、LDTDL、LDTDV、LDSEI、LDSEL、LDSEV、LDSDI、LDSDL、LDSDV、LETEI、LETEL、LETEV、LETDI、LETDL、LETDV、VDTEI、VDTEL、VDTEV、VDTDI、VDTDL、VDTDV、IDTEI、IDTEL、IDTEV、IDTDI、IDTDL、IDTDV、IETEI、IETEL、IETEV、IETDI、IETDL、IETDV。在第一方面所述的用途或第二方面所述的方法的一些实施方案中，所述肽为包含氨基酸序列YEKLLDTEI或其功能性变体以及内化肽的嵌合肽。在一些实施方案中，内化肽包含氨基酸序列YGRKKRRQRRR(SEQIDNO:2)。在一些实施方案中，嵌合肽包含氨基酸序列YGRKKRRQRRRYEKLLDTEI(SEQIDNO:3)。在第一方面所述的用途或第二方面所述的方法的一些实施方案中，疼痛为伤害感受性疼痛。在一些实施方案中，疼痛为由外部应激或刺激导致的疼痛。在一些实施方案中，外部应激或刺激为热刺激或触碰。在一些实施方案中，伤害感受性疼痛为躯体疼痛和/或内脏疼痛。在一些实施方案中，躯体疼痛包括灼伤、切伤、挫伤、肩周痛、肢体疼痛、腰痛、关节炎、肌腱炎、筋膜炎。在一些实施方案中，内脏疼痛包括胃痛、阑尾炎、胰腺炎、消化性溃疡。在一些实施方案中，前述的用途和方法中所述的个体为无神经损伤的个体。在一些实施方案中，所述个体为健康个体。附图简要说明图1显示了Pull-down实验检测P5与PDZ1/2结构域的相互作用。M代表DNA分子量标识；泳道1为His+PDZ1/2+P5；泳道2为单独的P5；泳道3为His+P5；泳道4为His+PDZ1/2。泳道1所示的洗脱条带包含P5与PDZ1/2两者，证实P5能够结合PDZ1/2结构域。图2为在热板实验中利用P5多肽、阴性对照(生理盐水)、阳性对照(布洛芬)处理大鼠获得的结果图。图3为在针刺实验中利用P5多肽、阴性对照(生理盐水)、阳性对照(布洛芬)处理大鼠获得的结果图。专利技术详述本申请的专利技术人通过对疼痛机制的研究，拟定了疼痛治疗的多个靶点，并通过实验对可预防、缓解或治疗疼痛的肽进行了设计和筛选，最终筛选得到了具有理想性质的肽。本申请得到的肽具有高效、低毒的优势。除非另外指明，本申请中所有的术语均具有本领域技术人员通常所理解的含义。术语“嵌合肽”表示具有两个天然不彼此结合的组件肽的肽，所述两个组件肽可以作为融合蛋白或通过化学键彼此结合。术语“功能性变体”是指与母体具有相同或相近的生物学功能和性质的变体。作为非限制性的实例，“功能性变体”可以通过在母体中进行一处或多处保守型取代获得。术语“PDZ结构域”是指约90个氨基酸的模块蛋白质结构域，其特征是对脑突触蛋白PSD-95、果蝇(Drosophila)分隔连接蛋白Discs-Large(DLG)和上皮紧密连接蛋白Z01(Z01)具有显著(例如至少60％)的序列同一性。PDZ结构域也称作Discs-Large同源性重复(“DHRs”)和GLGF重复。PDZ结构域通常显示保留核心共有序列(Doyle,D.A.,1996,Cell85：1067-76)。示例性的含PDZ结构域的蛋白质和PDZ结构域序列在美国申请No.10/714,537中公开。术语“特异性结合”是指两个分子(例如配体和受体)之间的结合，其特征是甚至在存在许多其他不同分子时，一种分子(配体)与另一种特异分子(受体)结合的能力，即在分子的异质混合物中显示一种分子对另一分子的优先结合的能力。配体与受体的特异性结合也如下被证明：存在过量未标记的配体时，经可检测标记的配体与受体的结合降低(即结合竞争实验)。第一方面，本申请提供了含有氨基酸序列YEKLLDTEI(SEQIDNO:1)或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物在制备预防、缓解或治疗疼痛的药物中的用途。在一些实施方案中，所述的功能性变体为YEKLLDTEI中的LDTEI部分发生一处或多处保守型取代后产生的变体。在一些实施方案中，保守型取代选自D和E之间的取代，L、V和I之间的取代以及T和S之间的取代。在更具体的一些实施方案中，功能性变体为SEQIDNO:1中的LDTEI部分被替换为下述任一序列后产生的变体：LDTEL、LDTEV、LDTDI、LDTDL、LDTDV、LDSEI、LDSEL、LDSEV、LDSDI、LDSDL本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有氨基酸序列YEKLLDTEI(SEQ ID NO:1)或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物在制备预防、缓解或治疗个体的疼痛的药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.含有氨基酸序列YEKLLDTEI(SEQIDNO:1)或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物在制备预防、缓解或治疗个体的疼痛的药物中的用途。2.预防、缓解或治疗疼痛的方法，所述方法包括：向有需要的个体给予含有氨基酸序列YEKLLDTEI或其功能性变体的肽或者包含所述肽的药物组合物。3.如权利要求1所述的用途或权利要求2所述的方法，其中所述功能性变体为YEKLLDTEI中的LDTEI部分发生一处或多处保守型取代后产生的变体，优选地，所述保守型取代选自D和E之间的取代，L、V和I之间的取代以及T和S之间的取代。4.如权利要求3所述的用途或方法，其中所述功能性变体为YEKLLDTEI中的LDTEI部分被替换为下述任一序列后产生的变体：LDTEL、LDTEV、LDTDI、LDTDL、LDTDV、LDSEI、LDSEL、LDSEV、LDSDI、LDSDL、LDSDV、LETEI、LETEL、LETEV、LETDI、LETDL、LETDV、VDTEI、VDTEL、VDTEV、VDTDI、VDTDL、VDTDV、IDTEI、IDTEL、IDTEV...

【专利技术属性】
技术研发人员：童威，田雨佳，芦颖，韩化敏，
申请(专利权)人：拜西欧斯北京生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11