一种新的多肽--人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人钠－神经传递素协同转运蛋白８，４３，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人钠－神经传递素协同转运蛋白８，４３的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
,43和编码这种多肽的多核苷酸的制作方法
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。细胞的功能远远不是简单的吸收营养和排泄废物，更为重要的是体内各种各样细胞之间协调和信息传递，以保证个体作为整体能够行使有效的功能。细胞与其环境和为这些信息传递类型所必须的其它细胞之间的相互作用，一定涉及到细胞膜的作用过程。在很多情况下，跨膜转运不可缺少地参与细胞与其环境之间的信息传递过程。细胞与细胞之间有许多化学信使，共同协调各组织的代谢活性，使有机体适应环境的变化，并使之做好新陈代谢的准备。神经细胞膜上一般有钠离子通道和钾离子通道，在各种动物细胞膜中含量各不相同，以钠离子通道为研究对象，我们发现其中包含了许多种类的蛋白，神经传递素协同转运蛋白是其中较为重要的蛋白。在被突触释放后，许多神经传递素通过这种特殊的转运蛋白以及钠的协同作用，能以高的亲和力被再吸收进入突触前端，这些蛋白是安非它明和可卡因等神经运动刺激物的靶蛋白，所有的这类蛋白属于一个家族，即钠一神经传递素协同转运蛋白家族(SNF)。这个家族据现在所知已包括许多成员，大多数的靶组织为一种类型以上的神经纤维所支配，它们各用其不同的神经递质，就决定了这类蛋白的多样性。去甲肾上腺素就是这样一种神经递质，它是由支配内脏器官(如心脏、脾脏和肠道)的平滑肌细胞的交感神经纤维在交感神经末端释放的，能扩散到临近细胞并激发出特定反应，它和有关的胺类物质在大脑的很多神经通路中作为神经递质。另外，较为典型的还比如甜菜碱、肌氨酸、gamma氨基丁酸等等。神经传递素协同转运蛋白家族属于糖蛋白，约含有600-700个氨基酸残基，数量最少的是两种细菌蛋白，只有457-508个氨基酸残基，这些蛋白多肽链一般包含12个跨膜区域，其中C-末端和N-末端都位于细胞质中，中间区段形成一个个环状结构。这个家族的蛋白中有两个较为保守的区域，第一个位于第一跨膜区的C-末端位置，从一个短的胞外环直到第二跨膜区的N-端位置；另外一个位于第三跨膜区和第四跨膜区之间的最大的跨膜环上，这个区域包含了两个保守的Cys残基，可相结合形成二硫键结构，对于构象的形成及变化起着决定作用。神经传递素协同转运蛋白家族的特征性序列是形成其生物活性所必需。根据氨基酸序列同源比较的结果，本专利技术的多肽被推断鉴定为人钠-神经传递素协同转运蛋白8，其同源蛋白为鼠钠-神经传递素协同转运蛋白。由于如上所述人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少93％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中117-1295位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-3214位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人钠-神经传递素协同转运蛋白8,43表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人钠－神经传递素协同转运蛋白８，４３，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博道基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]