重组海参溶菌酶的生产方法及由其制得的重组海参溶菌酶技术

技术编号:1768337 阅读:215 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种重组海参溶菌酶的生产方法及由其制得的重组海参溶菌酶,该方法是将海参溶菌酶基因(SEQ ID NO.1)连接到真核表达载体pPIC9K中构建重组质粒,并将所形成的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168中,经甲醇诱导表达,然后经阳离子交换树脂层析柱纯化后得到重组溶菌酶。本发明专利技术的方法采用该基因工程菌生产溶菌酶适合大规模培养和分离提取,生产工艺不复杂,设备要求简单,生产周期短,成本比较低,无环境污染。所制得的重组海参溶菌酶比直接从海参组织中提取的溶菌酶活性提高了30%;与鸡蛋清溶菌酶相比,抑菌谱范围要广很多,尤其对于鸡蛋清溶菌酶不能作用的革兰氏阴性菌抑菌效果更明显。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及利用生物技术生产重组海参溶菌酶的方法,属于分子生物学制 药
.本专利技术还涉及利用该方法生产出来的重组海参溶菌酶。
技术介绍
溶菌酶是一种能水解粘多糖的碱性酶,它能催化细菌细胞壁中粘多糖N-乙 酰胞壁酸和N-乙酰葡萄糖胺之间的(3-l, 4糖苷键的水解,导致细胞裂解,内容 物逸出而使细菌死亡。它广泛存在于自然界动植物和微生物的组织、体液及分 泌物中,在生物机体的免疫防御系统中发挥重要作用。对于缺少特异性免疫的 无脊椎动物而言,抗菌效应尤为重要,而无脊椎动物组织中分布最广泛的抗菌 蛋白即是溶菌酶。不仅如此,溶菌酶还作为无脊椎动物的一种重要的消化酶, 通过分解微生物来获得生长所需的部分C、 N源。溶菌酶作为天然的抗菌剂、免疫增强剂和防腐剂目前广泛应用于医药、食 品及饲料等行业。近年来随着海洋生物鱼类、虾类、贝类以及海珍品,如海参、 鲍鱼等养殖产量的快速增长,随之而来的是海水养殖生产中的品质退化、养殖 水平低、疾病泛滥及环境污染等问题。目前在水产品养殖以及畜禽生产中使用 抗生素带来的问题也越来越受到人们的关注, 一是耐药性问题,二是药物残留 问题,其副作用是不可忽视本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组海参溶菌酶的生产方法,其特征在于该方法是将海参溶菌酶基因(SEQ ID NO.1)连接到真核表达载体pPIC9K中构建重组质粒,并将所形成的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168中,经甲醇诱导表达,然后经阳离子交换树脂层析柱纯化后 得到重组溶菌酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:丛丽娜朱蓓薇王秀霞谷跃峰杨冠科郝明董秀萍
申请(专利权)人:大连工业大学
类型:发明
国别省市:91[中国|大连]

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