一种新的多肽--人自身免疫疾病相关蛋白16和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人自身免疫疾病相关蛋白１６，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人自身免疫疾病相关蛋白１６的多核苷酸的用途。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人自身免疫疾病相关蛋白16，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。大多数真核基因都是断裂基因，断裂基因的转录产物需要通过拼接，去除插入部分(即内含子，intron)，使编码区(外显子，exon)成为连续序列。这是基因表达调控的一个重要环节。内含子具有多种多样的结构，拼接机制也是多种多样的。其中mRNA前体的剪切拼接过程中就需要snRNP的参与，snRNP称为细胞核小分子核糖核酸蛋白，是由snRNA(一类存在于真核生物细胞内的分子量较小的RNA)与蛋白质结合形成的。由于snRNA含有大量的尿苷酸，因此也称为U-snRNA。SnRNP几乎存在于所有的脊椎动物细胞内，已经发现有U1、U2、U3、U4、U5、U6等六种U-snRNP。mRNA前体s的剪接作用是是比较复杂的，必须通过多种通过U-snRNP组成的拼接体才能完成。在这过程中，不同种snRNP起着不同的作用。本专利技术中所提到的snRNP是U2-snRNP，它在剪接过程中的主要作用是识别和结合mRNA前体的分枝点。U2-snRNP辅助因子是一个异二聚体大亚单位的分子量为65kD，小亚单位分子量为35kD。小亚单位U2AF35拥有退化的精氨酸、丝氨酸丰富区和一个羧基端的RNA识别motif区。U2AF35不仅在组成型拼接中起作用，而且在增强子依靠型的拼接中也有作用。它是大亚单位U2AF65与增强子复合体之间的桥梁，以使U2AF65结合到相邻的内含子上根据氨基酸同源比较的结果，本专利技术的多肽被推断鉴定为人自身免疫疾病相关蛋白16。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人自身免疫疾病相关蛋白16以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人自身免疫疾病相关蛋白16的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人自身免疫疾病相关蛋白16的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人自身免疫疾病相关蛋白16的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人自身免疫疾病相关蛋白16的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人自身免疫疾病相关蛋白16的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人自身免疫疾病相关蛋白16异常相关的疾病的方法。在本专利技术的第一方面，提供新颖的分离出的人自身免疫疾病相关蛋白16，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。在本专利技术的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少66％相同性(a)编码上述人自身免疫疾病相关蛋白16的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中682-1113位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1174位的序列。在本专利技术的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。如本专利技术所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的人自身免疫疾病相关蛋白16”是指人自身免疫疾病相关蛋白16基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化人自身免疫疾病相关蛋白16。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。人自身免疫疾病相关蛋白16多肽的纯度能用氨基酸序列分析。本专利技术提供了一种新的多肽——人自身免疫疾病相关蛋白16，其基本上是由SEQID NO:2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人自身免疫疾病相关蛋白16的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人自身免疫疾病相关蛋白16相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(Ⅰ)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(Ⅱ)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(Ⅲ)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(Ⅳ)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽的多核苷酸组成。本专利技术的多核苷酸序列包括SEQ ID NO:1的核苷酸序列。本专利技术的多核苷酸是从人胎脑组织的cDNA文库中发现的。它包含的多核苷酸序列全长为1174个碱基，其开放读框(682-1113)编码了143个氨基酸。根据氨基酸序列同源比较发现，此多肽与人U2 snRNP辅助小亚基有66％的同源性，可推断出该人自身免疫疾病相关蛋白16具有人U2 snRNP辅助小亚基相似的结构和功能。本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或是RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:1所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本专利技术所用，“简并的变异体”在本专利技术中是指编码具有SEQ ID NO:2的蛋白质或多肽，但与SEQ ID NO:1所示的编码区序列有差别的核酸序列。编码SEQ ID NO:2的成熟多肽的多核苷酸包括只有成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。术语“编码多肽的多核苷酸”是指包括编码此多肽的多核苷酸和包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。本专利技术还涉及上述描述多核苷酸的变异体，其编码与本专利技术有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片断、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人自身免疫疾病相关蛋白１６，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博道基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]