一种新的多肽—人丝/苏氨酸蛋白激酶52和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人丝／苏氨酸蛋白激酶５２，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人丝／苏氨酸蛋白激酶５２的多核苷酸的用途。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽－－人丝/苏氨酸蛋白激酶52，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。多细胞有机体的进化依赖于细胞之间的互相通讯联系。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他的细胞群体产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种生命过程。细胞间以3种方式进行通讯(1)细胞通过分泌化学信号进行相互通讯；(2)细胞直接接触，通过与质膜结合的信号分子影响其他细胞；(3)细胞间形成缝隙连接使细胞质相互沟通，通过交换小分子来调节代谢反应。信号传导是将细胞外信号转换为细胞内信使的过程。亲水性信号分子包括神经递质、生长因子、细胞因子、局部化学递质和大多数激素，它们不能穿过质膜，只能与细胞表面的受体结合形成配体受体复合物进行信号转导。根据信号转导的机制和受体蛋白的类型，细胞表面受体可分为3种(1)离子通道耦联的受体；(2)连接酶的表面受体；(3)与G蛋白耦联的受体。蛋白质磷酸化是真核生物细胞调控中一个基本调控机制，同时也是最普通的蛋白质修饰方式。例如，细胞分裂，细胞新陈代谢，细胞粘连和细胞迁移，细胞间通讯以及信号传导等细胞活动都出现了蛋白质磷酸化。为了完成这些功能，人类编码基因中有2％-4％的基因编码大约2000种不同的激酶。(Hunter,1996)丝/苏氨酸蛋白激酶是一类可以使其作用底物上的丝/苏氨酸残基磷酸化的蛋白激酶，在丝/苏氨酸蛋白激酶活化后向下游传递信号的过程中包括了很多丝/苏氨酸残基磷酸化级联反应，从而调控很多基因的表达。丝/苏氨酸蛋白激酶分为很多种类，根据已有的研究发现，但是它们在结构上类似，都可以活化MAP激酶的激酶(MAPKK)，丝/苏氨酸蛋白激酶被证明可以与MAPKK相互作用，MAPKK的结合功能域被证明存在于离丝/苏氨酸蛋白激酶上，丝/苏氨酸蛋白激酶具体的结构请参阅相关文献。丝/苏氨酸蛋白激酶可以使MAP激酶的激酶(MAPKK)的丝/苏氨酸残基磷酸化，从而活化了MAPKK。MAPKK磷酸化MAPK的苏氨酸和酪氨酸两个残基使之活化。这种双特异性的磷酸化就保证了MAPK不被其他蛋白激酶磷酸化，一直保持钝化状态，直至MAPKK活化后才能使MAPK活化，所以MAPKK唯一的底物就是MAPK。活化后的MAPK进入细胞核，通过磷酸化其他激酶或基因调节蛋白(转录因子)的丝/苏氨酸残基来活化它们，向下游传递信号，调节一些基因的转录表达，比如，jun和Elk-1或一些蛋白激酶和其他蛋白质。虽然对丝/苏氨酸蛋白激酶的结构和功能的具体研究还待进一步完成，但我们可以肯定的是作为一种丝/苏氨酸蛋白激酶，在Ras和PKC等活化的丝/苏氨酸磷酸化的级联反应中有重要的作用，间接的，丝/苏氨酸蛋白激酶对于信号传导过程有不可忽略的作用，它可以可以调控细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种生命过程。根据氨基酸同源比较的结果，本专利技术的多肽被推断鉴定为一种新的人丝/苏氨酸蛋白激酶52(HPK52)，其同源蛋白为小家鼠的丝/苏氨酸蛋白激酶51PK，蛋白号是AF080252。由于如上所述人丝/苏氨酸蛋白激酶52蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人丝/苏氨酸蛋白激酶52蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人丝/苏氨酸蛋白激酶52蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽－－人丝/苏氨酸蛋白激酶52以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人丝/苏氨酸蛋白激酶52的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人丝/苏氨酸蛋白激酶52的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人丝/苏氨酸蛋白激酶52的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽－－人丝/苏氨酸蛋白激酶52的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽－－人丝/苏氨酸蛋白激酶52的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人丝/苏氨酸蛋白激酶52异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中179-1603位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1965位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人丝/苏氨酸蛋白激酶52蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人丝/苏氨酸蛋白激酶52蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人丝/苏氨酸蛋白激酶52表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人丝／苏氨酸蛋白激酶５２，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]