结合人补体C5的多肽制造技术

本发明专利技术涉及C5结合多肽，其包括C5结合基序，BM，所述基序由选自以下的氨基酸序列构成：i)EX2X3X4A X6X7EID X11LPNL X16X17X18QW X21AFIX25X26LX28D，和ii)与i)中定义的序列具有至少86％同一性的氨基酸序列，其中多肽结合C5。本发明专利技术还涉及C5结合多肽，用于在治疗中使用，例如用于在C5相关的状况的治疗中使用，以及涉及治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合人补体C5的多肽
本公开内容涉及结合人补体组分5(C5)的多肽，并涉及此类多肽在治疗中的用途。背景补体蛋白质C5是补体系统的核心组分，所述补体系统是先天免疫系统的关键部分。补体系统是复杂的免疫生存系统(immunesurvivalsystem)，具有处于严格控制的、多样化的过程的许多任务。其功能之一是通过从细胞碎片以及凋亡和坏死细胞中识别健康的宿主组织，作为对抗由其它生物体感染的第一道宿主防线(firstlinehostdefense)。此外，其参与免疫复合物的清除、适应性免疫应答的调节、组织再生的促进、血管生成、干细胞的动员和中枢神经系统的发育(Woodruff等人MolImmunol2011,48(14):1631-1642)；Ricklin等人NatImmunol2010,11(9):785-795)。干扰补体激活和调节的微妙平衡的任何触发，例如错误的或不受限制的激活或非足够的调节可导致病理状况，包括导致广泛的组织损伤的宿主细胞的自我攻击。补体系统由约30种蛋白质组成。存在三种途径启动补体免疫；使用C1q识别细胞表面的免疫复合物的经典途径、当甘露糖结合凝集素(MBL)识别某些糖时启动的凝集素途径、以及通过补体因子3(C3)的水解自发启动的旁路途径，所述补体因子3(C3)的水解是一种被不在侵入病原体上存在的某些哺乳类细胞表面分子抑制的过程。旁路途径还可作为补体系统的放大回路(amplificationloop)。所有三种途径在C3水平汇合(converge)。将C3裂解为C3a和C3b导致转化酶的形成，其进而将补体因子5(C5)裂解为C5a和C5b。C5a是各种免疫细胞的非常有效的引诱剂(attractant)，而C5b与C6-9寡聚以形成称为膜攻击复合物(MAC)或有时称为末端补体复合物(TCC)的孔。补体系统的激活引起一些具有中和病原体的目的的机制：细胞诸如入侵的细菌表面MAC的形成导致裂解；C3和C4裂解产物C3b和C4b的积累(deposition)辅助调理作用(opsonization)，导致病原体通过巨噬细胞的吞噬作用；以及过敏毒素诸如C3a和C5a引诱单核细胞和嗜中性粒细胞至激活位点，上调表面标志物，导致增加的免疫敏感性及细胞因子的释放。C5是190-kDa的糖蛋白，包括2个二硫键连接的多肽链α和β，分子量分别为115kDa和75kDa(Tack等人Biochem1979,18:1490-1497)。Haviland等人(JImmun1991,146:362-368)构建了人补体前-C5(pro-C5)的完整cDNA序列，其被预测编码1,676个氨基酸的前分子(pro-molecule)，所述前分子包含分隔β和α链的18个氨基酸的前导肽和4个氨基酸的接头。C5裂解为C5a和C5b的阻断阻止MAC的形成和促炎性C5a的形成，但保持上游补体效应系统完整，允许C3/C4介导的调理作用。补体系统在针对病原体的防御中的关键作用通常使其成为药学干预的感兴趣的靶。这通过补体的许多突变或受损的调节参与各种疾病和状况的事实被强调。这些包括对自身免疫性疾病例如系统性红斑狼疮(SLE)的增加的易感性，其中免疫复合物的积累触发了经典途径(Manderson等人AnnuRevImmunol2004,22:431-456)。此外，补体蛋白质C1-C5的突变往往导致SLE或SLE样症状。具有补体系统强烈参与的其它自身免疫性疾病是类风湿关节炎(RA)，其中免疫复合物可激活RA关节中的补体；干燥综合征、皮肌炎及其它自身抗体驱动的疾病诸如格林-巴利综合征(Guillain-Barrésyndrome,GBS)、Fisher综合征(Kaida等人J.Neuroimmun2010,223:5-12)不同类型的血管炎、系统性硬化症、抗肾小球基底膜(抗GBM)和抗磷脂综合征(APS)(Chen等人JAutoimmun2010,34:J276-J286)。补体系统还参与神经退行性紊乱诸如阿尔茨海默氏病(AD)，其中Aβ斑块直接激活补体系统，导致C5a介导的小神经胶质细胞的募集。这在当C5aR拮抗剂在AD小鼠模型中被证明是神经保护的时被进一步证实(Fonseca等人JImmunol2009,183:1375-1383)。针对乙酰胆碱受体的自身抗体和随后的补体激活是重症肌无力的最常见原因，重症肌无力是一种影响神经肌肉接头的疾病(Toyka和Gold,SchweizerArchiveNeurolPsych2007,158:309-321)。MAC的形成涉及多发性硬化(MS)的病理生理学(Oh等人ImmunolRes2008,40:224-234)。此外，在帕金森氏病、亨廷顿氏病和朊病毒病诸如Creutzfeld-Jacob病中，补体激活是病理学的一部分(Bonifati和Kishore,MolImmunol2007,44:999-1010)。在创伤愈合中，炎性反应是恢复组织内稳态的关键组分，且补体系统参与损伤组织的早期识别。然而，在例如慢性创伤和严重烧伤模型中，补体通过例如C1抑制剂的抑制导致改善的愈合和减少的组织损伤，显示补体。此外，各种补体缺陷，诸如由C4敲除小鼠示例的，被发现保护免受由创伤引起的长期组织损伤(综述于Cazender等人ClinicalandDevelopmentalImmunology2012中，在线出版)。最近已显示，肿瘤的生长和增殖通过补体激活特别是通过C5a被促进，且C5a受体的阻断减慢该过程。此外，相比野生型同窝小鼠，缺乏C3的小鼠显示显著较慢的肿瘤生长(Markiewski等人NatImmunol2008,9:1225-1235)。功能失调性补体调节是若干罕见至超罕见状况诸如阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)和非典型性溶血尿毒综合征(aHUS)的原因，其中溶血是病理中的关键特征。在PNH中，具有突变的编码磷脂酰肌醇N-乙酰氨基葡萄糖转移酶亚基A的PIG-A基因的造血干细胞的克隆在血细胞库中占优势(takeover)。该突变导致GPI锚定蛋白质诸如补体调节剂CD55和CD59的损失。表面缺乏CD55和CD59的红血细胞暴露于通过MAC的补体介导的裂解。在临床上，PNH的表现为导致贫血、血栓形成和骨髓衰竭的溶血。非典型性HUS是通过主要为旁路途径的调节蛋白质中的突变，例如通过因子H中的突变引起的。眼部被强烈指示作为补体驱动的病理的部位。视力丧失的最常见原因是年龄相关性黄斑变性(AMD)，其中在其较为严重的形式(渗出性或湿性AMD)中，在视网膜下形成病理性脉络膜神经血管膜。在美国，约10％的65-74岁的群体显示黄斑变性的病征，并且多达5％的群体由于AMD而患有视力障碍。这些数目随着年龄而显着增加，但也存在遗传因素。在这些基因中，与AMD最强烈相关的是补体因子H、因子B及C3和C1抑制剂(Bradley等人Eye2011,25:683-693)。此外，使用各种补体阻断分子(complementblockingmolecule)的一些研究和临床试验已被证明是有益的，表明C5阻断分子可帮助这些患者群体。然而，目前晚期AMD的治疗旨在通过玻璃体内注射例如雷珠单抗(单克隆抗体片段)和贝伐单抗(单本文档来自技高网...

【技术保护点】
C5结合多肽，所述C5结合多肽包括C5结合基序，BM，所述基序由选自以下的氨基酸序列构成：i)EX2X3X4A X6X7EID X11LPNL X16X17X18QW X21AFIX25X26LX28D，其中，彼此独立地，X2选自H、Q、S、T和V；X3选自I、L、M和V；X4选自A、D、E、H、K、L、N、Q、R、S、T和Y；X6选自N和W；X7选自A、D、E、H、N、Q、R、S和T；X11选自A、E、G、H、K、L、Q、R、S、T和Y；X16选自N和T；X17选自I、L和V；X18选自A、D、E、H、K、N、Q、R、S和T；X21选自I、L和V；X25选自D、E、G、H、N、S和T；X26选自K和S；X28选自A、D、E、H、N、Q、S、T和Y；以及ii)与i)中定义的序列具有至少86％同一性的氨基酸序列，其中所述多肽结合C5。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.02.20 SE 1250145-81.C5结合多肽，所述C5结合多肽包括三螺旋束蛋白质结构域，所述三螺旋束蛋白质结构域包含C5结合基序，BM，所述基序形成所述三螺旋束蛋白质结构域中具有互连环的两个α-螺旋的部分并且由选自SEQIDNO:1-248中的任一个的氨基酸序列构成，其中所述C5结合多肽抑制C5的裂解。2.根据权利要求1所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列选自以下的任一个：SEQIDNO:1-12、SEQIDNO:20、SEQIDNO:23-24、SEQIDNO:26-28、SEQIDNO:32-35、SEQIDNO:38-39、SEQIDNO:41、SEQIDNO:46、SEQIDNO:49、SEQIDNO:56-57、SEQIDNO:59、SEQIDNO:66、SEQIDNO:78-79、SEQIDNO:87、SEQIDNO:92、SEQIDNO:106、SEQIDNO:110、SEQIDNO:119、SEQIDNO:125、SEQIDNO:141、SEQIDNO:151、SEQIDNO:161、SEQIDNO:166、SEQIDNO:187、SEQIDNO:197、SEQIDNO:203、SEQIDNO:205、SEQIDNO:215和SEQIDNO:243。3.根据权利要求2所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列选自SEQIDNO:1-12中的任一个。4.根据权利要求1所述的C5结合多肽，其中所述三螺旋束蛋白质结构域选自来自金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的蛋白质A的结构域及其衍生物。5.根据权利要求1所述的C5结合多肽，所述C5结合多肽包括以下的氨基酸序列：i)K-[BM]-DPSQSXaXbLLXcEAKKLNDXdQ；其中[BM]是如权利要求1-3中任一项定义的C5结合基序；Xa选自A和S；Xb选自N和E；Xc选自A、S和C；并且Xd选自A和S。6.根据权利要求5所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列i)选自SEQIDNO:249-496中的任一个。7.根据权利要求6所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列i)选自以下的任一个：SEQIDNO:249-260、SEQIDNO:268、SEQIDNO:271-272、SEQIDNO:274-276、SEQIDNO:280-283、SEQIDNO:286-287、SEQIDNO:289、SEQIDNO:294、SEQIDNO:297、SEQIDNO:304-305、SEQIDNO:307、SEQIDNO:314、SEQIDNO:326-327、SEQIDNO:335、SEQIDNO:340、SEQIDNO:354、SEQIDNO:358、SEQIDNO:367、SEQIDNO:373、SEQIDNO:389、SEQIDNO:399、SEQIDNO:409、SEQIDNO:414、SEQIDNO:435、SEQIDNO:445、SEQIDNO:451、SEQIDNO:453、SEQIDNO:463和SEQIDNO:491。8.根据权利要求7所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列i)选自SEQIDNO:249-260中的任一个。9.根据权利要求1所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列选自SEQIDNO:497-757中的任一个。10.根据权利要求9所述的C5结合多肽，其中所述氨基酸序列选自以下的任一个：SEQIDNO:497-508、SEQIDNO:516、SEQIDNO:519-520、SEQIDNO:522-524、SEQIDNO:528-531、SEQIDNO:534-535、SEQIDNO:537、SEQIDNO:542、SEQIDNO:545、SEQIDNO:552-553、SEQIDNO:555、SEQIDNO:562、SEQIDNO:574-575、SEQIDNO:583、SEQIDNO:588、SEQIDNO:602、SEQIDNO:606、SEQIDNO:615、SEQIDNO:621、SEQIDNO:637、SEQIDNO:647、SEQIDNO:657、SEQIDNO:662、SEQIDNO:683、SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏洛塔·伯格哈德，马格纳斯·伯格伦德，帕特里克·斯托姆博格，马林·林德堡，埃琳·贡内里乌松，约阿希姆·菲尔德维什，
申请(专利权)人：瑞典孤儿比奥维特鲁姆有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞典;SE