内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法：首先，获得CCR5

The construction method of the conditional knockout of CCR5 gene in the mouse model of endothelial cells

The invention discloses a method for constructing a mouse model of endothelial cell conditioned knockout CCR5 gene: first, to obtain CCR5

【技术实现步骤摘要】
内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法
本专利技术涉及一种内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法，属于动物模型及其应用领域。
技术介绍
趋化因子受体CCR5(chemokinereceptor5)是一类G蛋白7次跨膜受体，分子量约为40.6KDa，由352个氨基酸残基组成，结构上可分为：胞外N末端、3个胞外环(extracellularloop)区域(ECL1、ECL2、ECL3)、3个胞内环区域、7个跨膜α螺旋和胞内C末端(SzpakowskaM,PerezBercoffD,ChevigneA.Closingthering:afourthextracellularloopinchemokinereceptors.Sciencesignaling,2014,7(341):pe21.)，主要表达在单核细胞和某些T细胞亚群。CCR5的配体主要为趋化因子CCL3(chemokineC-Cmotifligand3)、CCL4(chemokineC-Cmotifligand4)和CCL5(chemokineC-Cmotifligand5)。CCR5作为一种G蛋白偶联受体，通本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法，其特征在于：首先，获得CCR5

【技术特征摘要】
1.一种内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法，其特征在于：首先，获得CCR5loxp/loxp小鼠，然后与Tie-2-cre/ERT2小鼠交配，得到在内皮细胞中特异性敲除CCR5基因的杂合子小鼠，然后该杂合子小鼠进行相互交配，从而得到在内皮细胞中特异性敲除CCR5基因的纯合子小鼠；其中，CCR5loxp/loxp小鼠的构建方法包括以下步骤：(1)将Cas9mRNA、gRNA和DonorDNA混匀后，注射入小鼠的受精卵中，则Cas9蛋白在gRNA的靶向作用下对CCR5基因的DNA双链进行切割，从而诱发同源重组修复机制以DonorDNA为模板对损伤的CCR5基因进行修复，将LoxP序列整合到小鼠基因组中的特定位点；然后...

【专利技术属性】
技术研发人员：张钟文，廖琳，董建军，吴红霞，张瀚允，
申请(专利权)人：山东省千佛山医院，
类型：发明
国别省市：山东,37