核苷酸链修饰方法技术

本发明专利技术提供的核苷酸链修饰方法的特征在于，对３’端存在具有次黄嘌呤（Ｈｘ）等特定碱基的核苷酸序列的作为修饰对象的核苷酸链（Ｉ），用对含有所述特定碱基的核苷酸特异的分解酶进行作用，在所述作为修饰对象的核苷酸链（Ｉ）的３’端加上对目标修饰物质（例如具有氨基的ＮＨ↓［２］－Ｒ）具有结合能力的官能团（例如醛基），并在具有所述官能团的核苷酸链的３’端结合所述修饰物质。其特征还在于，通过将３’端存在具有成为酶底物的特定碱基的核苷酸序列的核苷酸链作为修饰对象，只分解所述的核苷酸序列部分，形成与目标修饰物质反应并结合的官能团。通过这样，可以对核苷酸链用修饰物质直接进行修饰，简便地标记化、标志化的同时，在以核苷酸链的固定化为目的的情况下，可以将修饰物质作为连接物质进行稳定、牢固的固定化。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及，尤其涉及用修饰物质直接修饰核苷酸链的3’端，将核苷酸链标记化、标志化、固定化的方法。
技术介绍
以往，在基因分析中，用于将DNA、RNA、寡核苷酸、核酸等核苷酸链标记化、标志化的修饰物质一直采用放射性同位素，但因为由半衰期产生的使用期限的限制、使用场所的限制、被射线照射的问题、废弃的问题等问题，其使用逐渐减少。近年来，作为替代放射性同位素的修饰物质，用荧光素等荧光物质或者生物素等，对核苷酸链进行修饰，将其标记化、标志化的方法被广泛使用。修饰核苷酸链的方法可以分为5’端修饰法、3’端修饰法、内部修饰法这3种。5’端修饰法，提出过通过5’端的磷酸基用生物素修饰的方法(参照例如下述的非专利文献1)。关于生物素，报道有利用生物素和亲和素(avidin)的高亲和性，用碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等酶修饰，利用这些酶的化学发光使基因分析高灵敏度化的方法(参照例如非专利文献2～3)。通过5’端的磷酸基修饰的方法除此之外还提出了很多(参照专利文献1和非专利文献4～13)。但是在通过5’端的磷酸基修饰的方法中，对核苷酸链，修饰物质的修饰量一般为1，而碱性磷酸酶会使核苷酸链5’端的磷酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
核苷酸链修饰方法，其中，对３’端存在具有特定碱基的核苷酸序列的作为修饰对象的核苷酸链，用对含有所述特定碱基的核苷酸特异的分解酶进行作用，在所述作为修饰对象的核苷酸链的３’端加上对目标修饰物质具有结合能力的官能团，并在具有所述官能团的核苷酸链的３’端结合所述修饰物质。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：上甲茂树，
申请(专利权)人：松下电器产业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]