治疗严重急性呼吸道综合症(SARS)的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了低聚化合物和组合物的设计和合成，给予这种低聚化合物和组合物能降低ＳＡＲＳ病毒的体内或体外活性、预防或治疗ＳＡＲＳ病毒相关疾病、检测ＳＡＲＳ病毒以及诊断ＳＡＲＳ病毒相关疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及低聚化合物和组合物的设计和合成，给予这种低聚化合物和组合物能降低SARS病毒的体内或体外活性、预防或治疗SARS病毒相关疾病、检测AARS病毒以及诊断SARS病毒相关疾病。
技术介绍
冠状病毒是一种感染人类和动物的病毒家族，包括一种引起普通感冒样呼吸疾病的病毒，称为人冠状病毒229E(Hco-V-229E)。该家族也包括禽感染性支气管炎病毒(IBV)、鼠肝炎病毒(MHV)、猪传染性胃肠炎病毒PRCoV、猪呼吸冠状病毒和牛冠状病毒等(Lai和Holmes，病毒书第35章)。冠状病毒是有包膜的巨大正链RNA病毒。它们在所有年龄的人群中引起普通感冒，占所有感冒的约15％。冠状病毒已是婴儿胃肠道疾病的病因。它们在动物中也引起有重要经济损失的疾病(如禽感染性支气管炎和猪传染性胃肠炎)。冠状病毒因为在电镜纤维照片中其包膜糖蛋白看起来像在病毒体外围形成了一个晕或冠而得名。冠状病毒也是有趣的，因为它们是唯一具有螺旋核衣壳的正链RNA病毒。在所有RNA病毒中，冠状病毒的基因组最大，而且通过独特的产生高频率重组的机制复制。病毒粒子通过在胞内膜上出芽而成熟，感染某些冠状病毒会诱导细胞融合(病毒学领域，D.M.Knipe，P.M.Howley编，2001，Lippincott Williams&Wilkins出版，Philadelphia，1163-1179)。人冠状病毒在培养基中生长缓慢，不能详细分析。大部分研究是用鼠肝炎病毒，一种在培养基中生长良好、涉及人毒株OC43的冠状病毒进行的。当该病毒识别细胞表面受体时开始感染，对于毒株229E，该受体被发现是氨肽酶N，对于OC43该受体是唾液酸。该病毒通过内吞作用和膜融合进入细胞。与大多数RNA病毒一样，冠状病毒复制完全在胞质中进行。一旦病毒RNA进入胞质，它就翻译产生依赖病毒RNA的RNA聚合酶，然后该酶产生病毒粒子RNA的全长互补(负链)拷贝。该负链作为七被帽和聚腺苷化的mRNA的转录模板。将这些安排为嵌套过程，其中所有RNA都具有相同的3’末端，但每个RNA都比下一个更大的RNA少1个基因。所有RNA具有相同5’末端，即72个核苷酸的前导序列，它仅在基因组RNA的5’末端编码。这提示各mRNA以通过合成前导序列开始转录、然后“跳”至一个基因的开始处而结束于相同的3’末端的机制转录。不管存在多少基因，每个mRNA上只翻译第一个基因(最接近5’末端的那个)。因此，在冠状病毒复制过程中不存在多蛋白加工。冠状病毒是冬季引起普通感冒的主要原因。在世界范围内都发现了这种病毒。在人们孩提时代就开始出现抗体，在超过90％的成年人中发现存在抗体。冠状病毒呼吸感染的次数每年都会有很大不同。最高的发生率出现在鼻病毒感冒最低的年份。冠状病毒感冒倾向于发生在限定的爆发周期。通过ELISA、补体结合或血凝反应测试进行实验室诊断。人冠状病毒不能通过培养生长而分离。临床上不能将冠状病毒引起的感冒与鼻病毒感冒区分。潜伏期是2-5天，症状持续5-7天。机体免疫集中在主要病毒表面糖蛋白E2上。尽管再感染因为高水平的病毒遗传重组通常是可能的，然而再感染会持续几年。冠状病毒通过呼吸分泌物气雾、粪-口途径和机械性传播而传播。大多数病毒生长在上皮细胞中。偶见肝、肾、心或眼，以及其它细胞类型如巨噬细胞的感染。在感冒型呼吸感染中，生长像是定位在上呼吸道上皮中，但是现在对于人呼吸冠状病毒没有足够的动物模型。临床上，大多数感染引起轻微、自限制的疾病(典型“感冒”或胃部不适)，但是可能有极少数神经并发症。2002年下，中华人民共和国的广东省报道了几百例非典型肺炎。几个月后，在加拿大、越南和香港发现了类似病例。世界卫生组织(WHO)将该突然出现的疾病确定为“严重极性呼吸综合症”或SARS。2003年3月，发现一种全新的冠状病毒(SARS-CoV)与SARS病例有关。至2003年4月下，全球25个国家报道了超过4300例SARS病例，导致约250人死亡。据信，SARS病毒通过咳嗽和打喷嚏产生的飞沫传播，但也可能包括其它传染途径，如手污染的物体。到2003年5月7日为止，WHO估计SARS病例的致死率为14-15％。到2003年6月3日为止，WHO报道的世界范围内SARS病例总数为8398。现在可能一般性描述该疾病进程。首次感染后的潜伏期约2-7天。一般感染均有发烧的特征，接下来的几天内就是无痰干咳，呼吸短促。该疾病引起3-10％的病例死亡。已经鉴定了SARS-CoV及其通常变体的全部基因组，SARS-CoV的基因组是29,727个核苷酸的聚腺苷化RNA，具有11个开放阅读框，41％的残基是G或C。它的基因组组织是典型冠状病毒的特征性基因顺序(5’-复制酶(rep)、刺突(S)、包膜(E)、膜(M)、核壳体(N)-3’，两端有短的非翻译区)。预计约占基因组三分之二的SARS-CoVrep基因编码两个进行共翻译蛋白水解加工的多蛋白。预计rep下游有4个开放阅读框(ORF)编码结构蛋白S、E、M和N，这与所有已知冠状病毒相同。没有发现存在于第2类和部分第3类冠状病毒中ORF1b和S之间的血凝-酯酶基因。系统发生分析和序列比较显示SARS-CoV与任何以前表征的冠状病毒都没有紧密的联系。冠状病毒也编码很多定位于S和E之间、M和N之间或N下游的非结构蛋白。这些非结构蛋白在不同的冠状病毒种中变化很大，其功能未知，而且对于病毒复制来说可有可无。现在，诊断测试是可行的，但是作为迅速控制疾病爆发的工具，所有的测试都有局限性。ELISA测试可信地检测抗体，但只有在出现临床症状后约20天才能进行。因此它不能用于在病例传播感染其他人之前的早期检测。第二种检测，即免疫荧光测定(IFA)在感染的第10天时可信地检测抗体。它也有ELISA测定的缺陷，因为在基于IFA的诊断前病人已有传染性。而且，IFA测定是苛刻、相当慢的测定，需要病毒在细胞培养中生长。第三种检测是聚合酶链式反应(PCR)分子测定，它可用于感染早期检测SARS病毒遗传物质，但却产生不良的假阴性结果。因此PCR测定即使与临床诊断评价相结合也可能检测不到实际上携带病毒的人，这造成面对已知在亲密的个人接触中容易传播的病毒的潜在流行时，给人们危险的假安全感觉(WHO，严重急性呼吸道综合症(SARS)。Wkly Epidemiol.Rec.，2003，78，121-122)。由于各种工业、医学、环境、质量和研究的原因，需要迅速和权威的微生物学鉴定。传统上，微生物学实验室通过直接检查和培养传染病病原行使对其鉴定的职责。自1980年代中期以来，研究者已经重复证明了分子生物学技术的实践用途，其中很多技术形成临床诊断测定的基础。这些技术中的一部分包括核酸杂交分析、限制性酶分析、遗传序列分析和核酸的分离和纯化(参见例如，J.Sambrook，E.F.Fritsch和T.Maniatis，分子克隆实验室手册，第2版，冷泉港出版社，冷泉港，纽约，1989)。这些步骤通常是耗时和冗长的。另外一个选择是聚合酶链式反应(PCR)或其它基于侧面引物扩增特异的靶DNA序列的扩增程序。最终，检测和数据分析将杂交事件转化为分析结果。其它用于检测生物样品的技术包括高分辨质谱(MS)、低分辨本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种靶向编码严重急性呼吸道综合症（ＳＡＲＳ）病毒核酸分子的含有８至约８０个核碱基的低聚化合物，其中，该化合物与编码ＳＡＲＳ病毒的核酸分子杂交并使ＳＡＲＳ病毒的表达至少降低５０％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：ST克鲁克，DJ埃克，R桑帕斯，SM弗利尔，C马西瑞，SA霍夫施塔勒，KS劳沃里，EE斯韦兹，BF贝克，FC贝内特，
申请(专利权)人：ISIS药物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US[]