转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种转基因油菜Ｔｏｐａｓ１９／２事件外源插入载体旁侧序列及其应用，涉及生物工程技术领域中转基因油菜的检测。本发明专利技术以转基因油菜品种Ｔｏｐａｓ１９／２为材料，利用Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司ＧｅｎｏｍｅＷａｌｋｅｒ试剂盒构建基因组文库，并利用引物：ＴＯＰＬＢ－１：５’ＴＣＧＣＣＣＡＡＴＡＧＣＡＧＣＣＡＧＴＣＣＣＴＴＣＣ３’和ＴＯＰＬＢ－２：５’ＡＧＴＣＣＣＴＴＣＣＣＧＣＴＴＣＡＧＴＧＡＣＡＡＣＧ３’与试剂盒提供的接头引物进行ＰＣＲ扩增，获得Ｔｏｐａｓ１９／２事件外源插入载体旁侧序列，序列为ＳＥＱ　　ＮＯ．１。其中第１－５５０位碱基与插入载体序列相同，第５５１－８２３位碱基与插入载体无同源性，为油菜基因组序列。根据插入载体序列和油菜基因组序列的接合序列，设计了引物ＴＯＰＬＧ：５’ＣＧＧＣＣＴＴＡＡＴＣＣＣＡＣＣＣＣＡＧ３’和ＴＯＰＬＶ：５’ＡＧＴＴＣＣＡＡＡＣＧＴＡＡＡＡＣＧＧＣＴＴ３’以及ＴａｑＭａｎ探针ＴＯＰＬＰ：５’ＦＡＭ－ＴＣＣＣＧＧＴＣＡＴＡＴＡＴＣＡＧＣＧＣＣＧＧＴＣ－ＴＡＭＲＡ３’，建立了转基因油菜外源基因整合事件Ｔｏｐａｓ１９／２的事件特异性定性、定量检测方法。本发明专利技术可以进一步用于建立转基因油菜Ｔｏｐａｓ１９／２的其他事件特异性ＰＣＲ检测方法研究。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种转基因油菜Ｔｏｐａｓ１９／２事件外源插入载体旁侧序列，其特征是：（１）第１至５５０个碱基来源于外源插入载体序列，ＳＥＱＮＯ．１；（２）第５５１至８２３个碱基来源于油菜基因组序列，ＳＥＱＮＯ．１；（３）由来 源于外源插入载体的第１至５５０个碱基和来源于油菜基因组序列的第５５１至８２３个碱基共同组成的ＤＮＡ序列，转基因油菜Ｔｏｐａｓ１９／２事件外源插入载体旁侧序列；。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：卢长明，吴刚，武玉花，肖玲，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]