一种IbGI蛋白、编码基因、重组载体与应用及其培育转基因植物的方法技术

技术编号:13458240 阅读:279 留言:0更新日期:2016-08-03 17:15
本发明专利技术公开了一种IbGI蛋白、编码基因、重组载体与应用及其培育转基因植物的方法。该IbGI蛋白为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;IbGI蛋白的编码基因是SEQ ID NO:1所示的DNA分子;含有所述编码基因的重组载体为将SEQ ID NO:1所示的DNA分子插入到pGWB5的两个attR位点之间得到的重组载体。本发明专利技术的IbGI蛋白及其编码基因和重组载体可调控植物开花过程,将编码IbGI蛋白的DNA分子导入目的植物,可得到提前开花的转基因植物。本发明专利技术提供的IbGI蛋白及其编码基因在提高植物开花与结实率方面具有重要的理论意义与应用价值,为转基因植物的培育奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了。该IbGI蛋白为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;IbGI蛋白的编码基因是SEQ ID NO:1所示的DNA分子;含有所述编码基因的重组载体为将SEQ ID NO:1所示的DNA分子插入到pGWB5的两个attR位点之间得到的重组载体。本专利技术的IbGI蛋白及其编码基因和重组载体可调控植物开花过程,将编码IbGI蛋白的DNA分子导入目的植物,可得到提前开花的转基因植物。本专利技术提供的IbGI蛋白及其编码基因在提高植物开花与结实率方面具有重要的理论意义与应用价值,为转基因植物的培育奠定了基础。【专利说明】一种I bG I蛋白、编码基因、重组载体与应用及其培育转基因植 物的方法
本专利技术属于基因工程领域,具体涉及一种与植物开花相关蛋白、编码基因、重组载 体与应用,还具体涉及一种培育转基因植物的方法。
技术介绍
虽然植物的生命周期长短不一,但是它们基本上都有着相同的生长阶段,主要包 括胚胎期、营养生长期和生殖生长期。而植物开花则是由营养生长向生殖生长的过度,它是 一个非常重要的时期,决定着植物生长发育进程的快慢,而且对植物生物量的积累和农作 物产量的高低起着至关重要的作用。植物的开花受多种因素的影响,包括植株营养状态、环 境温度和光周期等,而植株正是通过调节体内的一系列基因的表达变化来感知这些因素变 化的影响。因此,认识植物开花调控的分子机制,进而通过遗传改良的方法调控植物的开花 期,已成为当前分子生物学及农业科学家们研究的重点和热点。 现今,通过分子生物学技术,开展植物开花相关功能基因的挖掘工作,对我们培育 高产作物新品种具有重要的应用价值。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种IbGI蛋白。为实现上述目的,本专利技术所提供的IbGI蛋白,来源于甘薯(Ipomoea batatas),为 如下(1)或(2)的蛋白质: (l)SEQ ID N0:2所不的氣基酸序列组成的蛋白质; (2)SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨 基酸残基且与植物开花相关的由(1)衍生的蛋白质。 序列表中SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列由1166个氨基酸残基组成,所述一个或 几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加是指不多于十个氨基酸残基的取代和/或缺失 和/或添加。 本专利技术的第二个目的是提供编码所述IbGI蛋白的基因。 为实现上述目的,本专利技术所提供的IbGI蛋白的编码基因,是如下(1)-(3)中任何一 种DNA分子: (l)SEQ ID N0:1 所示的DNA分子; (2)在严格条件下与(1)限定的DNA分子杂交且编码植物开花相关蛋白的DNA分子; (3)与(1)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有 85%、至少具有90 %、至少具有95 %、至少具有96 %、至少具有97 %、至少具有98 %或至少具 有99 %同源性且编码植物开花相关蛋白的DNA分子。 所述严格条件为:50°C,在7%SDS、0.5M Na3P〇4和ImM EDTA的混合溶液中杂交,在 65°(:,0.1\33(:,0.1%303中漂洗;也可为:用6\33(:,0.5%303的溶液,在65°(:下杂交,然后 用 2XSSC,0.1%SDS 和 1XSSC,0.1% SDS 各洗膜一次。其中,序列SEQ ID N0:1的长度为3501bp,其开发阅读框(ORF)为来自5'末端第1位 至第3501位碱基,其编码氨基酸序列是序列表中SEQ ID NO:2所示的蛋白。本专利技术的第三个目的是提供含有所述IbGI蛋白的编码基因的重组载体。 本专利技术提供的重组载体为将SEQ ID N0:1所示的DNA分子插入到pGWB5的两个attR 位点之间得到的重组载体。本专利技术的第四个目的是提供所述IbGI蛋白、编码基因和含有所述编码基因的重组 载体在调控植物开花过程中的应用。 所述植物为长日照植物拟南芥(Arabidopsis thaliana);所述调控植物开花过程 为控制植物开花时间和开花数量;所述开花时间具体为统计植物抽薹时莲座叶数量体现, 所述开花数量具体由检测成花基因FT(Flowering locus T)表达量体现。 本专利技术的第五个目的是提供所述IbGI蛋白、编码基因和含有所述编码基因的重组 载体在培育转基因植物中的应用。具体的,所述转基因植物具有如下性状:抽薹开花时间提 前;所述植物为长日照植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)。 本专利技术的第六个目的是提供一种培育提前开花的转基因植物的方法。本专利技术所提供的培育转基因植物的方法,为将编码上述IbGI蛋白的DNA分子导入 目的植物,获得转基因植物,所述转基因植物比目的植物提前开花。 上述方法中,所述编码上述IbGI蛋白的DNA分子通过上述的重组载体导入目的植 物。 上述方法中,所述目的植物为gi-2突变体拟南芥。 本专利技术提供了一种IbGI蛋白及其编码基因,将该基因导入拟南芥gi-2突变体中, 得到了转IbGI拟南芥植株,结果证明IbGI能够恢复拟南芥gi-2突变体表型,使其正常开花 结实。说明IbGI蛋白及其编码基因在植物开花过程中起着重要的作用。本专利技术提供的IbGI 蛋白及其编码基因在提高植物开花与结实率方面具有重要的理论意义与应用价值。【附图说明】 图1为转IbGI拟南芥植株的PCR检测结果图;图2为转IbGI拟南芥开花变化结果图; 图3为FT基因相对表达量差异图。【具体实施方式】下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细描述。 下述实施例中所用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。 下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径获得。实施例1 与甘薯开花相关蛋白IbGI及其编码基因的获得实验材料:将甘薯品种Sinhwangmi(由韩国生命工学研究院赠予)在苗床催芽,待 生长约30天后取1-2片新鲜叶片,液氮速冻,-80°C保存。 1、叶片总RNA提取与纯化 RNA提取所用溶液、器皿等均经过DEPC水的特殊处理,其操作严格按照《分子克隆 实验指南(第二版)》(2005-3-l,J.萨姆布鲁克等,科学出版社)有关RNA操作的要求进行,严 防RNase污染。 采用美国GIBIC0L公司生产的Trizol试剂进行总RNA的提取,具体步骤如下: 1)取甘薯品种Sinhwangmi叶片约0 ? 3g; 2)用液氮研磨,将磨好的样品转入1 .5ml离心管,并且以每0. lg样品对应 lmlTrizol的比例加Trizol试剂,振荡混勾,室温放置5min左右,4°C,12000Xg离心10min; 3)取上清至RNase-free的离心管中,加入氯仿(Trizol试剂的1/5体积),剧烈震荡 15s,室温放置2-3min,4°C,12000 X g离心 lOmin; 4)取上清,加入异丙醇(每mLTrizol试剂对应0.5mL异丙醇)并混匀,室温放置15-30min左右,4°C,12000 X g离心10-15min,得白色片状RNA沉淀; 5)加入75%乙醇U TRIzoL试剂的1倍体积),漂洗1次,4°C,7400Xg离心5min。倒掉酒精,在超净工作台上本文档来自技高网
...

【技术保护点】
一种IbGI蛋白,其特征在于,该蛋白来源于甘薯,为如下(1)或(2)的蛋白质:(1)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(2)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基且与植物开花相关的由(1)衍生的蛋白质。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:唐维
申请(专利权)人:江苏徐淮地区徐州农业科学研究所
类型:发明
国别省市:江苏;32

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1