用重组大肠杆菌制备N-末端乙酰化修饰的胸腺素α的方法技术

本发明专利技术公开了一种用重组大肠杆菌制备Ｎ－末端乙酰化修饰的胸腺素α的方法。该方法包括胸腺素α基因的获得，含胸腺素α基因的重组表达载体的构建，转化原核细胞，原核细胞的培养及胸腺素α的表达，从培养物中分离纯化Ｎ－末端乙酰化修饰的胸腺素α。本发明专利技术还公开了一种用重组大肠杆菌制备Ｎ－末端乙酰化修饰的的胸腺素α原，然后切割分离制备Ｎ－末端乙酰化的胸腺素α１、α１１或其类似物的方法。Ｎ－末端乙酰化修饰的胸腺素α具有调节机体免疫力、细胞增殖和机体细胞因子的合成与分泌等作用，在抗病毒、抗肿瘤方面也有较广阔的应用前景。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种应用基因工程手段制备N-乙酰化蛋白质的方法，具体地说是。
技术介绍
胸腺素α是一族具有相同或相似的N-端序列的免疫调节多肽，包括胸腺素α原、胸腺素α1、胸腺素α11等。不同物种的胸腺素α具有很高的保守性，为方便起见，本专利技术只提到人胸腺素α，但其他脊椎动物的胸腺素α均包括在内。人胸腺素α原(proT)是由109个氨基酸组成的酸性蛋白，其谷氨酸和天门冬氨酸的含量大于30％，等电点3.55，可与组蛋白结合，组织分布广泛，除胸腺外，脾、淋巴、肝、肾、睾丸、卵巢、脑等组织也可检测到其mRNA。胸腺素α原具有免疫刺激活性，可增强机体抗病毒、肿瘤和真菌等的能力。它是胸腺素α1和胸腺素α11的前体，其N-末端28个和35个氨基酸分别与胸腺素α1和胸腺素α11相同。但胸腺素α原的免疫刺激活性明显高于胸腺素α1，提示其除N-末端的28肽外的其余部分也有重要作用。N-末端乙酰化的胸腺素α1已上市，商品名“日达仙”，用于治疗病毒性肝炎等，它是采用人工化学合成的方法得到的，人工化学合成的方法具有成本高，得率低等弱点。人胸腺素α原的cDNA编码110个氨基酸，起始甲硫氨酸后即为成熟肽，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用重组大肠杆菌制备Ｎ－末端乙酰化修饰的胸腺素α的方法，包括以下步骤：（１）胸腺素α基因的制备；（２）胸腺素α基因与表达载体连接，构建重组表达质粒；（３）含胸腺素α基因的重组质粒转化大肠杆菌，进行培养表达； （４）从培养物中分离含Ｎ－末端乙酰化修饰的胸腺素α的组分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴军，马清钧，唱韶红，巩新，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]