一种稳定同位素标记的**N-L-天冬氨酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种稳定同位素标记的［１５］↑Ｎ－Ｌ－天冬氨酸的制备方法，该制备方法包括以下工艺步骤：（１）发酵产酶所采用的微生物：大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ　　１１３０３或ＣＧＭＣＣ１．８８１；（２）斜面培养；（３）发酵培养；（４）酶反应；（５）提取精制及［１５］↑Ｎ的回收。与现有技术相比，本发明专利技术已建立起一套实验室规模的生产工艺，体现出了酶法制备［１５］↑Ｎ－Ｌ－氨基酸的优越性，有利于［１５］↑Ｎ利用率的提高及后提取工艺的简化，减少了生产成本，提高了产品品质，以较高的［１５］↑Ｎ利用率得到丰度下降值很小的产品，且提取得率很高，大大提高了产品的市场竞争力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种15N-L-天冬氨酸的制备方法，具体地说是涉及一种以大肠杆菌游离整体细胞作酶源来制备稳定同位素标记的15N-L-天冬氨酸的方法；属于稳定性同位素标记化合物生产领域，涉及到微生物酶和生物下游分离技术。
技术介绍
由于15N比普通的14N多一个质量单位，而且其核自旋I＝1/2，具有核磁共振信号，因此可利用它的质量效应和同位素效应，借助质谱等测试技术，获得宝贵的结构信息。所以无放射性的稳定同位素标记的氨基酸因有着独特的示踪作用而得到广泛的应用。15N标记的氨基酸，是研究人体蛋白质代谢和个别氨基酸代谢，以及氨基酸之间转氨作用的不可缺少的示踪物。随着人类基因图谱的测定、蛋白质工程的发展及其他相关科学的快速发展，15N-L-天冬氨酸等标记氨基酸将在医学、药物学、生物学、生命科学、农业科学、有机化学等领域得到更为广泛的应用。传统的生产15N-L-氨基酸的方法可采用有机合成法、微生物发酵法或酶法及标记蛋白质分解分离制备法等。采用合成法比较简单，但需要光学拆分使15N原料利用率大为降低，成本上升。标记蛋白质分解分离制备法常用于制备复合氨基酸，要分离得到单一氨基酸很难。采用酶法生产本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种稳定同位素标记的［１５］↑Ｎ－Ｌ－天冬氨酸的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下工艺步骤：　　　　（１）．发酵产酶所采用的微生物：　　　　大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　　ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ１１３０３或ＣＧＭＣＣ１．８８１；　　　　（２）．斜面培养：　　　　培养基为营养肉汁琼脂培养基（ｇ／Ｌ）：蛋白胨１０．０，牛肉膏３．０，氯化钠５．０，琼脂１５．０，蒸馏水１．０Ｌ，ｐＨ值６．８～７．２，定容至１．０Ｌ，分装，０．１ＭＰａ（１２１℃）灭菌２０分钟，菌种接入后２８℃～３２℃培养１６～２４小时；　　　　（３）．发酵培养：　　　　以碳源、氮源、微量元素离子配置成发酵培养基，调节其ｐＨ值５～...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：侯静华，周震，李良君，杜晓宁，宋明鸣，
申请(专利权)人：上海化工研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]