结合EPHA2的抗体及其使用方法技术

本文提供关于结合到抗原ＥｐｈＡ２的抗体的开发和表征的公开，所述抗原ＥｐｈＡ２存在于多种来自乳房、肺、前列腺和结肠的人类癌症。本文也公开了通过使用直接抗此抗原的此类抗体来诊断和治疗多种癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物学和免疫治疗的领域。更具体的，其与结合EphA2 的抗体家族的发现相关。本专利技术还提供了使用抗EphA2家族的抗体对与 EphA2相关的多种人类疾病和癌症的i貪断和/或治疗。
技术介绍
除了在诊断学中已知的应用，抗体已经表现出可以用作治疗剂。例如， 免疫治疗，或者近年来出于治疗目的已经使用抗体来治疗癌症。在癌症治 疗中的被动免疫治疗涉及单克隆抗体的使用。见例如Cancer: Principles and Practice of Oncology,第六版(2001)第20章，第495-508页。通过 直接抑制肿瘤细胞生长或存活，以及通过它们恢复机体免疫系统中天然细 胞杀伤活性的能力，这些抗体具有固有治疗生物学活性。这些物质可以单 独施用，或与放射治疗或化疗剂联合施用。批准分别用于治疗非霍奇金淋 巴瘤和乳腺癌的利妥昔单抗(Rituximab)和曲妥单抗(Trastuzumab)是此类 疗法的两个实例。备选的，抗体可以用于制备抗体缀合物，其中抗体连接 着毒剂并通过特异性结合肿瘤将物质引导到肿瘤。吉妥单抗 (Gemtuzumab ozogamicin)是批准用于白血病治疗的抗体缀合物的实例。结 合癌细胞，并具有潜在的诊断和治疗用途的单克隆抗体已经在文献中被公 开。见，例如，下列专利申请特别公开了一些靶蛋白的分子量美国专利 号6,054,561(200 KD c-erbB-2 (Her2)，及其他未知的大小为40-200KD的 抗原)以及美国专利号S力5《"4(50KD和5510),癌胚蛋白质)。临床试验 中和/或批准用于治疗实体瘤的抗体实例包括曲妥单抗(抗原180 kD， HER2/neu)、依决洛单抗(Edrecolomab)(抗原40-50 kD， Ep-CAM)、抗 人乳脂肪球(HMFG1)(抗原〉200 KD， HMW黏蛋白)、西妥昔单抗 (Cetuximab)(抗原150 KD和170 KD, EGF受体)、阿仑单抗 (Alemtuzumab)(抗原21-28 KD， CD52)以及利妥昔单抗(抗原35 KD， CD20)。用于治疗乳腺癌的曲妥单抗的抗原靶标(Her-2受体)，以及临床试验中 用于治疗一些癌症的西妥昔单抗的抗原靶标(EGF受体)，在多种正常人类 成体组织(包含皮肤、结肠、肺、卵巢、肝脏、及胰腺)中都存在可检测 的水平。使用上述治疗的安全差异可能是由表达水平、进入途径或抗体在 这些部位的活性之间的差异导致的。免疫治疗的另 一种类型是用抗原的主动免疫治疗或接种，所述抗原存 在于特定癌症或者指导该抗原表达的DNA构建体中，随后引起个体的免 疫应答，即，诱导个体主动产生抗其自身癌症的抗体。主动免疫尚不及被 动免疫治疗或免疫毒素常用。已经提出了一些疾病(包含癌症)进展的模型。理论范围是从单一感染/ 转化事件的起因，到由"疾病类似"或"癌症类似"组织类型逐步进化导 致为最终具有完全病理性或恶性能力的组织类型。一些学说认为对于癌症， 例如，单一突变事件足以引起恶性肿瘤，而另一些学说则认为后继的改变 也是必需的。另 一些学说则提出不断增加的突变负荷和肿瘤级别通过细胞 水平的突变选择事件连续体，对于瘤形成的起始和发展都是必须的。 一些 癌症靶标^皮发现仅存在肺瘤组织中，而其他则是存在于正常组织中并在肿 瘤组织中是表达上调和/或过量表达的。在这类情况下， 一些研究员主张过 量表达与恶性肿瘤的获得相关，同时另 一些研究员则主张过量表达仅仅是 作为导致病状加重的趋势标志物。理想的诊断和/或治疗抗体所需要的一个方面在于开发和表征与多种 癌症相关的抗原。只有极少数的抗原在多种类型的癌症中均表达(例如，"泛 癌(pan-cancer)"抗原)，而在非癌性细胞中只有有限的表达。此类抗原 的分离和纯化将可用于制备靶向该抗原的抗体(例如，诊断抗体或治疗抗 体)。与抗单一特定类型癌症的相关抗原的抗体相比，结合"泛癌，，抗原的 抗体能够靶向在不同组织中发现的多种癌症。该抗原也将用于药物发现(例如，小分子)和进一步对细胞调控、生长和分化的鉴定。位于病态细胞和/或癌细胞表面的新型靶标是需要的，所述新型耙标与 可以特异性识别细胞表面靼标的抗体和其他物质结合，可以用于治疗此类 疾病和/或癌症。基于本文公开的发现，存在对特异性识别位于细胞表面的 耙标的新型抗体和其他物质的进一步的需要，所述抗体和物质可以调控(通过降低或增强)EphA2的疾病促进活性。EphA2，以前已知为ECK，是在成人上皮细胞中表达的130KD的跨 膜受体酪氨酸激酶。见Lindberg等人(19卯)Mol. Cell. Biol. 10: 6316-6324。 EphA2是受体酪氨酸激酶Eph家族的一名成员，该家族的独 特之处在于它们识别锚定在相邻细胞细胞膜上的配体，已知为肝配蛋白。 见Bartley等人(1994) Nature 368: 558-560。人受体EphA2的序列在文献 中所知。其包含534个氨基酸的胞外结构域、24个氨基酸的跨膜结构域， 以及418个氨基酸的含有酪氨酸激酶结构域的胞质结构域。EphA2在多种癌细胞中过量表达，例如，在乳腺癌、前列腺癌、肺癌、 以及结肠癌和浸润性黑色素瘤(aggressive melanomas )中，但是在这些相 同组织的非癌性损伤中没有过量表达的报道。见，例如，Rosenberg等人 (1997) Am. J. Physiol. 273: G824-G832; Easty等人(1995) Int. J. Cancer 60: 129-136; Walker-Daniels等人(1999) Prostate 41: 275-280; Zantek等人 (1999) Cell Growth & Differ. 10: 629-638; Zantek等人(2001) Clin. Cancer Res. 7: 3640-3648; Zelniski等人(2001) Cancer Res. 61: 2301-2306; WO 01/121172;和WO 01/12840。此外，被转化而过量表达EphA2的细胞表 现出恶性增长和配体结合，导致EphA2被内化和降解，逆转了EphA2过 量表达的原癌基因效应。见Zelniski等人(2001) Cancer Res. 61: 2301-2306;和Walker-Daniels等人(2002) Mol. Cancer Res. 1: 79-87。本领域的其他人已经提议使用EphA2作为治疗靶标。 一名作者建议使 用EphA2的配体例如肝配蛋白Al与人类免疫球蛋白G融合。将表达 EphA2的细胞暴露于肝配蛋白Al-Fc融合蛋白质会导致EphA2表达的下 调。见Duxbury等人(2004) BBRC 320:1096-1102。抗eck/EphA2的抗体是已知的，见例如Lindberg等人(1990) Mol. Cell. Biol. 10: 6316-6324。其他人已经描述过4吏用抗EphA2抗体进行基于抗体 的靶向作用，见例如Charles-Kinch等人(2002) Cancer Res. 62:2840-2847， 其描述了使用本文档来自技高网...

【技术保护点】
基本纯化的免疫球蛋白或其抗原结合片段，其为ＳＰＬ１、ＬＵＣＡ１９、ＳＧ５或ＬＵＣＡ４０。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JP马瑟，PE罗伯茨，
申请(专利权)人：雷文生物技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]