本发明专利技术描述了抗ＴＷＥＡＫ抗体。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合TWEAK的抗体交叉引用的相关申请本申请要求2005年5月27日提交的美国申请60/685,149的优先权，该 申请全部内容通过引用并入本文。技术背景与肿瘤坏死因子(TNF)-相关的细胞因子都归属于同一 个蛋白质超家族， 它们具有很多功能，包括涉及免疫调节和凋亡调节的那些功能。TWEAK (TNF-样的诱导凋亡的弱诱导物)是此超家族中的 一 员。专利技术概述抗TWEAK抗体可用来治疗多种疾病如炎性疾病，神经性疾病或其它本 文所述的疾病。当用于治疗人类受试者时，所述抗体优选是人的(HUMAN)、 人源化的或是有效人化的(EFFECTIVELY HUMAN)抗体。一方面，本专利技术公开了包含第一和第二种免疫球蛋白可变区序列、并结 合TWEAK (例如人TWEAK)的蛋白质。所述蛋白质能以，比如，K。低于10—7 M，如l(T8， l(T9， 10"°, 10"1 M或更好的亲和力结合TWEAK。所述蛋白质在 本文中也称为"抗TWEAK抗体"。所述第 一和第二种免疫球蛋白可变区序列 可包括免疫球蛋白可变区中至少足以形成结合TWEAK的抗原结合位点的 部分。通常，第一和第二种免疫球蛋白可变区序列分别对应于免疫球蛋白重 链和轻链(如成对的或者另外匹配的重链和轻链)的可变区序列。所述抗体能结合TWEAK上包括由P2D10识别的表位中的至少一个、 两个、三个或四个氨基酸残基的表位，能结合P2D10识别的TWEAK的肽(例 如长度不足25、 20或15个氨基酸的肽)或能结合P2D10所识别的TWEAK 的区域。例如，所述抗体特异性结合TWEAK(尤其人TWEAK，例如TWEAK 的可溶性区域)的表位，例如线性或构象性表位。所述抗体可与P2D10竟争 结合TWEAK,例如人TWEAK。所述抗体可竟争性抑制P2D10结合TWEAK， 如人TWEAK。 一个实施方案中，所述抗体可结合与P2D10的表位重叠的表 位，如与P2D10表位有至少一个、两个、三个或四个氨基酸相同，或通过结 合而在空间上(stericaily)阻碍TWEAK与P2D10相互作用的表位。例如，抗TWEAK抗体能结合TWEAK并调控(例如抑制)TWEAK和 TWEAK受体如Fnl4 (如人Fnl4)之间的相互作用(如结合)。所述抗体也可降 低TWEAK受体的信号传导活性。所述抗体可靶向TWEAK、隔离(sequester) TWEAK、和/或调控TWEAK的体内稳定性。一个实施方案中，所述抗体特异性结合TWEAK上与Fnl4(如人Fnl4) 接触的相互作用位点的至少一部分。所述抗体可与Fnl4竟争结合TWEAK, 如人TWEAK。所述抗体可竟争性抑制Fnl4结合TWEAK。所述抗体可与 TWEAK上的表位相互作用，所述表位是因与抗体结合而在空间上阻碍 TWEAK与Fnl4 (如人TWEAK与人Fnl4)相互作用的表位。一个实施方案中，所述抗体能抑制一或多种TWEAK-相关活性，其ICso 为约50 nM-5 pM，通常为约100-250 pM或更j氐。例如，所述抗体能抑制 TWEAK促进内皮细胞增殖或新血管形成的能力。 一个实施方案中，抗 TWEAK抗体降低至少一种TWEAK-相关活性，从而例如在将所述抗体给予 受试者后能调控炎性疾病。在其它实施方案中，所述抗体能以0、1()Sm-V1,通常io4-io7m-V'的 动力学结合(associatew他)TWEAK。另一实施方案中，所述抗体有10义1(T6 s人通常10-2-10-5^的解离动力学。 一个实施方案中，所述抗体以与单克隆 抗体P2D10或其修饰形式，如其嵌合形式或人源化形式(如本文所述的人源 化形式)类似(如5或10倍以内)的亲和力和/或动力学结合TWEAK，如人 TWEAK。可用例如生物传感器技术(BIACORETM)，检测抗TWEAK抗体的 亲和力和结合动力学。一个实施方案中，所述抗体是全长抗体的抗原结合片段，如Fab、F(ab，)2、 Fv或单链Fv片段。通常，所述抗体是全长抗体。所述抗体可以是单克隆抗 体或单特异性抗体。例如，所述抗体在包含不足20种其它的抗TWEAK抗体的组合物中，如在不包含其它种类的抗TWEAK抗体的组合物中。所述抗体可以是有效人化的。"有效人化的"抗体是包含足够数量的人氨 基酸位置、因而不在正常人体内激发免疫应答的抗体。优选地，所述蛋白质 不引起中和抗体应答，如人抗鼠抗体(HAMA)应答。很多情况下，HAMA会 带来问题，如需要重复给予抗体时，如在治疗慢性或复发性疾病时。HAMA 反应可以因抗体的血清清除增力口(见例如Saleh et al.， Cancer Immunol.Immunother., 32:180-190 (1990))、以及还因潜在的变态反应(见例如LoBuglio etal. (1986)//WnV/oma, 5:5117-5123)，而使重复给予抗体有可能变得失效。例如，所述抗体可以是人的、人源化的、CDR-移植的、嵌合的、突变 的、亲和力成熟的、脱敏的(deimmunized)、合成的或者体外产生的抗体，及 它们的组合。 一个实施方案中，抗TWEAK抗体是人源化抗体。抗TWEAK抗体的重链和轻链可以基本上是全长的。所述蛋白质可包含 至少一条、优选两条完整重链，和至少一条、优选两条完整轻链，或可包含 抗原结合片段(如Fab，F(ab，)2,Fv或单链Fv片段)。其它实施方案中，所述抗 体具有重链恒定区，其选自如IgGl， IgG2， IgG3， IgG4， IgM， IgAl， IgA2， IgD, 和IgE;尤其选自如IgGl，IgG2,IgG3，和lgG4，更尤其为IgGl(如人IgGl)。 通常，重链恒定区是人的或是人恒定区的修饰形式。另一个实施方案中，所述抗体具有轻链恒定区，其选自K或X，尤其K(如人K)。一个实施方案中，所述蛋白质包含本文公开的抗体(如P2D10)的轻链或 重4连可变区的至少一个、两个、优选三个CDR。上下文中，CDR指Chothia 超变环所限定的CDR。例如，所述蛋白质在重链可变区序列的CDR区中， 可以包含至少1个、2个或3个如下序列GFTFSRYAMS (CDR1)(SEQ IDNO:l),E工SSGGSYPYYPDTVTG (CDR2) (SEQ ID NO:2)，VLYYDYDGDR工EVMDY (CDR3) (SEQ ID NO:3)，或具有与上述序列相比有差异(如差异数与CDR长度成比例)的氨基酸 序列，所述差异是，每10个氨基酸有不超过4、 3、 2.5、 2、 1.5、 1或0.5 个改变(如取代、插入或缺失)，如每个CDR有至少1个、但不超过2、 3或 4个改变。重链可变区序列可以将这些CDR序列具体包含在CDR3中，或 包含在至少两个CDR(如CDR1和CDR3, CDR2和CDR3)中，或包含在所 有三个CDR中。所述蛋白质的重链可变区序列的CDR区中可包含至少一个、两个或三 个如下序列(括号中的氨基酸代表在具体位置的可选氨基酸)(i) G-(YF)-(NT)-F-(STDN)-(RY)画Y-A-(MIL)-(HS); (SEQ ID NO:4)，或(ii) Y-Y-(PV)-D本文档来自技高网...
【技术保护点】
分离的蛋白质，其包含重链可变区序列和轻链可变区序列，它们能形成与人ＴＷＥＡＫ结合的抗原结合位点，其中所述蛋白质具有一或多种如下性质： （ａ）该蛋白质与Ｐ２Ｄ１０、ｈｕＰ２Ｄ１０－１或ｈｕＰ２Ｄ１０－２竞争结合人ＴＷＥＡＫ； （ｂ）该蛋白质结合人ＴＷＥＡＫ上与Ｐ２Ｄ１０、ｈｕＰ２Ｄ１０－１或ｈｕＰ２Ｄ１０－２所结合的表位重叠的表位； （ｃ）其重链可变区序列和／或轻链可变区序列由在高严谨条件与编码Ｐ２Ｄ１０、ｈｕＰ２Ｄ１０－１或ｈｕＰ２Ｄ１０－２的核酸的互补链杂交的核酸编码； （ｄ）其重链可变区序列和／或轻链可变区序列与Ｐ２Ｄ１０、ｈｕＰ２Ｄ１０－１或ｈｕＰ２Ｄ１０－２的对应可变区的氨基酸序列至少８０％相同； （ｅ）其重链可变区序列和轻链可变区序列的多个ＣＤＲ区（总体上）与Ｐ２Ｄ１０、ｈｕＰ２Ｄ１０－１或ｈｕＰ２Ｄ１０－２的重链可变区和轻链可变区的ＣＤＲ区至少９５％相同；或 （ｆ）其框架区（总体上）与Ｐ２Ｄ１０、ｈｕＰ２Ｄ１０－１或ｈｕＰ２Ｄ１０－２的重链可变区和轻链可变区的框架区至少９５％相同。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：琳达C伯克利，埃伦加伯，亚历克塞卢戈夫斯科伊，
申请(专利权)人：比奥根艾迪克MA公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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