重组牛痘病毒制造技术

一个通过将具有启动子功能的ＤＮＡ和能在其控制之下进行表达的异源ＤＮＡ，彼此邻接地插入到一个减毒的利斯特温度敏感突变牛痘病毒菌株的非主要ＤＮＡ区中所得到的重组件痘病毒，该突变牛痘病毒菌株在免肾细胞中不具有高温生长性并在受精卵绒毛尿囊膜上具有小的痘疱尺寸。（*该技术在2007年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种重组牛痘病毒，更具体地说，涉及一种通过用减毒的利斯特(Lister)温度敏感突变牛痘病毒菌株作为载体而得到的重组牛痘病毒，这种菌株在兔肾细胞中不具有高温生长性，并在受精卵的绒毛尿囊膜上具有小的痘疱尺寸。近年来，已经专利技术了一个插入异源DNA的构建重组牛痘病毒的方法，并建议了用插入，例如编码传染病病原体抗原的DNA作为异源的DNA来构建的重组牛痘病毒用作活疫苗的方法(例如USP4，603，112，WO84/02077，等)。该方法是按照例如下面的步骤(见图1)来实现的。首先，用限制性内切酶从对牛痘病毒生长非主要的一个DNA区中切出适当的DNA，并插入到一个质粒中以制备一个第一重组质粒。然后，把异源的DNA插入到该重组质粒的牛痘病毒的DNA部分来制备一个第二重组质粒。另一方面，制备事先用牛痘病毒感染了的动物细胞，并把第二重组质粒导入到该动物细胞中，由此在该感染动物细胞中引起了牛痘病毒和第二重组质粒之间的同源重组，并产生了一个具有该异源的DNA导入其中的重组牛痘病毒(例如，上面提到过的那些现有技术文献，Cell Technology vol.2，NO.9，P.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一个通过将具有启动子功能的ＤＮＡ和能在其控制之下进行表达的异源ＤＮＡ，彼此邻接地插入到一个减毒的利斯特温度敏感突变牛痘病毒菌株的非主要ＤＮＡ区中所得到的重组牛痘病毒，该突变牛痘病毒菌株在兔肾细胞中不具有高温生长性并在受精卵绒毛尿囊膜上具有小的痘疱尺寸。

【技术特征摘要】
JP 1986-9-4 208772/861.一个通过将具有启动子功能的DNA和能在其控制之下进行表达的异源DNA，彼此邻接地插入到一个减毒的利斯特温度敏感突变牛痘病毒菌株的非主要DNA区中所得到的重组牛痘病毒，该突变牛痘病毒菌株在兔肾细胞中不具有高温生长性并在受精卵绒毛尿囊膜上具有小的痘疱尺寸2.一个如权利要求1所述的重组牛痘病毒，其中启动子中的转录初始部位与异源DNA中的第一转译初始部位之间的距离是200个碱基或更少。3.一个如权利要求1所述的重组牛痘病毒，其中该利斯特温度敏感突变牛痘病毒菌株在兔肾细胞中...

【专利技术属性】
技术研发人员：小岛朝人，小林广茂，安田斡司，后藤浩之，中里早木子，鸭川幸市，森田迪夫，渡边邦子，
申请(专利权)人：国立予防卫生研究所长，日本泽恩株式会社千县，
类型：发明
国别省市：JP[日本]