人类甲状腺蛋白ZSIG45及其编码DNA制造技术

本发明专利技术涉及甲状腺和垂体中大量表达的新型人类蛋白质－ｚｓｉｇ４５的多核苷酸和多肽分子。该多肽及其编码多核苷酸可用于检测人类疾病状态和染色体异常，并可作为治疗剂应用。本发明专利技术还包括针对ｚｓｉｇ４５多肽的抗体。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
多细胞生物的细胞增殖和分化均受激素和多肽生长因子控制。这些可扩散分子可使细胞间相互联系并协调一致地调控细胞增殖和器官发育；还可调节损伤组织的修复和再生。激素和生长因子通过与受体结合而影响细胞代谢。受体可以是与胞内信号传导途径有关的膜整合蛋白。受体的其它类型是可溶性分子，如转录因子。激素效应，包括激素与可溶性受体的相互作用，是甲状腺发挥有效功能所必需的。甲状腺是健康人生长和发育中的主要内分泌腺。在成人体内，甲状腺的主要作用是维持代谢稳定，主要通过产生和调节甲状腺激素水平实现。事实上，体内每个器官均受甲状腺激素的影响。因此，甲状腺机能障碍与多种疾病状态相关。甲状腺疾病相对比较常见，主要表现为甲状腺大小和形状的异常(甲状腺肿)以及甲状腺激素分泌的异常。甲状腺机能障碍还可因非甲状腺疾病或可改变甲状腺生理情况的营养缺乏症而引起。常见的甲状腺疾病实例有甲状腺毒症、甲状腺机能减退、突眼性甲状腺肿、甲状腺机能亢进和甲状腺肿瘤。一般性回顾参见Felig，P，Baxter，J.D.& Frohman，L.A.(编)内分泌与代谢，McGraw Hill，NY，第三版，1995，第432-553页；Bennett，J.C.& Plum，F.(编)，医学教材，W.B.Saunders CoPhiladelphia，第20版，1996，第1227-1245页。研究得最多的甲状腺激素是甲状腺素(T4)、三碘甲腺原氨酸(T3)和促甲状腺素(TSH)。T4大量产生于甲状腺中，而T3既可以由甲状腺产生，也可以在甲状腺外经酶催化使T4发生5’脱碘产生。T3和T4均为分泌型，而且都是甲状腺球蛋白的酶裂解产物；甲状腺球蛋白，是甲状腺的主要蛋白质，它是T4和T3的胞内贮存形式。T4和T3的生物合成和分泌受脑垂体TSH的刺激；而脑垂体TSH又受循环中T3和T4水平的抑制并受下丘脑促甲状腺素释放激素(TRH)的刺激。T3是甲状腺激素核受体的配体，这类核受体介导甲状腺激素的所有已知生理作用。这些受体是甾类核受体超家族的成员；它们与DNA结合并活化mRNA转录。甲状腺受体结合或未结合其酸性T3配体时具有不同活性。在循环中，T4和T3与几种不同的血清蛋白结合，直至它们到达不同器官和组织中其发挥作用的位点。甲状腺激素通过调节多种酶的生成和活性，调节其它激素的生成和代谢，调节底物、维生素和矿物质的利用而调节很多代谢过程。这些效应并非都是T3转录调节的结果。例如，非核效应包括淋巴样细胞中的氨基酸和糖转运的刺激、红细胞和心脏细胞中的钙-ATP酶活性、以及其它膜相互作用。有关甲状腺激素的代谢作用和疾病的回顾，参见Braverman，L.E.(编)，甲状腺病，Humana出版社，Totowa，NJ，1997。已知有其它效应物可影响这种复杂的生理体系。目前所未知的效应物可能也很重要。本领域内仍需进一步阐明甲状腺相关生理效应和提供新的调节分子。尤其感兴趣的是可影响甲状腺功能或由甲状腺分泌的具有胸腺外效应的调节蛋白，包括另外的甲状腺激素。这类激素将尤其可用于使各种甲状腺疾病患者恢复正常的甲状腺功能和作为开发小分子药物的靶。对已知甲状腺激素体内活性的证实说明其它甲状腺激素、它们的激动剂和拮抗剂具有巨大的临床应用前景和需求。本专利技术提供这类多肽，用于这些目的和本领域内技术人员由本文所述技术而显而易见的其它目的。专利技术简述第一方面，本专利技术提供分离的多核苷酸，它所编码多肽包含的氨基酸序列与选自下组的氨基酸序列至少90％相同(a)如SEQ ID NO2中第47(Lys)-114(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列；(b)如SEQ ID NO4中第1(Met)-85(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列；(c)如SEQ ID NO3中第1(Met)-89(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列；(d)如SEQ ID NO2中第1(Met)-114(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列。在一个实施方案中，本专利技术提供选自下组的分离的多核苷酸分子(a)包含如SEQ ID NO1中第219-422位核苷酸所示核苷酸序列的多核苷酸分子；(b)包含如SEQID NO1中第168-422位核苷酸所示核苷酸序列的多核苷酸分子；(c)包含如SEQ ID NO1中第156-422位核苷酸所示核苷酸序列的多核苷酸分子；(d)包含如SEQ ID NO1中第82-422位核苷酸所示核苷酸序列的多核苷酸分子；(e)与(a)，(b)，(c)或(d)互补的多核苷酸分子。在另一个实施方案中，上述多核苷酸包含SEQ ID NO15第1-342位的核苷酸。在另一个实施方案中，上述多核苷酸包含与SEQ ID NO2中第47(Lys)-114位(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在另一个实施方案中，上述多核苷酸包含如SEQ ID NO2中第47(Lys)-114(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列。在另一个实施方案中，上述多核苷酸编码一种多肽，其中该多肽包含基元1-5。第二方面，本专利技术提供包含以下可操作连接在一起的元件的表达载体转录启动子；编码与SEQ ID NO2中第47(Lys)-114位(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列至少90％相同的zsig45多肽的DNA片段；和转录终止子。在一个实施方案中，上述表达载体还包含与该DNA片段可操作连接的一个分泌信号序列。在另一个实施方案中，上述表达载体包含选自下组的分泌信号序列(a)SEQ ID NO2中第1-46位氨基酸；(b)SEQID NO3中第1-21位氨基酸；和(c)SEQ ID NO4中第1-17位氨基酸。第三方面，本专利技术提供已导入上述表达载体的培养细胞，其中该细胞表达由所述DNA片段编码的多肽。第四方面，本专利技术提供编码融合蛋白的DNA构建体，该DNA构建体包含编码与选自下组的氨基酸序列至少90％相同的多肽的第一DNA片段(a)SEQ ID NO2中第1-46位氨基酸；(b)SEQ ID NO3中第1-21位氨基酸；和(c)SEQ ID NO4中第1-17位氨基酸；以及编码另一多肽的第二DNA片段，其中第一和第二DNA片段符合读框地连接；并且编码该融合蛋白。另一方面，本专利技术提供分离的多肽，它包含的一段氨基酸序列与选自下组的氨基酸序列至少90％相同(a)如SEQ ID NO2中第47(Lys)-114(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列；(b)如SEQ ID NO4中第1(Met)-85(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列；(c)如SEQ ID NO3中第1(Met)-89(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列；(d)如SEQ ID NO2中第1(Met)-114(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列。在一个实施方案中，上述分离的多肽包含至少90％相同于SEQ ID NO2中第47(Lys)-114(Asp)位氨基酸所示氨基酸序列的序列。在另一个实施方案中，上述分离的多肽即如SEQ ID NO2中第47(Lys)-114(Asp)位氨基酸所示。在另一个实施方案中，上述分离的多肽包含基元1-5。另一方面，本专利技术提供生产zsig45多肽的方法，包括培养其中已导入上述表达载体的细胞；及分离由该细胞产生的zsig45多肽。另一方面，本专利技术提供生产抗zs本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多核苷酸，它所编码的多肽包含的氨基酸序列与选自下组的一个氨基酸序列至少９０％相同：（ａ）如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２中第４７（Ｌｙｓ）－１１４（Ａｓｐ）位氨基酸所示氨基酸序列；（ｂ）如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４中第１（Ｍｅｔ）－８ ５（Ａｓｐ）位氨基酸所示氨基酸序列；（ｃ）如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３中第１（Ｍｅｔ）－８９（Ａｓｐ）位氨基酸所示氨基酸序列；（ｄ）如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２中第１（Ｍｅｔ）－１１４（Ａｓｐ）位氨基酸所示氨基酸序列。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：PO夏帕德，TA戴舍尔，
申请(专利权)人：津莫吉尼蒂克斯公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]