一种多肽－人甲酰胺基嘧啶－DNA糖基化酶11.77和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－－人甲酰胺基嘧啶－ＤＮＡ糖基化酶１１．７７，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的甲酰胺基嘧啶－ＤＮＡ糖基化酶１１．７７的多核苷酸的用途。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
技术介绍
DNA是遗传信息的载体，它需要极高的保真度，这不仅有赖于复制体系的完善，而且还需要有能够纠正已存在的错误这样一类修复体系。在长期的进化中，生物体演化出能纠正偶然的复制错误的系统以及能修复环境因素和体内化学物质造成的DNA分子的损伤的系统。在DNA分子中，除了尿嘧啶能够在DNA复制时渗入以外，胞嘧啶也能自发的脱氨氧化成为尿嘧啶。腺嘌呤也可以脱氨氧化生成次黄嘌呤。此外，还有其他的碱基衍生物会存在于DNA链中，例如2，6-二氨基-4-羟基-5N-甲基甲酰氨基嘧啶(Fapy)以及7，8-二氢-8-氧代鸟嘌呤(8-OxoG)等，均已发现其相应的DNA糖基化酶。DNA糖基化酶广泛存在与几乎所有的生物体内。根据他们是否具有内在的AP内切酶活性，可以将DNA糖基化酶分为两类不具AP内切酶活性与具AP内切酶活性。甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶(Fapy-DNA糖基化酶)属于第二种DNA糖基化酶，是一种参与DNA修复的酶类，它切除氧化嘌呤碱基从而释放2，6-二氨基-4-羟基-5N-甲基甲酰氨基嘧啶(Fapy)以及7，8-二氢-8-氧代鸟嘌呤(8-OxoG)残基。FPG除了具有糖基化酶活性之外，还能够在五嘌呤嘧啶位点(AP位点)内切去DNA。FPG是一种单体蛋白质，分子量约为32Kd，其活性形式要求与锌结合。锌结合位点位于蛋白的C-端部分，其中含有四个保守且重要的半胱氨酸，是锌配体，该段保守的特征序列模板为C-x(2，4)-C-x--x--x(7)-R---x--C-x(2)-C-Q。甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶对于生物体的生存十分重要。如果这些酶的基因发生突变，人的身体状况将会很差，会染上各种癌肿等疾病。甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶的修复机制和尿嘧啶糖基化酶相同。通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本专利技术的多肽的表达谱与甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77。由于如上所述甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77的抗体。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本专利技术提供了一种多肽——人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77，其基本上是由<210>2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶11.77相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(I)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(II)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(III)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(IV)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸组成。本专利技术的多核苷酸序列包括<210>1的核苷酸序列。本专利技术的多核苷酸是从人胎脑组织的cDNA文库中发现的。本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或是RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。编码成熟多肽的编码区序列可以与<210>1所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本专利技术所用，“简并的变异体”在本专利技术中是指编码具有<210>2的蛋白质或多肽，但与<210>1所示的编码区序列有差别的核酸序列。编码<210>2的成熟多肽的多核苷酸包括只有成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。术语“编码多肽的多核苷酸”是指包括编码此多肽的多核苷酸和包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。本专利技术还涉及上述描述多核苷酸的变异体，其编码与本专利技术有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片断、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人甲酰胺基嘧啶－ＤＮＡ糖基化酶１１．７７，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]