一种用于检测EGFR基因突变的扩增引物、测序引物、试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测EGFR基因突变的扩增引物、测序引物、试剂盒和方法，所述扩增引物具有如SEQ ID No:1～8所示的碱基序列，所述测序引物具有如SEQ ID No:9～12所示的碱基序列。本发明专利技术的检测EGFR基因突变的引物特异性强，灵敏度高；本发明专利技术的检测EGFR基因突变的方法采用独创的引物进行扩增测序，可直接利用含人体某组织部位的石蜡包埋样本通过Sanger测序法检测出样本中EGFR基因主要突变位点型别，检测位点包括EGFR基因18、19、20和21四个外显子的29个突变位点，且能在样本浓度较低时检测到目的基因，结果无非特异性扩增。

An amplification primer, sequencing primer, kit and method for the detection of EGFR gene mutation

The invention discloses a method for detecting the amplification primers and sequencing primers, kits and methods for mutations in the EGFR gene, the primers with the nucleotide sequence of SEQ ID No:1 ~ 8 shows, the sequencing primer has the nucleotide sequence of SEQ ID No:9 ~ 12 shows. Detection of EGFR gene mutation primers of the invention has strong specificity, high sensitivity; EGFR gene detection method of the invention adopts mutation primers were amplified and sequenced directly with body tissues in paraffin embedded samples by detecting the samples of EGFR Sanger gene sequencing main mutation type detection sites including 29 mutation sites of EGFR gene in 18, 19, 20 and 21 of four exons, and the detected target gene in the sample concentration was low, the results of no nonspecific amplification.

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测EGFR基因突变的扩增引物、测序引物、试剂盒和方法
本专利技术属于生物检测
，更具体地，本专利技术涉及一种用于检测EGFR基因突变的扩增引物、测序引物、试剂盒和方法。
技术介绍
EGFR(EpidermalGrowthFactorReceptor)是上皮生长因子(EGF)细胞增殖和信号传导的受体。EGFR属于ErbB受体家族的一种，该家族包括EGFR(ErbB-1),HER2/c-neu(ErbB-2),Her3(ErbB-3)和Her4(ErbB-4)。EGFR也被称作HER1、ErbB1，突变或过表达一般会引发肿瘤。EGFR是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体，细胞膜贯通，分子量170KDa。EGFR位于细胞膜表面，靠与配体结合来激活，包括EGF和TGFα(transforminggrowthfactorα)。激活后，EGFR由单体转化为二聚体，尽管也有证据表明，激活前也存在二聚体。EGFR基因由28个外显子组成。其酪氨酸激酶功能区由外显子18-24编码，迄今为止发现的EGRF基因突变主要位于外显子18-21。肺癌是我国发病率和死亡率最高的癌症，其中非小细胞肺癌(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测EGFR基因突变的扩增引物，其特征在于，所述扩增引物包括：针对EGFR基因Exon18突变的SEQ ID No:1和SEQ ID No:2、针对EGFR基因Exon19突变的SEQ ID No:3和SEQ ID No:4、针对EGFR基因Exon20突变的SEQ ID No:5和SEQ ID No:6、以及针对EGFR基因Exon21突变的SEQ ID No:7和SEQ ID No:8。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测EGFR基因突变的扩增引物，其特征在于，所述扩增引物包括：针对EGFR基因Exon18突变的SEQIDNo:1和SEQIDNo:2、针对EGFR基因Exon19突变的SEQIDNo:3和SEQIDNo:4、针对EGFR基因Exon20突变的SEQIDNo:5和SEQIDNo:6、以及针对EGFR基因Exon21突变的SEQIDNo:7和SEQIDNo:8。2.一种用于检测EGFR基因突变的测序引物，其特征在于，所述测序引物包括：针对EGFR基因Exon18突变的SEQIDNo:9、针对EGFR基因Exon19突变的SEQIDNo:10、针对EGFR基因Exon20突变的SEQIDNo:11、以及针对EGFR基因Exon21突变的SEQIDNo:12。3.一种检测EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的扩增引物和权利要求2所述的测序引物。4.根据权利要求3所述的检测EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括UNG(UDG)/dUTP体系。5.根据权利要求4所述的检测EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括热启动Taq酶。6.根据权利要求5所述的检测EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括质控品，所述质控品为EGFR阴性质控品、EGFR野生型阳性质控品、EGFRExon19突变型阳性质控品、和EGFRExon21突变型阳性质控品。7.一种检测EGFR基因突变的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李葆华，蒋析文，刘悦，甘小洪，马道亮，
申请(专利权)人：广州立菲达安诊断产品技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44