大萼香茶菜乙素二乙酰化物的药物新用途制造技术

本发明专利技术公开了大萼香茶菜乙素二乙酰化物的药物新用途。该用途是其在制备预防和/或治疗肿瘤的产品中的应用。实验证明，大萼香茶菜乙素二乙酰化物可抑制食管鳞癌细胞及非小细胞肺癌细胞的增殖及克隆形成，影响食管鳞癌细胞及非小细胞肺癌细胞周期进程，诱导食管鳞癌细胞及非小细胞肺癌细胞周期阻滞，抑制癌细胞的DNA修复，诱导细胞凋亡，上调cleaved‑caspase‑9、cleaved‑caspase‑3和cleaved‑PARP的表达量，激活细胞氧化应激、增加细胞ROS水平，激活P38 MAPK信号通路进而激活Caspase‑9依赖的凋亡通路和抑制食管鳞癌细胞引起的肿瘤的生长，具有重要的应用价值。

New use of acetyl two acetyl from calyx tea

The invention discloses a new use of the drug of the acetyl two acetate of the calyx incense, tea and vegetable B. This use is its application in the preparation of products that prevent and / or treat tumors. The experiment proved that the proliferation and clone macrocalin B two acetylated compounds can inhibit the esophageal squamous cell carcinoma and non-small cell lung cancer cell formation, effect of esophageal carcinoma and non-small cell lung cancer cell cycle process, induction of esophageal squamous cell carcinoma and non-small cell lung cancer cell block, DNA repair inhibition of cancer cells. Induction of apoptosis and expression of cleaved caspase 9, cleaved caspase 3 and cleaved PARP, activation of oxidative stress and increased cellular ROS levels, activation of P38 MAPK signaling pathway and activation of Caspase 9 dependent apoptosis pathway and inhibition caused by esophageal squamous cell carcinoma tumor growth, has important application value the.

【技术实现步骤摘要】
大萼香茶菜乙素二乙酰化物的药物新用途
本专利技术属于医药领域，具体涉及大萼香茶菜乙素二乙酰化物在制备抑制食管鳞癌细胞及非小细胞肺癌细胞增殖的产品中的应用。
技术介绍
胸部是恶性肿瘤的高发部位，主要包括食管癌、贲门癌、肺癌及其他纵隔肿瘤，其中食管癌和肺癌是最常见的胸部恶性肿瘤，并且食管癌和肺癌预后非常差，中国癌症统计报告提示2015年我国新增肺癌患者约73万，因肺癌死亡患者约61万，新增食管癌患者约48万，因食管癌死亡患者约38万，其中肺癌的发病率及死亡率均居所有癌种第1位，食管癌发病率和死亡率分别居于第3位和第4位。由此可见，虽然近些年对于癌症的研究、预防及治疗手段都有了极大的发展，但肺癌和食管癌的发病率及病死率仍居高不下威胁生命，有效的新的治疗手段的研究任务仍然非常紧迫。食管鳞癌(Esophagealsquamouscellcarcinoma，ESCC)是一种恶性程度非常高的肿瘤，是我国食管癌的主要病理类型。由于食管鳞癌的症状出现较晚，就诊时大多数患者已是临床中晚期，化学药物的治疗占据重要地位。晚期食管癌的化疗至今仍然未能确定标准的化疗方案，顺铂单药有效率约为21％，与5-Fu的联合将有效率提高到25-35％；近些年包括紫杉醇、多西他赛和伊立替康等药物与顺铂和/或5-Fu联合治疗晚期食管癌有效率可达50％以上。食管癌的靶向治疗、或靶向药物与放化疗联合应用能否提高疗效尚无定论。因此对于晚期食管癌，治疗手段及疗效都非常有限，需要继续寻找更有效的药物以提高有效率，延长患者生存期。肺癌非小细胞肺癌(Non-smallcelllungcancer，NSCLC)占据绝大多数。中晚期非小细胞肺癌最佳支持治疗的中位生存期仅为4-5个月、1年生存率为10％。2008年NSCLCCG(Non-smallCellLungCancerCollaborativeGroup)针对新药物及新的临床研究更新荟萃分析，针对晚期非小细胞肺癌，其中11项研究采用含铂方案，另外4项研究为不含铂的单药化疗方案(依托泊苷、长春瑞滨、吉西他滨和紫杉醇)，与最佳支持组相比，化疗患者有显著生存获益，1年相对生存率增加23％，绝对生存率增加9％，中位生存期增加1.5个月。因此化疗可以使患者获益，但传统化疗对晚期NSCLC患者的生存时间延长有限，新的更有效的药物的研发任务艰巨。靶向治疗为敏感突变患者提供了新的治疗方案，但拥有敏感突变的患者不足50％，且靶向药物最终都将发生耐药。唇形科(Labiatae)香茶菜属(Isodon)植物是我国民间广泛使用的中草药，该属植物以全草或根入药，具有清热利湿、活血散瘀、解毒消肿等功效，富含结构多样的活性二萜类化合物。林生香茶菜(Isodonsilvatica)为香茶菜属(Isodon)植物，主产于西藏，生于林间隙地。大萼香茶菜乙素二乙酰化物(Acetyl-macrocalinB)是从大萼香茶菜(Isodonmacrocalyx(Dunn)Hara)发现的新化合物大萼香茶菜乙素(macrocalinB)通过乙酰化反应得到的6,11-二乙酰化的衍生物，为一合成产物。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供大萼香茶菜乙素二乙酰化物(Acetyl-macrocalinB)的药物新用途。所述大萼香茶菜乙素二乙酰化物的结构式如式(Ⅰ)所示：本专利技术所提供的大萼香茶菜乙素二乙酰化物的药物新用途是其在制备具有下述1)-18)中至少一种功能的产品中的应用；1)预防和/或治疗肿瘤；2)抑制肿瘤生成；3)抑制肿瘤细胞增殖；4)抑制肿瘤细胞的克隆形成；5)影响肿瘤细胞周期进程；6)诱导肿瘤细胞周期阻滞；7)抑制肿瘤细胞的DNA修复；8)诱导肿瘤细胞的凋亡；9)上调促进细胞凋亡蛋白的表达量；10)上调cleaved-caspase-9的表达量；11)上调cleaved-caspase-3的表达量；12)上调cleaved-PARP的表达量；13)激活肿瘤细胞氧化应激；14)增加肿瘤细胞ROS水平；15)激活P38MAPK信号通路；16)激活Caspase-9依赖的凋亡通路；17)抑制肿瘤组织细胞Ki67表达；18)抑制肿瘤细胞引起的肿瘤的生长。本专利技术的另一个目的是提供一种产品；所述产品具有下述1)-18)中至少一种功能；1)预防和/或治疗肿瘤；2)抑制肿瘤生成；3)抑制肿瘤细胞增殖；4)抑制肿瘤细胞的克隆形成；5)影响肿瘤细胞周期进程；6)诱导肿瘤细胞周期阻滞；7)抑制肿瘤细胞的DNA修复；8)诱导肿瘤细胞的凋亡；9)上调促进细胞凋亡蛋白的表达量；10)上调cleaved-caspase-9的表达量；11)上调cleaved-caspase-3的表达量；12)上调cleaved-PARP的表达量；13)激活肿瘤细胞氧化应激；14)增加肿瘤细胞ROS水平；15)激活P38MAPK信号通路；16)激活Caspase-9依赖的凋亡通路；17)抑制肿瘤组织细胞Ki67表达；18)抑制肿瘤细胞引起的肿瘤的生长。本专利技术提供的产品的活性成分包括大萼香茶菜乙素二乙酰化物；上述应用或产品中，所述肿瘤为癌，所述癌具体可为食管鳞癌和/或非小细胞肺癌。上述应用或产品中，所述肿瘤细胞为癌细胞，所述癌细胞具体可为食管鳞癌细胞和/或非小细胞肺癌细胞。所述食管鳞癌细胞具体可为KYSE30细胞和KYSE450细胞。所述非小细胞肺癌细胞具体可为H1299细胞和A549细胞。上述应用或产品中，所述5)和6)中，所述细胞周期均为G2/M期。上述任一所述cleaved-caspase-9的GeneID为842。上述任一所述cleaved-caspase-3的GeneID为836。上述任一所述cleaved-PARP的GeneID为142。上述任一所述p38的GeneID为1432。上述应用或产品中，所述大萼香茶菜乙素二乙酰化物具体可为林生香茶菜提取物，所述林生香茶菜提取物具体可为林生香茶菜酮提物，所述酮具体可为丙酮。所述林生香茶菜提取物的制备方法可包括如下步骤：以林生香茶菜的叶子为原料，依次进行丙酮浸泡、乙酸乙酯萃取、MCI脱色、硅胶色谱柱分析和重结晶。在本专利技术的具体实施例中，所述林生香茶菜提取物的具体制备方法如下：1)将林生香茶菜的叶子依次进行干燥和研磨，得到粉末状样品；2)将所述粉末状样品在丙酮水溶液中浸泡，浸泡后过滤，收集滤液；3)将所述滤液进行减压蒸馏，去除所述滤液中的丙酮，得到粗提取液；4)向所述粗提取液中加入乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯萃取液；5)对所述乙酸乙酯萃取液进行MCI脱色，得到黄色胶状物；6)使用硅胶色谱柱纯化所述黄色胶状物，得到主要级分A-F；然后利用RP-18纯化组分B，得到五个亚级馏分B1-B5；再通过硅胶柱层析分离得到馏分B1，并将所述馏分B1溶于甲醇水溶液中进行重结晶，得到的固体物质即为大萼香茶菜乙素二乙酰化物。所述大萼香茶菜乙素二乙酰化物的结构式如式(Ⅰ)所示。上述方法中，所述丙酮水溶液具体可为体积分数为70％的丙酮水溶液。所述丙酮水溶液与所述粉末状样品的配比可为7L：5Kg，每次浸泡3天，共3次。所述硅胶色谱柱为100-200目和200-300目孔径硅胶的硅胶色谱柱。所述甲醇水溶液的体积分数为90％。所述产品可为药物，所述药物可由所述大萼香茶菜本文档来自技高网...

【技术保护点】
大萼香茶菜乙素二乙酰化物在制备具有下述1)‑18)中至少一种功能的产品中的应用；1)预防和/或治疗肿瘤；2)抑制肿瘤生成；3)抑制肿瘤细胞增殖；4)抑制肿瘤细胞的克隆形成；5)影响肿瘤细胞周期进程；6)诱导肿瘤细胞周期阻滞；7)抑制肿瘤细胞的DNA修复；8)诱导肿瘤细胞的凋亡；9)上调促进细胞凋亡蛋白的表达量；10)上调cleaved‑caspase‑9的表达量；11)上调cleaved‑caspase‑3的表达量；12)上调cleaved‑PARP的表达量；13)激活肿瘤细胞氧化应激；14)增加肿瘤细胞ROS水平；15)激活P38MAPK信号通路；16)激活Caspase‑9依赖的凋亡通路；17)抑制肿瘤组织细胞Ki67表达；18)抑制肿瘤细胞引起的肿瘤的生长；所述大萼香茶菜乙素二乙酰化物的结构式如式(Ⅰ)所示：

【技术特征摘要】
1.大萼香茶菜乙素二乙酰化物在制备具有下述1)-18)中至少一种功能的产品中的应用；1)预防和/或治疗肿瘤；2)抑制肿瘤生成；3)抑制肿瘤细胞增殖；4)抑制肿瘤细胞的克隆形成；5)影响肿瘤细胞周期进程；6)诱导肿瘤细胞周期阻滞；7)抑制肿瘤细胞的DNA修复；8)诱导肿瘤细胞的凋亡；9)上调促进细胞凋亡蛋白的表达量；10)上调cleaved-caspase-9的表达量；11)上调cleaved-caspase-3的表达量；12)上调cleaved-PARP的表达量；13)激活肿瘤细胞氧化应激；14)增加肿瘤细胞ROS水平；15)激活P38MAPK信号通路；16)激活Caspase-9依赖的凋亡通路；17)抑制肿瘤组织细胞Ki67表达；18)抑制肿瘤细胞引起的肿瘤的生长；所述大萼香茶菜乙素二乙酰化物的结构式如式(Ⅰ)所示：2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为癌，所述癌具体为食管鳞癌和/或非小细胞肺癌；所述肿瘤细胞为癌细胞，所述癌细胞为食管鳞癌细胞和/或非小细胞肺癌细胞。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述食管鳞癌细胞为KYSE30细胞或KYSE450细胞；所述非小细胞肺癌细胞为H1299细胞或A549细胞。4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述5)和6)中，所述细胞周期均为G2/M期。5.一种产品，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赫捷，普建新，王婧男，孙汉董，孙楠，吴海燕，高亦博，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11