用于分离纯化的RNA的试剂和方法技术

本发明专利技术提供了分离基本上不含ＤＮＡ、称为纯ＲＮＡ的完整ＲＮＡ的组合物和方法。可以分离任何来源（例如，人类、其他动物、植物、病毒等）的ＲＮＡ。在一个实施方式中，样品用ｐＨ值小于４的酚处理，并从水相中回收纯ＲＮＡ。在另一实施方式中，从含有少量有机溶剂的酸化样品中沉淀ＲＮＡ。公开了其他实施方式。通过调节ｐＨ，同样的本发明专利技术的组合物可以用于多种实施方式。通过本发明专利技术的方法得到的纯ＲＮＡ可以用于不希望ＤＮＡ污染的试验，例如，聚合酶链式反应。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术是关于改善从生物学样品中分离纯化的RNA的组合物和方法。
技术介绍
纯的完整RNA的分离为分子生物学、临床和生物技术应用中分析基因表达的关键步骤。为实现上述目标，已经开发了多种RNA分离的方法。最经常使用的用于RNA分离的方法基于酚提取、从离液序列高的盐溶液中沉淀以及二氧化硅吸附(Ausubel等人，2002)，参阅申请人的专利US4843155、US 5346994和US 5945515。在US 4843155中描述的方法通常被称为单步(single-step)方法，用pH为4的酚-胍溶液(phenol-guanidinesolution)提取RNA。该方法的有效和简便使单步方法成为最常用的分离RNA的方法。在申请人的US 5346994中描述的单步方法的改良方法允许通过pH为4-6的酚-胍溶液的提取，从同一样品中同时分离RNA、DNA和蛋白质。均质处理生物学样品，并且所得匀浆用诸如氯仿或溴氯丙烷的疏水有机溶剂进行相分离。然后离心，所得混合物分为含有RNA的上层水相、相的界面和含有DNA和蛋白质的下层有机相。收集所述水相，用醇沉淀并洗涤RNA。在US 4843155和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于分离纯化的ＲＮＡ的含酚组合物，该组合物包括终浓度范围从约３％重量／重量至约９８％重量／重量的酚以及足以维持最终组合物的ｐＨ范围在３．６至低于４．０的缓冲剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：彼得科姆钦斯基，
申请(专利权)人：彼得科姆钦斯基，
类型：发明
国别省市：US[美国]