固态发酵微生物总DNA提取方法技术

本发明专利技术提供了一种固态发酵微生物总ＤＮＡ的提取方法，包括以下几个步骤：先用磷酸盐缓冲液洗涤样品，再结合超声波破碎和ＣＴＡＢ抽提液抽提固态发酵微生物细胞，粗提ＤＮＡ经预冷异丙醇沉淀和７０％预冷乙醇洗涤，最后经纯化试剂盒纯化，并用核糖核酸酶除去ＲＮＡ；本发明专利技术方法能得到高产量的ＤＮＡ，且可以同时提取细菌、放线菌、真菌ＤＮＡ，从而可快捷、全面的了解固态发酵样中微生物的多样性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种固态发酵微生物总ＤＮＡ提取方法，包括以下步骤：　　　　ａ．样品的洗涤：固态发酵样须用０．１Ｍ磷酸盐缓冲液洗涤三次；　　　　ｂ．ＤＮＡ的提取：往上述洗涤后的固态发酵样中加入异丙醇，用超声波冰浴超声，样品破碎以后，高速离心至样品完全沉淀，去上清液；往沉淀中加入十六烷基三甲基溴化胺抽提液，６５℃水浴，完全反应后，加入等体积的氯仿－异戊醇，高速离心至沉淀完全，并回收水相；在回收水相中加入１／１０体积的ＣＴＡＢ－ＮａＣｌ溶液，６５℃水浴待完全反应后，加入等体积的氯仿－异戊醇，再高速离心至沉淀完全，并回收水相；在回收水相中加入０．６倍体积的预冷异丙醇，并在－２０℃放置待充分反应后，再高速离心至沉淀完全...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋琳玲，曾光明，陈耀宁，范长征，王仁佑，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]