一种同时提取和纯化RNA和DNA的试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种同时提取和纯化RNA和DNA的试剂盒及方法。本发明专利技术所述的试剂盒包括共提取裂解液、2M醋酸钠、水饱和酚、氯仿/异戊醇混合液、异丙醇、70%或75%DEPC酒精、灭菌DEPC水、反提萃取液和核酸纯化柱。本发明专利技术的优点是：建立了同时提取RNA和DNA的提取方法并组装了试剂盒。该方法与经典的单独提取RNA或者DNA单独提取的方法相比较，提取效率相当，同时在方法中还提供了RNA和DNA进一步纯化的方法。其优势在于能够同时提取并纯化RNA和DNA，使用者可以根据实际的检测需要，选取不同的方法进行核酸提取。此外，本发明专利技术也为同时检测两种不同类型核酸的检测技术提供了很好的基础平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种同时提取和纯化RNA和DNA的试剂盒及方法，属于检验检疫领域。
技术介绍
在动物检疫中，根据检疫条款，一种样品往往需要针对多种疫病开展检测。随着多重PCR和基因芯片等高通量检测方法的广泛应用，可以实现一次试验完成多种针对检疫条款的检疫性疫病。而核酸(DNA和RNA)的提取与纯化是这些技术应用的基础与前提。核酸提取与纯化主要分为以下几种方法I.酚氯仿抽提法。该方法是核酸分离纯化技术中最经典的方法之一，是由冷泉港实验室中的研究人员首先提取的，并被大量的科研究工作者进行改良使用。其原理是在酚氯仿的共同作用下，蛋白质会被变性，形成不溶解的物质。由于蛋白质的密度小于酚而大于7K，所以离心后，会在酚相和水相于之间，形成蛋白质中间层，从而有效地将蛋白质和核酸分离开来。2.盐析法。该技术原理是在组织或细胞裂解液中，加入高浓度盐(NaCl或NH4Cl,KI, KAC)来沉淀去除蛋白质，从而得到高纯度的基因组DNA。3.玻璃珠法。在高离液盐(盐酸胍，异硫氰酸胍，NaI)条件下，玻璃珠会同核酸发生吸附反应，而在低盐条件下，核酸又可以被洗脱下来。但是玻璃珠的残留以及干燥问题影响了这一技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时提取和纯化RNA和DNA的试剂盒，其特征在于，包括共提取裂解液、2M醋酸钠、水饱和酚、氯仿/异戊醇混合液、异丙醇、70%或75%DEPC酒精、灭菌DEPC水、反提萃取液和核酸纯化柱，其中，所述共提取裂解液包含：4.5mol/L异硫氰酸胍，2g/L十二烷基肌酸钠，体积分数7×10？6%β？巯基乙醇、3g/L消泡剂？A、0.05mol/L乙二胺四乙酸，pH值为8.0。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟，蒲静，高志强，凌凤俊，汪琳，谷强，乔彩霞，尹义，张利峰，张鹤晓，
申请(专利权)人：中华人民共和国北京出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：