脆弱拟杆菌在制备抑制艰难梭菌粘附的组合物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及脆弱拟杆菌在制备防治由艰难梭菌感染引起的疾病的药物组合物或保健食品中的应用。本发明专利技术开拓了脆弱拟杆菌的一个新的应用领域，发明专利技术人通过大量实验证明，脆弱拟杆菌可选择性抑制艰难梭菌粘附细胞，而不会抑制其它正常肠道菌群粘附细胞，从而说明了脆弱拟杆菌可用于防治由艰难梭菌感染引起的疾病，而不会以临床显著程度干扰已有的正常的肠道菌群。

Application of bacilli fragile in the preparation of composition inhibiting adhesion of Clostridium difficile

The invention relates to the application of bacilli fragile in the preparation of pharmaceutical compositions or health foods for the prevention and treatment of diseases caused by Clostridium difficile infection. The invention develops a new application field of b.fragilis, inventor of a large number of experiments show that, Bacteroides fragilis can selectively inhibit Clostridium difficile cell adhesion, but did not inhibit the adhesion of cells to other normal intestinal flora, which shows the b.fragilis can be used for the prevention and treatment of diseases caused by Clostridium difficile infection, but not to clinically significant degree interfere with the normal intestinal flora.

【技术实现步骤摘要】
脆弱拟杆菌在制备抑制艰难梭菌粘附的组合物中的应用
本专利技术涉及脆弱拟杆菌的应用
，特别是涉及一种脆弱拟杆菌在制备抑制艰难梭菌粘附的组合物中的应用。
技术介绍
艰难梭菌(Cd)又称难辨梭状芽孢杆菌，是一种革兰阳性、专性厌氧、产毒素的梭状芽孢杆菌，艰难梭菌通过孢子经粪口途径在人群中传播感染，主要定植于人体大肠并释放两种外毒素蛋白，在易感人群中可引起结肠炎。其孢子特点是抗酸、耐热甚至对抗生素耐药，多见于医疗机构内，还可低水平存活于外周环境和食物中，从而造成该菌院内感染和社区传播。Cd能产生6种毒素，主要致病因子为毒素A(CdtA)及毒素B(CdtB)，此外还产生一种二元毒素。艰难梭菌易引起的疾病有：抗生素相关性腹泻(AAD)，表现为引起大量棕色或水状腹泻；伪膜性肠炎(PMC)，表现为腹泻、腹痛伴有全身中毒症状，伴随血压低，严重时能致死，通常还伴有发烧，白细胞增多，之后导致死亡，是很严重的一类疾病；艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)甚至爆发性腹泻，近年欧美等地的CDAD发病率增加，出现爆发流行且并发症和死亡率高；还可引起肾盂肾炎、脑膜炎、腹腔及阴道感染、菌血症和气性坏疽等。肠道微生态菌群可阻碍艰难梭菌的定植感染，而抗生素用药则削弱了这种微生物菌群的屏障作用，成为引发该菌感染的一个主要危险因素。高龄、抗肿瘤化疗以及严重的基础疾病也是诱发该菌感染的危险因素。此外，还包括久住于医院和护理机构以及环境污染，感染的严重程度随着年龄的增加而升高，65岁以上住院患者发生感染的风险是年轻患者的10倍之高。艰难梭菌感染部分病例病情严重，感染相关死亡率为5％。艰难梭菌感染后行紧急结肠切除术和发生死亡的独立预测因素包括白细胞计数高于15000/mL、低蛋白血症和急性肾损伤。复发性艰难梭菌感染危险因素与之类似，还包括高龄、初始感染病情重及持续使用对艰难梭菌无效的抗菌药物等。艰难梭菌感染的复发风险随着复发次数的增多而升高，初次感染后复发率20％，多次复发后复发率达60％。而复发感染的医疗花费也超过了首次感染。复发原因多是因为再次暴露于感染源或患者体内残存的孢子再次激活感染(如宿主免疫力受损降低、结肠微生物菌群屏障作用减弱)的缘故。其他感染危险因素还包括炎症性肠病、器官移植、化疗、慢性肾脏疾病、免疫缺陷、暴露于婴儿感染携带者或成人感染者。近年来发现该菌逐渐成为一种呈全球性分布的主要肠道病原体，全球病例数快速增加。这与新毒株不断出现并迅速扩散，BI/NAP1/027型菌株频繁暴发有关。目前为止，此毒力株已波及到美国至少48个州，欧洲至少16个国家，成为比利时、卢森堡、北爱尔兰、苏格兰、西班牙的优势基因型，并引起人们高度重视。其他国家也陆续发现毒株，澳大利亚已分离到027基因型。目前中国艰难梭菌产毒株分离率达66.7％，也有027型高致病株的报道。由于尚缺乏有效的疫苗，感染防控主要依赖于抗菌药物使用规范管理工作、预防院内感染以及使用益生菌。医院内艰难梭菌几乎无处不在，其活性孢子可存在于医护人员的双手、听诊器、病床用品、电话、浴室、床旁家具上。研究指出，减少住院病人抗菌药物的使用量可有效降低艰难梭菌的院内感染发生率，但严格实行抗菌药物管理仍需投入大量人力物力，同时并不是适用于每个医疗机构。目前对于艰难梭菌相关腹泻的常规治疗方案大多进行抗生素治疗，包括甲硝唑、万古霉素、利福平等，但由于不能杀灭其芽胞，故容易复发并产生耐药性。最近有报道发现甲硝唑疗效有所下降以及耐药菌株的出现，并且艰难梭菌对万古霉素的敏感性有所降低同时，各地分离出的艰难梭菌对克林霉素、氟喹诺酮类、大环内酯类等抗生素的耐药率不断上升。之前的BI/NAP1/027菌株对氟喹诺酮类药物较敏感，近年来随着氟喹诺酮类药物的广泛使用，最近新分离的BI/NAP1/027流行株对C-8甲氧基氟喹诺酮、莫西沙星、加替沙星等氟喹诺酮类抗生素具有普遍高水平耐药性。中国抗生素使用极其不规范，滥用问题突出。临床上大剂量、多疗程、广谱抗生素、激素、免疫制剂的应用，使正常菌群被破坏，导致肠道菌群失调发生率上升。此外，随着中国科技社会进步，医疗发展，老龄化社会的来临，越来越多群体，尤其是住院患者，直接或间接与病原体接触机会增加，加上慢性疾病导致的抵抗力低下等原因，菌群失调越来越常见。菌群稳态失衡情况下，机会性致病菌趁势迅速生长，进一步破坏的肠粘膜屏障，导致细菌易位，脓毒血症，甚至多器官功能衰竭(Multipleorgandysfunctionsyndrome,MODS)，给临床带来了极大的压力与医疗支出。(王浦,华南地区艰难梭菌流行病学研究与新型分子生物学检测技术评估[D],南方医科大学博士论文,2014年5月)。近年来，对反复发作的难治性艰难梭菌感染(CDI)，粪便移植法是研究热点。从健康的供者(经严格的传染性病原体筛查)选择粪便，通过灌肠，鼻饲以及内镜植入等方式，种植到CDI反复发作患者结肠中，以恢复患者肠道菌群稳态。但是，这项技术并未推广，到2015年2月为止，仅存在于美国的一些医院。未推广原因一是还没有进行过相关的可控研究，无法防止粪便移植可能传播难以发现的疾病，像病毒、致病菌、寄生虫等；二是因为粪便不是市场销售的生物制品，操作程序没有得到统一的规定，应用剂量也没有文献具体报告；三是由于筛选健康捐献者的程序复杂，要像检查器官移植捐赠者一样进行检查，成本较高。艰难梭菌相关腹泻的发生与抗生素的应用有关，且多数是正常肠道菌群失调的结果，因此对肠道正常菌群有调节和平衡作用的微生态制剂(益生菌、益生元、合生元)就被用在了艰难梭菌相关腹泻的预防和治疗方面。同时，使用益生菌的治疗费用较低，适用于常规治疗使用。据统计，每例住院患者控制抗生素相关腹泻的花费约为50-79欧元，使用益生菌可显著降低相关治疗费用，并可有效控制感染复发。(李卫敏,等微生态制剂在控制艰难梭菌相关腹泻中的应用现状与前景[J],中国微生态学杂志,2013,25(5)：600-603.)脆弱拟杆菌(Bacteroidesfragilis)为一种革兰氏染色阴性、杆状、两端钝圆而浓染，有荚膜、无芽胞、无动力的专性厌氧细菌，分为产肠毒素型和非产肠毒素型，人及动物肠道正常菌群的一部分，主要存于结肠中，此外，呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道粘膜也可定植生长。目前，本领域已经对脆弱拟杆菌进行了大量研究，脆弱拟杆菌并非只是条件致病菌，定殖在肠道的脆弱拟杆菌与宿主建立了互利共生的友好关系，为共生菌，当脆弱拟杆菌数量下降时，机体表现异常。但是，目前脆弱拟杆菌对艰难梭菌的影响，国内外仍无报道。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供了脆弱拟杆菌的新应用。具体技术方案如下：脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)在制备防治由艰难梭菌感染引起的疾病的药物组合物或保健食品中的应用。脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)在制备抑制艰难梭菌粘附细胞的组合物中的应用。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)为保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)ZY-312、保藏编号为CGMCCNo.7280的脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)Bd-312或脆弱拟杆菌(b本文档来自技高网...

【技术保护点】
脆弱拟杆菌(bacteroides fragilis)在制备防治由艰难梭菌感染引起的疾病的药物组合物或保健食品中的应用。

【技术特征摘要】
1.脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)在制备防治由艰难梭菌感染引起的疾病的药物组合物或保健食品中的应用。2.脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)在制备抑制艰难梭菌粘附细胞的组合物中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)为保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)ZY-312、保藏编号为CGMCCNo.7280的脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)Bd-312或脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)ATCC25285。4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述药物组合物的剂型为丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊或注射剂。5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述保健...

【专利技术属性】
技术研发人员：智发朝，范宏英，刘洋洋，王晔，白杨，王从峰，
申请(专利权)人：广州知易生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44