发酵培养基及生产表阿霉素的方法技术

本发明专利技术公开了一种发酵培养基及生产表阿霉素的方法。该发酵培养基特别适用于特定的波塞链霉菌(Streptomyces peucetius)工程菌发酵生产表阿霉素，其中包括有机碳源、氮源、无机盐和水，按发酵培养基的总体积计，有机碳源含量为50‑250g/L；氮源含量为10‑100g/L；该波塞链霉菌工程菌通过将含有酮基还原酶基因的重组载体转化波塞链霉菌构建而成。本发明专利技术的发酵培养基成分简单，其大幅提高了表阿霉素的发酵单位，适用于表阿霉素的规模化生产。

The method of fermentation medium and the production of epirubicin

【技术实现步骤摘要】
发酵培养基及生产表阿霉素的方法
本专利技术属于工业微生物
，特别涉及一种用于波塞链霉菌工程菌发酵生产表阿霉素的发酵培养基。
技术介绍
表阿霉素是一种蒽环类抗生素，分子式为C27H29011N，是意大利学者Arcamnoe等于1975年通过半合成途径合成得到的，为细胞周期非特异性药，对S期作用最强，对M、G1和G2期也有作用，具有强烈的细胞毒性作用，为广谱抗肿瘤药。表阿霉素与阿霉素的区别只是在氨基糖部分4’位的羟基构型不同，这种立体结构的细微变化导致其心脏、骨髓毒性明显降低，在临床上主要用于多种癌症的治疗，对各种实体瘤，脑瘤，血管瘤等也有不同程度的缓解作用，成为目前临床应用最广泛的抗肿瘤药物之一。目前在工业上表阿霉素仍采用化学半合成方法得到，以柔红霉素为原料合成表阿霉素大体上可通过两种合成路线：一种方法首先通过醇解将柔红霉素分解成蒽醌环和糖环两部分，分别对两部分进行修饰改造，糖环部分通过胺基保护、羟基氧化、选择性还原以及C4羟基对映异构体的分离等步骤，得到合成表阿霉素所需的糖环结构，葱醌环部分通过溴代、乙酸取代以后与糖环连接，再经过酯水解、保护、脱保护等步骤最终得到表阿霉素。这种本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种发酵培养基，其特征在于，其用于波塞链霉菌工程菌发酵生产表阿霉素，所述发酵培养基包括有机碳源、氮源、无机盐和水，按发酵培养基的总体积计，所述的有机碳源含量为50‑250g/L；所述的氮源含量为10‑100g/L；所述波塞链霉菌工程菌通过将含有酮基还原酶基因的重组载体转化波塞链霉菌(Streptomyces peucetius)构建而成，所述酮基还原酶基因的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID No.1～9所示，所述的波塞链霉菌为基因修饰后破坏dnmV基因的dnmV破坏株，所述dnmV破坏株含有dnmV基因破坏用质粒，所述dnmV基因破坏用质粒的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.28所示。

【技术特征摘要】
1.一种发酵培养基，其特征在于，其用于波塞链霉菌工程菌发酵生产表阿霉素，所述发酵培养基包括有机碳源、氮源、无机盐和水，按发酵培养基的总体积计，所述的有机碳源含量为50-250g/L；所述的氮源含量为10-100g/L；所述波塞链霉菌工程菌通过将含有酮基还原酶基因的重组载体转化波塞链霉菌(Streptomycespeucetius)构建而成，所述酮基还原酶基因的核苷酸序列分别如序列表SEQIDNo.1～9所示，所述的波塞链霉菌为基因修饰后破坏dnmV基因的dnmV破坏株，所述dnmV破坏株含有dnmV基因破坏用质粒，所述dnmV基因破坏用质粒的核苷酸序列如序列表SEQIDNo.28所示。2.如权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，所述的有机碳源为豆油、乳糖、甘油、可溶性淀粉、玉米淀粉、蔗糖、麦芽糊精和土豆糊精中的一种或多种；和/或，按发酵培养基的总体积计，所述有机碳源的含量为50-220g/L；和/或，所述的氮源为硫酸铵、硝酸铵、大豆蛋白胨、胰蛋白胨、黄豆粉、热榨黄豆饼粉、冷榨黄豆饼粉、酵母提取物、酵母粉、棉籽饼粉和麸质粉中的一种或多种；和/或，按发酵培养基的总体积计，所述氮源的含量为15-50g/L；和/或，所述的无机盐包括NaCl、CaCl2和CaCO3中的一种或多种；和/或，按发酵培养基的总体积计，所述的无机盐的用量为8-9g/L；和/或，所述的水为蒸馏水；和/或，所述的发酵培养基的pH值为5.0-8.5。3.如权利要求2所述的发酵培养基，其特征在于，所述有机碳源为麦芽糊精、豆油和土豆糊精中的一种或多种；和/或，按发酵培养基的总体积计，所述有机碳源的含量为70-220g/L；和/或，所述的氮源为酵母粉、黄豆粉、热榨黄豆饼粉、冷榨黄豆饼粉和麸质粉中的一种或多种；和/或，按发酵培养基的总体积计，所述氮源的含量为15-45g/L；和/或，每升发酵培养基中，所述无机盐包...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈少欣，王晓茹，
申请(专利权)人：上海医药工业研究院，中国医药工业研究总院，
类型：发明
国别省市：上海,31