毕赤酵母的培养基制备方法技术

本发明专利技术公开了毕赤酵母的培养基制备方法。步骤如下：首先在平板中加入3-5%的琼脂粉，随后在115-130摄氏度条件下进行高温灭菌至少15分钟；再加入100克葡萄糖，灭菌15分钟或者过滤除菌；在3-4摄氏度条件下静置24小时候提纯；再取适量琼脂置于40摄氏度的纯净水中进行冷却、保温；加入至提纯后的琼脂粉中，混合，振荡，摇匀；再在无菌水中灭菌；再次提纯即可。可以加入10毫升H母液；所述无菌水需要保持在35-36摄氏度。本发明专利技术的有益效果是，成本低，对环境污染小，可以作为大量制备GK8的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种实验方法，具体来说，。
技术介绍
毕赤酵母，是甲醇营养型酵母中的一类能够利用甲醇作为唯一碳源和能源的酵母菌。与其它酵母一样，在无性生长期主要以单倍体形式存在，当环境营养限制时，常诱导2个生理类型不同的接合型单倍体细胞交配，融合成双倍体。毕赤酵母的另一个生物学特点是，甲醇代谢所需的醇氧化酶被分选到过氧化物酶体中，形成区域化。以葡萄糖作碳源时，菌体中只有I个或很少几个小的过氧化物酶体，而以甲醇作碳源时，过氧化物酶体几乎占到整个细胞体积的80%，AOX增至细胞总蛋白的35%-40%。因此，当在AOX基因前利用同源重组方式插入外源蛋白基因时，可获得大量表达。同时，根据甲醇酵母这种可以形成过氧化物酶体的特性，既可利用该系统表达一些毒性蛋白和易被降解的酶类，也可用以研究细胞特异区域化的生物发生及其机制和功能，为闻等动物类似的研究提供启不。
技术实现思路
为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: ，步骤如下:首先在平板中加入3-5%的琼脂粉，随后在115-130摄氏度条件下进行高温灭菌至少15分钟；再加入100克葡萄糖，灭菌15分钟或者过滤除菌；在3-4摄氏度条件下静置24小时候提纯；再取适量琼脂置于40摄氏度的纯净水中进行冷却、保温；加入至提纯后的琼脂粉中，混合，振荡，摇匀；再在无菌水中灭菌；再次提纯即可。本专利技术中，可以加入10毫升H母液。本专利技术中，所述无菌水需要保持在35-36摄氏度。本专利技术的有益效果是，成本低，对环境污染小，可以作为大量制备GK8的途径。【具体实施方式】，步骤如下:首先在平板中加入4%的琼脂粉，随后在120摄氏度条件下进行高温灭菌至少15分钟；再加入100克葡萄糖，灭菌15分钟或者过滤除菌；在3摄氏度条件下静置24小时候提纯；再取适量琼脂置于40摄氏度的纯净水中进行冷却、保温；加入至提纯后的琼脂粉中，混合，振荡，摇匀；再在无菌水中灭菌；再次提纯即可，加入10毫升H母液，所述无菌水需要保持在35摄氏度。以上所述，仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内，根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
毕赤酵母的培养基制备方法，其特征在于，步骤如下：首先在平板中加入3?5%的琼脂粉，随后在115?130摄氏度条件下进行高温灭菌至少15分钟；再加入100克葡萄糖，灭菌15分钟或者过滤除菌；在3?4摄氏度条件下静置24小时候提纯；再取适量琼脂置于40摄氏度的纯净水中进行冷却、保温；加入至提纯后的琼脂粉中，混合，振荡，摇匀；再在无菌水中灭菌；再次提纯即可。

【技术特征摘要】
1.毕赤酵母的培养基制备方法，其特征在于，步骤如下:首先在平板中加入3-5%的琼脂粉，随后在115-130摄氏度条件下进行高温灭菌至少15分钟；再加入100克葡萄糖，灭菌15分钟或者过滤除菌；在3-4摄氏度条件下静置24小时候提纯；再取适量琼脂置于40摄氏度的纯净水中进...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽，
申请(专利权)人：徐丽，
类型：发明
国别省市：