免疫调节融合蛋白及其用途制造技术

本公开涉及含有细胞外结合结构域和细胞内信号传导结构域的免疫调节融合蛋白，其中靶标的结合能够在宿主细胞(诸如，T细胞)中产生调节信号。本公开还涉及表达该免疫调节融合蛋白的免疫细胞在治疗某些疾病(诸如，癌症或传染病)中的用途。

Immunomodulatory fusion protein and its use

The present disclosure deals with immunomodulation fusion protein containing extracellular domain and intracellular signal transduction domain, in which target binding can produce regulatory signals in host cells (such as T cells). The present disclosure also relates to the use of immune cells expressing the immunoregulatory fusion protein in the treatment of certain diseases, such as cancer or infectious diseases.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫调节融合蛋白及其用途关于序列表的声明与本申请相关的序列表以文本格式提供以代替纸质副本，并且通过引用并入本说明书中。包括序列表的文本文件的名称为360056_433WO_SEQUENCE_LISTING.txt。文本文件是286KB，于2016年3月4日创建，并通过EFS-Web电子提交。
技术介绍
当在肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)群中发现肿瘤反应性T细胞时，开始开发基于T细胞的免疫疗法(Clarketal.，CancerRes.29：705，1969)。在一些情况下，称为过继性T细胞转移的一种策略涉及分离预先选择以用于肿瘤反应性的肿瘤浸润淋巴细胞，在IL-2的存在下由抗-CD3和抗-CD28抗体诱导的肿瘤反应性T细胞的克隆扩增，以及最后将扩增的细胞群注入到患有肿瘤的患者(连同化疗和IL-2的重复给药)(Dudleyetal.，Science298：850，2002)。这种形式的带有肿瘤浸润淋巴细胞的过继性T细胞治疗在技术上是繁琐的，并且导致只有一小部分黑素瘤患者完全缓解，且在其他癌症中很少有效(Besseretal.，Clin.CancerRes.16：2646，2010)。肿瘤反应性T细胞克隆的分离导致另一种免疫治疗方法的开发-产生对于特别抗原具有特异性的重组T细胞受体(TCRs)，其可被引入到T细胞中，例如使用载体递送系统以将特异性赋予理想靶标，诸如由在肿瘤细胞上表达的主要组织相容性复合物(MHC)分子呈递的肿瘤相关肽(在人体中称为人白细胞抗原(HLA))。另一种方法引入了称为嵌合抗原受体(CAR)的合成受体，其通常含有抗原结合结构域，例如在抗肿瘤治疗方面其能够结合肿瘤特异性抗原或相关抗原，与包括效应子结构域的一个或多个细胞内组分连接(例如原始信号结构域，诸如TCR信号结构域或在某些情况下为共刺激信号结构域)。与给予TILs不同，用于工程化TCR或CART细胞免疫治疗的基本方法通常是用转基因编码肿瘤靶向部分来基因修饰人类T细胞，离体扩增重组T细胞，并将扩增的重组T细胞输送回患者。已经表明采用表达重组TCRs的T细胞的T细胞疗法具有有希望的临床益处，特别是在某些B细胞癌中。然而，有效的T细胞活化通常需要或由并发共刺激信号增强(ChenandFlies，Nat.Rev.Immunol.13：227-242，2013)。在肿瘤微环境中，共刺激分子通常下调。因此，表达对癌症抗原具有特异性的重组TCRs的T细胞通常需要通过IL-2的外源刺激。当TCR与抗原呈递细胞(APC)上MHC中呈现的特异性肽接合时，T细胞的活化开始(Rossyetal.，FrontiersinImmunol.3：1-12，2012)。T细胞与APC的相互作用点成为免疫突触，其由三个同心的超分子活化簇(SMACs)组成，包括中心cSMAC，外周pSMAC和远端dSMAC(Rossyetal.，FrontiersinImmunol.3：1-12，2012)。在cSMAC中，共刺激受体能够募集信号分子以放大TCR信号。该共刺激受体可包括CD28，并且在一些情况下形成具有TCR的微团簇以降低活化阈值(ChenandFlies，Nat.Rev.Immunol.13：227-242，2013)。由T细胞表达的跨膜蛋白获得cSMAC可能受到细胞外结构域的尺寸的限制。例如，CD45具有大的胞外域并且通常从免疫突触中排除，从而阻止其抑制TCR信号传导的能力(JamesandVale，Nature487：64-69，2012)。在免疫治疗领域仍然需要为宿主细胞提供免疫调节信号的替代组合物和方法，用以治疗各种疾病(诸如癌症或感染)。目前公开的实施方案解决了这些需求并提供了其它相关的优势。专利技术概述在某些方面，本公开涉及融合蛋白，其包括细胞外组分(该细胞外组分包括特异性结合靶标的结合结构域)、由细胞内信号传导结构域构成的细胞内组分和连接细胞外和细胞内组分的疏水组分，条件是融合蛋白：：靶标复合物的长度跨越的距离与免疫突触中膜之间的距离相似。在一些实施方案中，形成于融合蛋白与靶标之间的复合物的长度或空间距离或者该融合蛋白：：目标复合物的一部分(通常为该复合物的细胞外部分)的长度或空间距离为或者跨越特定距离，例如在一些实施方案中是小于一定距离或小于约一定距离的距离。在一些方面，融合蛋白：：靶复合物(或典型为其细胞外部分)的距离小于50nm或约50nm，小于40nm或约40nm，小于30nm或约30nm，或者小于20nm或约20nm或者等于15nm或小于15nm或约15nm。在一些实施方案中，其为或约为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20nm，例如为或约为14或15nm。在一些方面，距离是与免疫突触中的膜之间的距离相似的距离，或者是与以下距离相同、大约相同或基本上相同的距离：对于TRC-肽/MHC复合物，TCR的细胞外结构域的膜最近端部分(例如，残基)与MHC(例如HLA，诸如MHCI或MHCII)分子的最近端部分(例如，残基)之间的距离，或该复合物的细胞外部分跨越的距离(或由已知包括在突触内的细胞外部分所跨越的空间距离，例如含有CD8、CD4、CD28及其各自的结合配偶体或配体的复合物)。在一些实施方案中，复合物的空间距离是指两个不同细胞的膜之间的距离，其中第一细胞和第二细胞在它们的表面上各自表达结合配偶体，当细胞彼此接近时，该结合配偶体可以在膜之间形成复合物。在一些方面，该距离是与由TCR以及MHC分子的同源相互作用所形成的复合物的细胞外部分所跨越的距离相同、大约相同或基本上相同的距离。在一些方面，例如融合蛋白包括来自通常能够进入免疫突触或与抗原受体共定位的分子的结合结构域，该距离与由分子(具有融合蛋白中使用的结合结构域)及其天然结合配偶体形成的复合物所跨越的距离相似或相同。在一些方面，例如融合蛋白包括来自通常不能进入免疫突触或通常不能与抗原受体共定位的分子的结合结构域，该距离不同于(例如，小于或者基本上小于)与由分子(具有融合蛋白中使用的结合结构域或其功能部分)及其天然结合配偶体形成的复合物所跨越的距离。在一些实施方案中，在本公开的融合蛋白的细胞外组分内的结合结构域含有能够递送抑制信号的分子的靶标结合部分，诸如抑制性分子(例如免疫抑制分子，诸如免疫抑制受体或免疫检查点分子)。在某些方面，该分子是糖蛋白检查点家族成员。在某些实施方案中，包括来自糖蛋白检查点家族成员的结合结构域的融合蛋白或不是B7或B7结合分子，或不是CD28-B7超家族成员(例如，不是CD28、CTLA4、ICOS或其它B7家族结合分子)示例性的糖蛋白检查点家族成员包括CD200R、SIRPα、CD279(PD-1)、CD2、CD95(Fas)、CTLA4(CD152)、CD223(LAG3)、CD272(BTLA)、A2aR、KIR、TIM3、CD300或LPA5，或者任何此类分子的结合变体。在一些实施方案中，本公开的融合蛋白的细胞外组分内的结合结构域包括前述任何一种的结合配偶体或任何此类分子的结合变体。在该实施方案的某些方面，融合蛋白的细胞内部分包括能够向淋巴细胞(例如，T细胞)递送刺激信号(例如，共刺激信号)的信号传导结构域，诸如CD28、4BBB本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种融合蛋白，其包括(a)由特异性结合靶标的结合结构域构成的细胞外组分，(b)由细胞内信号传导结构域构成的细胞内组分，和(c)连接细胞外组分和细胞内组分的疏水组分，其中由所述融合蛋白与所述靶标特异性结合而形成的复合物(融合蛋白：：靶标复合物)的细胞外部分具有这样的大小或跨越这样的距离：(i)高达大约免疫突触的两个细胞膜之间的距离，(ii)高达大约以下距离或与以下距离基本上相同：T细胞受体(TCR)与特异性结合TCR的MHC‑肽复合物之间的复合物的细胞外部分所跨越的距离，(iii)高达大约以下距离或与以下距离基本上相同：包括结合结构域的天然分子与其相关结合配偶体之间的复合物的细胞外部分所跨越的距离，(iii)小于或高达大约40nm、25nm、20nm、15nm或14nm；或(iv)其任意组合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.05 US 62/128,9791.一种融合蛋白，其包括(a)由特异性结合靶标的结合结构域构成的细胞外组分，(b)由细胞内信号传导结构域构成的细胞内组分，和(c)连接细胞外组分和细胞内组分的疏水组分，其中由所述融合蛋白与所述靶标特异性结合而形成的复合物(融合蛋白：：靶标复合物)的细胞外部分具有这样的大小或跨越这样的距离：(i)高达大约免疫突触的两个细胞膜之间的距离，(ii)高达大约以下距离或与以下距离基本上相同：T细胞受体(TCR)与特异性结合TCR的MHC-肽复合物之间的复合物的细胞外部分所跨越的距离，(iii)高达大约以下距离或与以下距离基本上相同：包括结合结构域的天然分子与其相关结合配偶体之间的复合物的细胞外部分所跨越的距离，(iii)小于或高达大约40nm、25nm、20nm、15nm或14nm；或(iv)其任意组合。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白：：靶标复合物定位于超分子活化簇(SMAC)。3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白：：靶标复合物定位于中心区超分子活化簇(cSMAC)。4.根据权利要求2或3所述的融合蛋白，其中所述SMAC具有与抗原：：人白细胞抗原(HLA)复合物有关的T细胞受体(TCR)的宽度。5.根据权利要求1-4中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分与负信号有关且所述细胞内组分与正信号有关。6.一种融合蛋白，其包括(a)由特异性结合靶标的结合结构域构成的细胞外组分，(b)由细胞内信号传导结构域构成的细胞内组分，和(c)连接细胞外组分和细胞内组分的疏水组分，其中所述结合结构域是抑制分子结合结构域或具有与抑制分子结合结构域至少95％的同一性，且所述细胞内信号传导结构域是共刺激或刺激分子结合结构域或包含与共刺激或刺激分子结合结构域至少95％的同一性，并且其中所述抑制分子不是B7-CD28超家族成员，不是CTLA4，不是PD1，不与B7结合，是糖蛋白，或其任意组合。7.根据权利要求1-6中任一项所述的融合蛋白，其中在包括对抗原具有特异性的TCR或嵌合抗原受体的T细胞中，相比于与所述T细胞基本上相同但不包含所述融合蛋白的细胞，所述融合蛋白的表达导致了应答于抗原的结合和/或给予受试者后T细胞的存活、扩增、细胞毒性、细胞因子分泌和/或对多轮刺激的应答上至少约1.5倍、2倍或3倍的增长，和/或导致了给予所述细胞的受试者的存活时间、无病的存活或一种或多种疾病症状的改善上至少约1.5倍、2倍或3倍的增长。8.根据权利要求1-7中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在T细胞中表达时能够与所述T细胞表达的TCR或CAR共定位。9.根据权利要求6-8中任一项所述的融合蛋白，其中所述结合结构域和/或所述抑制分子与CD200或CD47特异性结合。10.根据权利要求6-9中任一项所述的融合蛋白，其中所述结合结构域源自，和/或所述抑制分子是CD200R、SIRPα、TIM3、CD2、CD95(Fas)、CD223(LAG3)、A2aR、KIR、TIM3、CD300或LPA5。11.根据权利要求6-9中任一项所述的融合蛋白，其中所述抑制分子是或包括CD200R。12.根据权利要求6-9中任一项所述的融合蛋白，其中所述抑制分子是或包括SIRPα。13.根据权利要求1-12中任一项所述的融合蛋白，其中所述结合结构域是抗体结合片段、受体胞外域、细胞因子或配体。14.根据权利要求1-13中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括CD200R、SIRPα、CD279(PD-1)、CD2、CD95(Fas)、CD152(CTLA4)、CD223(LAG3)、CD272(BTLA)、A2aR、KIR、TIM3、CD300或LPA5的细胞外部分。15.根据权利要求1-14中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分进一步包括额外的细胞外部分，其中所述额外的细胞外部分任选来自分子的细胞外部分或与分子的细胞外部分具有同一性，所述分子不同于所述结合结构域的来源分子或不含有所述结合结构域。16.根据权利要求1-15中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分进一步包括来自疏水组分的细胞外部分，或者进一步包括含有所述疏水组分或其部分的细胞外部分。17.根据权利要求15或16所述的融合蛋白，其中所述额外的细胞外部分包括多聚化结构域和/或间隔区。18.根据权利要求1-17中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括CD200R的细胞外部分，或其中所述结合结构域包括CD200R的CD200结合部分或其结合变体。19.根据权利要求1-17中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括SIRPα的细胞外部分，或其中所述结合结构域包括SIRPα的CD47结合部分或其结合变体。20.根据权利要求1-19中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分或所述额外的细胞外部分包括多聚化结构域。21.根据权利要求20所述的融合蛋白，其中所述多聚化结构域包括半胱氨酸残基。22.根据权利要求20所述的融合蛋白，其中所述多聚化结构域包括细胞外组分，所述细胞外组分经修饰以含有来自所述疏水组分的约2个至约15个氨基酸之内的半胱氨酸残基。23.根据权利要求1-22中任一项所述的融合蛋白，其中所述疏水组分包括CD2、CD3ε、CD3δ、CD3ζ、CD25、CD27、CD28、CD40、CD79A、CD79B、CD80、CD86、CD95(Fas)、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)、CD150(SLAMF1)、CD152(CTLA4)、CD200R、CD223(LAG3)、CD270(HVEM)、CD272(BTLA)、CD273(PD-L2)、CD274(PD-L1)、CD278(ICOS)、CD279(PD-1)、CD300、CD357(GITR)、A2aR、DAP10、FcRα、FcRβ、FcRγ、Fyn、GAL9、KIR、Lck、LAT、LRP、NKG2D、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、PTCH2、ROR2、Ryk、Slp76、SIRPα、pTα、TCRα、TCRβ、TIM3、TRIM、LPA5或Zap70的跨膜结构域。24.根据权利要求1-23中任一项所述的融合蛋白，其中所述疏水组分包括CD28的跨膜结构域。25.根据权利要求1-23中任一项所述的融合蛋白，其中所述疏水组分包括4-1BB的跨膜结构域。26.根据权利要求1-25中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导结构域包括共刺激分子的细胞内信号传导结构域。27.根据权利要求26所述的融合蛋白，其中所述共刺激分子包括CD28、CD137(4-1BB)或ICOS。28.根据权利要求1-27中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD3ε、CD3δ、CD3ζ、CD25、CD27、CD28、CD40、CD47、CD79A、CD79B、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)、CD150(SLAMF1)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)、CARD11、DAP10、DAP12、FcRα、FcRβ、FcRγ、Fyn、Lck、LAT、LRP、NKG2D、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、ROR2、Ryk、Slp76、pTα、TCRα、TCRβ、TRIM、Zap70、PTCH2的细胞内信号传导结构域，或其任意组合。29.根据权利要求1-28中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD137(4-1BB)、CD27、CD28、ICOS、OX40(CD134)的共刺激结构域，或其任意组合。30.根据权利要求1-29中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD137(4-1BB)或CD28的共刺激结构域，或其任意组合。31.根据权利要求1-30中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD28的共刺激结构域。32.根据权利要求1-31中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD137(4-1BB)的共刺激结构域。33.根据权利要求1-32中任一项所述的融合蛋白，其中所述靶标是免疫抑制配体。34.根据权利要求1-32中任一项所述的融合蛋白，其中所述靶标选自CD47、CD58、CD95L(FasL)、CD200、CD270(HVEM)、CD274(PD-L1)和GAL9。35.根据权利要求1-34中任一项所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括CD200R的细胞外部分，(b)所述疏水组分包括CD28的跨膜结构域，且(c)所述细胞内组分包括CD28或41BB的细胞内信号传导结构域。36.根据权利要求35所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括CD200R的整个细胞外结构域。37.根据权利要求35所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括来自CD200R的N-末端的至少200个氨基酸。38.根据权利要求35所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括来自CD200R的N-末端的至少约225个氨基酸到至少约235个氨基酸。39.根据权利要求35所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括来自CD200R的N-末端的至少约234个氨基酸。40.根据权利要求35-39中任一项所述的融合蛋白，其中所述CD200R是人CD200R。41.根据权利要求35-40中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内组分包括第二细胞内信号传导结构域。42.根据权利要求41所述的融合蛋白，其中所述第二细胞内信号传导结构域包括CD137(4-1BB)的细胞内信号传导结构域。43.根据权利要求35-42中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括从所述CD28跨膜结构域延伸的CD28的细胞外部分。44.根据权利要求43所述的融合蛋白，其中所述CD28的所述细胞外部分包括半胱氨酸残基。45.根据权利要求1-44中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内信号传导组分不含有CD3ζ信号传导结构域，和/或不含有能够将原始信号递送至T细胞的信号传导结构域，和/或不含有来自天然能够将原始信号递送至T细胞的分子的信号传导结构域。46.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括由如SEQIDNO.：2所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：3所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。47.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括由如SEQIDNO.：2所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。48.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括由如SEQIDNO.：8所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。49.根据权利要求41所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分进一步包括多聚化结构域，所述多聚化结构域具有由如SEQIDNO.：9所示核酸分子编码的氨基酸序列。50.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括由如SEQIDNO.：11所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。51.根据权利要求50所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分进一步包括由如SEQIDNO.：9所示核酸分子编码的氨基酸序列。52.根据权利要求51所述的融合蛋白，其中所述细胞内组分进一步包括第二细胞内信号传导结构域，所述第二细胞内信号传导结构域具有由如SEQIDNO.：13所示核酸分子编码的氨基酸序列。53.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括CD200R的细胞外部分，(b)所述疏水组分包括CD28的跨膜结构域，且(c)所述细胞内组分包括CD137(4-1BB)的细胞内信号传导结构域。54.根据权利要求53所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括CD200R的整个细胞外结构域。55.根据权利要求53所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括来自CD200R的N-末端的至少200个氨基酸。56.根据权利要求53所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括来自CD200R的N-末端的至少约225个氨基酸到至少约235个氨基酸。57.根据权利要求53-56中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括从所述CD28跨膜结构域延伸的CD28的细胞外部分。58.根据权利要求57所述的融合蛋白，其中所述CD28的所述细胞外部分包括半胱氨酸残基。59.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括CD200R的细胞外部分，(b)所述疏水组分包括CD137(4-1BB)的跨膜结构域，且(c)所述细胞内组分包括CD137(4-1BB)的细胞内信号传导结构域。60.根据权利要求59所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括CD200R的整个细胞外结构域。61.根据权利要求59所述的融合蛋白，其中所述CD200R的所述细胞外部分包括来自CD200R的N-末端至少230个氨基酸的细胞外结构域的至少一部分。62.根据权利要求59-61中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括从所述CD137(4-1BB)跨膜结构域延伸的CD137(4-1BB)的细胞外部分。63.根据权利要求62所述的融合蛋白，其中所述CD137(4-1BB)的所述细胞外部分包括半胱氨酸残基。64.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括结合结构域和多聚化结构域，所述结合结构域具有由如SEQIDNO.：8所示核酸分子编码的氨基酸序列，所述多聚化结构域具有由如SEQIDNO.：9所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：13所示核酸分子编码的氨基酸序列。65.根据权利要求64所述的融合蛋白，其中所述细胞内组分进一步包括第二细胞内信号传导结构域，所述第二细胞内信号传导结构域具有由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。66.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括结合结构域和多聚化结构域，所述结合结构域具有由如SEQIDNO.：11所示核酸分子编码的氨基酸序列，所述多聚化结构域具有由如SEQIDNO.：9所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：13所示核酸分子编码的氨基酸序列。67.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括SIRPα的细胞外部分，(b)所述疏水组分包括CD28的跨膜结构域，且(c)所述细胞内组分包括CD28的细胞内信号传导结构域。68.根据权利要求67所述的融合蛋白，其中所述SIRPα的所述细胞外部分包括SIRPα的整个细胞外结构域。69.根据权利要求67所述的融合蛋白，其中所述SIRPα的所述细胞外部分包括来自SIRPα的N-末端的至少361个氨基酸。70.根据权利要求67-69中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞内组分包括第二细胞内信号传导结构域。71.根据权利要求70所述的融合蛋白，其中所述第二细胞内信号传导结构域包括CD137(4-1BB)的细胞内信号传导结构域。72.根据权利要求67-71中任一项所述的融合蛋白，其中所述细胞外组分包括从所述CD28跨膜结构域延伸的CD28的细胞外部分。73.根据权利要求72所述的融合蛋白，其中所述CD28的所述细胞外部分包括半胱氨酸残基。74.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括由如SEQIDNO.：17所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：18所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。75.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括由如SEQIDNO.：17所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。76.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括结合结构域和多聚化结构域，所述结合结构域具有由如SEQIDNO.：21所示核酸分子编码的氨基酸序列，所述多聚化结构域具有由如SEQIDNO.：9所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。77.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所述细胞外组分包括结合结构域和多聚化结构域，所述结合结构域具有由如SEQIDNO.：21所示核酸分子编码的氨基酸序列，所述多聚化结构域具有由如SEQIDNO.：9所示核酸分子编码的氨基酸序列，(b)所述疏水组分包括由如SEQIDNO.：4所示核酸分子编码的氨基酸序列，和(c)所述细胞内组分包括由如SEQIDNO.：13所示核酸分子编码的氨基酸序列。78.根据权利要求70所述的融合蛋白，其中所述细胞内组分进一步包括由如SEQIDNo.：5所示核酸分子编码的氨基酸序列。79.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中(a)所...

【专利技术属性】
技术研发人员：香农·K·奥达，菲利普·D·格林伯格，托马斯·M·施米特，
申请(专利权)人：弗雷德哈钦森癌症研究中心，
类型：发明
国别省市：美国,US