细胞周期蛋白A1特异性T细胞受体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了特异性结合人细胞周期蛋白A1(CCNA1)的包含TCR的结合蛋白、表达这种抗原特异性结合蛋白的宿主细胞、编码这种结合蛋白的核酸、以及用于治疗细胞过度表达CCNA1的疾病或病症(例如癌症)的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞周期蛋白A1特异性T细胞受体及其用途关于序列表的陈述与本申请相关联的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并且在此通过引用结合到说明书中。包含序列表的文本文件的名称为360056_460WO_SEQUENCE_LISTING.txt。文本文件为269KB，创建于2019年2月10日，正在通过EFS-Web电子提交。
技术介绍
涉及离体细胞扩增和输注肿瘤反应性T细胞的过继免疫疗法是一种新兴的治疗方式，特别是在常规治疗失败的患者中(Stromnes等，Immunol.版本号257:145-64,2014)。在一些情况下，肿瘤反应性T细胞包含对肿瘤特异或在肿瘤上过表达的抗原具有特异性的内源性、外源性和/或工程化的受体。癌症-睾丸抗原细胞周期蛋白A1(CCNA1)是一种替代性的A型细胞周期蛋白，由于其在急性髓细胞白血病(AML)和许多上皮癌(包含睾丸癌、子宫内膜癌和卵巢癌)中过度表达，因此是治疗各种癌症的有吸引力的靶标。细胞周期蛋白A1被认为促进细胞增殖和存活，已被证明在小鼠中是致白血病的，并且在超过50％的AML患者的白血病干细胞中被检测到。本文提供了鉴定与细胞周期蛋白A1反应的肿瘤反应性T细胞的方法、鉴定对细胞周期蛋白A1特异的T细胞受体(TCR)的方法、以及使用本文描述的方法鉴定的特异性TCR。附图说明图1描绘了针对HLA-A2限制性表位的细胞周期蛋白A1TCR发现方案。示出了HLA-A2前导肽227-235(SEQIDNO：1)、341-351(SEQIDNO：2)和370-379(SEQIDNO：3)在细胞周期蛋白A1蛋白序列(SEQIDNO：4)的位置。图2示出了用细胞周期蛋白A1重叠肽库刺激CD8+T细胞导致抗原特异性细胞系的产生。图3A-图3B示出了通过计算单个T细胞克隆的四聚体解离常数(Kd)来鉴定高亲和力HLA-A2：01/细胞周期蛋白A1TCR。图4示出了用于分离、鉴定和表达选自高亲和力克隆的高亲和力TCR的示意图。图5A-图5D示出了HLA-A2：01/细胞周期蛋白A1TCR识别肽脉冲靶标并杀死HLA匹配的细胞周期蛋白A1+白血病细胞系和原代AML细胞。图6示出了用于体内安全性测试的顶部HLA-A2：01/细胞周期蛋白A1TCR候选物的诱变示意图。具体实施方式在某些方面，本公开提供了细胞周期蛋白A1特异性的结合蛋白(例如，T细胞受体(TCR))，其与主要组织相容性复合物(MHC)(例如，人白细胞抗原(HLA))有关，用于例如过继免疫疗法来治疗癌症。在某些实施例中，本文所述的组合物和方法将具有治疗效用，用于治疗与CCNA1过表达(例如，以统计学上显著的方式，可检测到的CCNA1表达的水平大于在正常或无病的细胞中可检测到的CCNA-l的表达水平)相关的疾病和病症。此类疾病包含各种形式的过度增殖性疾病，例如急性髓细胞性白血病。这些和相关用途的非限制性实例在本文中进行了描述，包含体外、离体和体内刺激CCNA1抗原特异性T细胞反应，例如通过使用表达对CCNA1肽具有特异性的TCR的重组T细胞(例如，FLDRFLSCM(SEQIDNO：1)、SLIAAAAFCLA(SEQIDNO：2)或YSLSEIVPCL(SEQIDNO：3))。在更详细地阐述本公开之前，提供在本文中使用的某些术语的定义可能有助于理解本公开。贯穿本公开阐述了附加定义。在本说明书中，除非另有说明，否则任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围应理解为包含所述范围内的任何整数的值并且在适当的时候包含其分数(例如，整数的十分之一和十分之一)。同样，除非另有说明，否则本文所叙述的与任何物理特征，例如聚合物亚基、尺寸或厚度有关的任何数值范围应理解为包含所叙述的范围内的任何整数。如本文所用，除非另外指出，否则术语“大约”是指所指示的范围、值或结构的±20％。应当理解，本文所用的术语“一个”和“一种”是指所列举的组分中的“一个或多个”。替代方案(例如“或”)的使用应理解为是指替代方案之一、两者或它们的任意组合。如本文所用，术语“包括(include)”、“具有”和“包含(comprise)”是同义使用的，这些术语和其变体旨在被解释为非限制性的。另外，应当理解，本申请公开了衍生自本文所述的结构和取代基的各种组合的单个化合物或化合物组，其程度与单独阐述每种化合物或化合物组的程度相同。因此，特定结构或特定取代基的选择在本公开的范围内。术语“基本上由...组成”将权利要求的范围限制为指定的材料或步骤，或者限制为实质上不影响要求保护的专利技术的基本特征的材料或步骤。例如，当结构域、区域、模块或蛋白质的氨基酸序列包含其延伸、删除、突变或其组合(例如，氨基酸或羧基末端或结构域之间的氨基酸)，其共同起作用时贡献结构域、区域、模块或蛋白质的长度的最多20％(例如，15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％)，并且基本上不会影响结构域、区域、模块或蛋白质的活性(例如，结合蛋白的靶结合亲和力)(即，将活性降低的幅度不超过50％，例如不超过40％、30％、25％、20％、15％、10％、5％或1％)时，蛋白质结构域、区域或模块(例如，结合结构域、铰链区、接头模块)或蛋白质(可以具有一个或多个结构域、区域或模块)“基本上由特定氨基酸序列组成”。如本文所用，“免疫系统细胞”是指源自骨髓的造血干细胞的免疫系统的任何细胞，其产生两个主要谱系，即髓系祖细胞(其产生诸如单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、巨核细胞和粒细胞)和淋巴样祖细胞(会产生淋巴样细胞，例如T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞)。示例性的免疫系统细胞包含CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4-CD8-双重阴性T细胞、gdT细胞、调节性T细胞、天然杀伤细胞和树突状细胞。巨噬细胞和树突状细胞可以称为“抗原呈递细胞”或“APC”，它们是当与肽复合的APC表面上的主要组织相容性复合物(MHC)受体与T细胞表面上的TCR相互作用时可以激活T细胞的专门细胞。如本文所用，“造血祖干细胞”是指未分化的造血细胞，其能够在体内自我更新，在体外基本上无限制地繁殖，并且能够分化为其他细胞类型，包括T细胞谱系的细胞。造血干细胞可以为例如但不限于从胎儿肝脏、骨髓、脐带血分离。如本文所用，“造血祖细胞”是可以衍生自造血干细胞或胎儿组织并且能够进一步分化成成熟细胞类型(例如免疫系统细胞)的细胞。示例性的造血祖细胞包含具有CD24LoLin-CD117+表型或在胸腺中发现的那些(称为祖细胞)。如本文所用，术语“宿主”是指以异源或外源核酸分子进行遗传修饰以产生目的多肽(例如，高亲和力或增强亲和力的抗CCNA-lTCR)的细胞(例如，T细胞)或微生物。在某些实施例中，宿主细胞可任选地具有或被修饰以包含赋予与异源或外源蛋白质的生物合成相关或不相关的所需特性的其他遗传修饰(例如，包含可检测的标记；删除、改变或截短的内源TCR；增加的共刺激因子表达)。在某些实施例中，宿主细胞是用编码C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合蛋白，包含：/n(a)T细胞受体(TCR)α链可变(Vα)结构域以及TCRβ链可变(Vβ)结构域，所述TCR Vα结构域包含SEQ ID NO：5、7、9、11、11、13、15、17和19中任一项所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQ ID NO：5、7、9、11、13、15、17和19中任一项所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；/n(b)TCR Vα结构域和TCR Vβ结构域，所述TCR Vβ结构域包含SEQ ID NO：6、8、10、12、14、16、18、20和189中任一项所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQ ID NO：6、8、10、12、14、16、18、20和189中任一项所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；或者/n(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ，/n其中所述结合蛋白能够特异性结合人细胞周期蛋白A1(CCNA1)肽FLDRFLSCM(SEQ IDNO：1)：人白细胞抗原(HLA)复合物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180212 US 62/629,648;20180213 US 62/630,198;20181.一种结合蛋白，包含：
(a)T细胞受体(TCR)α链可变(Vα)结构域以及TCRβ链可变(Vβ)结构域，所述TCRVα结构域包含SEQIDNO：5、7、9、11、11、13、15、17和19中任一项所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQIDNO：5、7、9、11、13、15、17和19中任一项所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；
(b)TCRVα结构域和TCRVβ结构域，所述TCRVβ结构域包含SEQIDNO：6、8、10、12、14、16、18、20和189中任一项所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQIDNO：6、8、10、12、14、16、18、20和189中任一项所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ，
其中所述结合蛋白能够特异性结合人细胞周期蛋白A1(CCNA1)肽FLDRFLSCM(SEQIDNO：1)：人白细胞抗原(HLA)复合物。


2.根据权利要求1所述的结合蛋白，其中：
(a)所述Vα结构域包含SEQIDNO：5的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：6的CDR3氨基酸序列；
(b)所述Vα结构域包含SEQIDNO：7的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：8的CDR3氨基酸序列；
(c)所述Vα结构域包含SEQIDNO：9的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：10的CDR3氨基酸序列；
(d)所述Vα结构域包含SEQIDNO：11的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：12的CDR3氨基酸序列；
(e)所述Vα结构域包含SEQIDNO：13的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：14的CDR3氨基酸序列；
(f)所述Vα结构域包含SEQIDNO：15的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：16的CDR3氨基酸序列；
(g)所述Vα结构域包含SEQIDNO：17的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：18的CDR3氨基酸序列；
(h)所述Vα结构域包含SEQIDNO：19的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：20的CDR3氨基酸序列；或者
(i)所述Vα结构域包含SEQIDNO：7的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：189的CDR3氨基酸序列。


3.根据权利要求1所述的结合蛋白，其中：
(a)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：6的CDR3氨基酸序列和由TRBV9*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：5的CDR3氨基酸序列和由TRAV30*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(b)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：8的CDR3氨基酸序列和由TRBV2*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：7的CDR3氨基酸序列和由TRAV10*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(c)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：10的CDR3氨基酸序列和由TRBV6-6*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：9的CDR3氨基酸序列和由TRAV24*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(d)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：12的CDR3氨基酸序列和由TRBV5-6*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：11的CDR3氨基酸序列和由TRAV2l*0l基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(e)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：14的CDR3氨基酸序列和由TRBV7-3*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：13的CDR3氨基酸序列和由TRAV2l*02基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(f)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：16的CDR3氨基酸序列和由TRBV7-3*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：15的CDR3氨基酸序列和由TRAV12-2*02基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(g)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：18的CDR3氨基酸序列和由TRBV7-3*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：17的CDR3氨基酸序列和由TRAV17*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；
(h)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：20的CDR3氨基酸序列和由TRBV7-2*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：19的CDR3氨基酸序列和由TRAV17*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；或者
(i)所述Vβ结构域包含SEQIDNO：189或101的CDR3氨基酸序列和TRBV10-2*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且所述Vα结构域包含SEQIDNO：7或97的CDR3氨基酸序列和由TRAV10*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列。


4.根据权利要求1或2所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)与SEQIDNO：36、38、40、42、44、86、49、51、53、57、59、63、65、67、81、83、162、165、170、172、174、176、178、180和186中任一项所包含的Vα氨基酸序列至少约90％相同的Vα结构域；
(b)与SEQIDNO：36、38、40、42、46、86、49、51、55、57、61、63、67、81、83、162、165、170、172、174、176、178、180和186任一项所包含的Vβ氨基酸序列至少约90％相同的Vβ结构域；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ；
其中所述CDR中的至少三个或四个不具有突变，而具有突变的CDR具有三个或更少的氨基酸取代、插入和/或缺失。


5.根据权利要求4所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)Vα结构域，其包含或由SEQIDNO：36、38、40、42、44、86、49、51、53、57、59、63、65、67、81、83、162、165、170、172、174、176、178、180和186中任一项所包含的Vα氨基酸序列组成；
(b)Vβ结构域，其包含或由SEQIDNO：36、38、40、42、46、86、49、51、55、57、61、63、67、81、83、162、165、170、172、174、176、178、180和186中任一项所包含的Vβ氨基酸序列组成；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ。


6.根据权利要求5所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)包含SEQIDNO：36中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：36中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(b)包含SEQIDNO：38中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：38中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(c)包含SEQIDNO：40中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：40中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(d)包含SEQIDNO：42中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：42中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(e)包含SEQIDNO：44中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：46中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(f)包含SEQIDNO：86中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：86中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(g)包含SEQIDNO：49中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：49中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(h)包含SEQIDNO：51中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：51中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(i)包含SEQIDNO：53中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：55中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(j)包含SEQIDNO：57中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：57中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(k)包含SEQIDNO：59中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：6l中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(l)包含SEQIDNO：63中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：63中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(m)包含SEQIDNO：65中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：67中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(n)包含SEQIDNO：67中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：67中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(o)包含在SEQIDNO：81中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含在SEQIDNO：81中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(p)包含SEQIDNO：83中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：83中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(q)包含SEQIDNO：162中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：162中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(r)包含SEQIDNO：165中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：165中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(s)包含SEQIDNO：170中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：170中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(t)包含SEQIDNO：172中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：172中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(u)包含SEQIDNO：174中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：174中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(v)包含SEQIDNO：176中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：176中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(w)包含SEQIDNO：178中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：178中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；
(x)包含SEQIDNO：180中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：180中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；或者
(y)包含SEQIDNO：186中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：186中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域。


7.一种结合蛋白，包含：
(a)T细胞受体(TCR)α链可变(Vα)结构域以及TCRβ链可变(Vβ)结构域，所述TCRVα结构域包含SEQIDNO：21所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQIDNO：21所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；
(b)TCRVα结构域和TCRVβ结构域，所述TCRVβ结构域包含SEQIDNO：22所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQIDNO：22所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ，
其中所述结合蛋白能够特异性结合人细胞周期蛋白A1(CCNA1)肽SLIAAAAFCLA(SEQIDNO：2)：人白细胞抗原(HLA)复合物。


8.根据权利要求7所述的结合蛋白，其中，所述Vα结构域包含SEQIDNO：21的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：22的CDR3氨基酸序列。


9.根据权利要求7或8所述的结合蛋白，其中：
所述Vβ结构域包含SEQIDNO：22的CDR3氨基酸序列和由TRBV19*0l基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序；并且
所述Vα结构域包含SEQIDNO：21的CDR3氨基酸序列和由TRAV24*0l基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列。


10.根据权利要求7-9中任一项所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)与SEQIDNO：69或73中所包含的Vα氨基酸序列至少约90％相同的Vα结构域；
(b)与SEQIDNO：71或73中所包含的Vβ氨基酸序列至少约90％相同的Vβ结构域；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ；
其中所述CDR中的至少三个或四个不具有突变，而具有突变的CDR具有三个或更少的氨基酸取代、插入和/或缺失。


11.根据权利要求10所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)Vα结构域，其包含或由SEQIDNO：69或73中所包含的Vα氨基酸序列组成；
(b)Vβ结构域，其包含或由SEQIDNO：71或73所示的氨基酸序列组成；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ。


12.根据权利要求11所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)包含SEQIDNO：69中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：71中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；或者
(b)包含SEQIDNO：73中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：73中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域。


13.一种结合蛋白，包含：
(a)T细胞受体(TCR)α链可变(Vα)结构域以及TCRβ链可变(Vβ)结构域，所述TCRVα结构域包含SEQIDNO：23所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQIDNO：23所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；
(b)TCRVα结构域和TCRVβ结构域，所述TCRVβ结构域包含SEQIDNO：24所示的互补决定区3(CDR3)氨基酸序列或SEQIDNO：24所示的并且具有最多五个氨基酸取代、插入和/或缺失的CDR3氨基酸序列；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ，
其中所述结合蛋白能够特异性结合人细胞周期蛋白A1(CCNA1)肽YSLSEIVPCL(SEQIDNO：3)：人白细胞抗原(HLA)复合物。


14.根据权利要求13所述的结合蛋白，其中，所述Vα结构域包含SEQIDNO：23的CDR3氨基酸序列，并且所述Vβ结构域包含SEQIDNO：24的CDR3氨基酸序列。


15.根据权利要求13或14所述的结合蛋白，其中：
所述Vβ结构域包含SEQIDNO：24的CDR3氨基酸序列和由TRBV5-6*01基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列；并且
所述Vα结构域包含SEQIDNO：23的CDR3氨基酸序列和由TRAV19*0l基因编码的CDR1氨基酸序列和CDR2氨基酸序列。


16.根据权利要求13-15中任一项所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)与SEQIDNO：75或79中所包含的Vα氨基酸序列至少约90％相同的Vα结构域；
(b)与SEQIDNO：77或79中所包含的Vβ氨基酸序列至少约90％相同的Vβ结构域；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ；
其中所述CDR中的至少三个或四个不具有突变，而具有突变的CDR具有三个或更少的氨基酸取代、插入和/或缺失。


17.根据权利要求16所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)Vα结构域，其包含或由SEQIDNO：75或79中所包含的Vα氨基酸序列组成；
(b)Vβ结构域，其包含或由SEQIDNO：77或79中所包含的Vβ氨基酸序列组成；或者
(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ。


18.根据权利要求17所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白包含：
(a)包含SEQIDNO：75中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：77中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域；或者
(b)包含SEQIDNO：79中所包含的Vα氨基酸序列的Vα结构域和包含SEQIDNO：79中所包含的Vβ氨基酸序列的Vβ结构域。


19.根据权利要求1至18中任一项所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白为TCR、TCR的抗原结合片段或嵌合抗原受体。


20.根据权利要求19所述的结合蛋白，其中，所述TCR的抗原结合片段包含单链TCR(scTCR)。


21.根据权利要求19所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白是TCR。


22.根据权利要求21所述的结合蛋白，其中，所述TCR包含α链恒定(Cα)结构域，所述Cα结构域与SEQIDNO：33的氨基酸序列具有至少90％的序列同一性。


23.根据权利要求22所述的结合蛋白，其中，所述Cα结构域包含SEQIDNO：33的氨基酸序列。


24.根据权利要求21所述的结合蛋白，其中，所述TCR包含截短的...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·佩雷特，P·D·格林伯格，
申请(专利权)人：弗雷德哈钦森癌症研究中心，
类型：发明
国别省市：美国;US