RAS新抗原特异性结合蛋白及其用途制造技术

本公开提供了用于靶向Ras抗原以例如治疗或预防癌症的组合物和方法。公开的实施例包括与Ras抗原：HLA复合物结合的结合蛋白，例如T细胞受体或嵌合抗原受体。编码这种结合蛋白的多核苷酸可以引入宿主细胞，如T细胞，该细胞可用于治疗各种癌症的免疫疗法。还提供了免疫原性多肽，其可用于例如诱导针对突变的Ras的免疫应答或鉴定与Ras抗原结合的结合蛋白。应答或鉴定与Ras抗原结合的结合蛋白。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】RAS新抗原特异性结合蛋白及其用途
[0001]关于序列表的声明
[0002]与本申请相关的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并在此通过引用并入说明书。包含序列表的文本文件的名称是360056_469WO_SEQUENCE_LISTING.txt。该文本文件大小为653KB，创建于2020年2月17日，正在通过EFS
‑
Web以电子方式提交。

技术介绍

[0003]Ras家族蛋白是小GTPase，参与细胞内信号的传递，包括例如细胞增殖的转导。示例性RAS蛋白包括KRAS(也称为CK
‑
RAS、CFC2、K
‑
RAS2A、K
‑
RAS2B、K
‑
RAS4A、K
‑
RAS4B、KI
‑
RAS、KRAS1、KRAS2、NS、NS3、RALD、RASK2、K
‑
ras、KRAS原癌基因、GTPase和c
‑
Ki
‑
ras2)、HRAS和NRAS。破坏负生长信号的RAS蛋白突变可导致细胞持续增殖。KRAS是多种人类癌症中最常见的突变原癌基因之一，包括黑色素瘤、子宫内膜癌、甲状腺癌、胰腺癌、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌和肺癌，以及一些髓系白血病(如AML)。需要针对突变RAS蛋白的新疗法。
附图说明
[0004]图1
‑
8D涉及本公开的示例性HLA
‑
A11/KRAS特异性TCR。
[0005]图1显示了通过功能筛选(示例性HLA
‑
A11/KRAS特异性TCR的“排序1”)鉴定功能性HLA
‑
A11/KRAS特异性T细胞系。
[0006]图2提供了来自富集方案的示例数据，其中示例性的HLA
‑
A11/KRAS特异性TCR在混合突变KRAS肽刺激后在CD137(4
‑
1BB)上分选。
[0007]图3显示本公开的示例性HLA
‑
A11/KRAS特异性TCR在转导的宿主细胞中是有功能的。数据显示在与载有抗原的靶细胞孵育后转导细胞的活化(Nur77表达)和CD8表达。
[0008]图4A和4B显示示例性HLA
‑
A11/KRAS特异性TCR识别不同的表位。(A)原代人CD8
+
T细胞被转导以表达HLA
‑
A11/KRAS特异性TCR，用1μg/mL的混合KRAS肽刺激16小时，并使用PE
‑
anti
‑
CD137(4
‑
1BB)mAb和anti
‑
CD8 450mAb(赛默飞世尔)(Thermofisher)标记。(B)在高尔基体抑制剂存在的情况下，用1μg/mL的单个KRAS肽(见表左栏)脉冲的APC刺激转导的CD8
+
T细胞4小时。然后检查细胞的IFN
‑
γ产生。
“‑”
＝没有可测量的IFN
‑
γ。“+”＝测得的IFN
‑
γ水平低。“+++”＝测得的IFN
‑
γ水平高。
[0009]图5A
‑
5D显示了示例性HLA
‑
A11/KRAS
‑
G12D特异性和
‑
G12V特异性TCR的功能表征。(A)原代CD8
+
T细胞释放的IFN
‑
γ，这些细胞被转导以表达指定的HLA
‑
A11/KRAS
‑
G12D特异性TCR，并用浓度增加的肽抗原刺激。(B)(A)中显示的TCR的功能亲合力(使用KRAS G12D的logEC50)值。(C)原代CD8
+
T细胞释放的IFN
‑
γ，这些细胞被转导以表达指定的HLA
‑
A11/KRAS
‑
G12V特异性TCR，并用浓度增加的肽抗原刺激。(D)(C)中显示的TCR的功能亲合力(使用KRAS G12V的logEC50)值。
[0010]图6A
‑
6G显示示例性HLA
‑
A11 KRAS G12D突变特异性TCR对KRAS G12D
+
胰腺癌细胞系以及NRAS G12D
+
AML细胞系(THP
‑
1)有反应。
[0011]图7A
‑
7G显示了示例性HLA
‑
A11 KRAS G12V突变特异性TCR对几种癌细胞系的反应
性。TCR被证明对KRAS G12V
+
胰腺癌细胞系(Capan
‑
2)以及NRAS G12V
+
伯基特淋巴瘤细胞系(GA
‑
10.4)有反应。
[0012]图8A
‑
8D显示了KRAS G12D
+
(A11/721.221靶细胞加载了100ng/ml突变肽)；NRAS G12D
+
(THP
‑
1细胞)；和NRAS G12V
+
(GA
‑
10.4细胞)肿瘤系(流式细胞术效应物杀伤试验：指定比例的靶细胞)，是由用本公开的示例性TCR转导的T细胞形成。
[0013]图9
‑
11涉及示例性的HLA
‑
A3相容的KRAS突变肽和反应性T细胞系。
[0014]图9显示了突变的KRAS G12V肽(10
‑
mer(VVVGAVGVGK；SEQ ID NO:2)；9
‑
mer(VVGAVGVK；SEQ ID NO:3))对HLA
‑
A*0301的预测HLA结合亲和力。使用NetMHC 3.4版(可在cbs.dtu.dk/services/NetMHC/在线获取)测量亲和力。
[0015]图10显示了在3轮肽刺激后通过四聚体标记检测HLA
‑
A3/KRAS(G12V)特异性T细胞系。
[0016]图11提供了来自HLA
‑
A3/KRAS(G12V)特异性T细胞富集方案的示例性数据，其中细胞用肽刺激并在CD137(4
‑
1BB)或肽：HLA四聚体上评分。
[0017]图12
‑
20C涉及与HLA
‑
A2相容的KRAS突变肽和示例性T细胞系以及对其特异的TCR。
[0018]图12显示了KRAS序列的HLA
‑
A*02:01MHC
‑
I结合预测数据(使用IEDB)，该序列跨越D
‑
或V
‑
突变的G12位置两侧的11aa。使用Ne本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种结合蛋白，包含T细胞受体(TCR)α链可变(Vα)域和TCRβ链可变(Vβ)域，其中结合蛋白能够结合肽:HLA复合物，其中所述肽包含氨基酸序列KLVVVGAVGV(SEQ ID NO:198)或由其组成，以及其中HLA包括HLA
‑
A*02，任选地HLA
‑
A*02:01。2.根据权利要求1所述的结合蛋白，其中所述结合蛋白能够由人T细胞异源表达。3.根据权利要求1或2的结合蛋白，其中Vα结构域和/或Vβ结构域各自独立地是人的、人源化的或嵌合的，并且优选地各自是人。4.根据权利要求1
‑
3任一项的结合蛋白，其中，当结合蛋白由人T细胞表达时，人T细胞能够特异性杀伤HLA
‑
A*02
+
肿瘤细胞，其表达包含SEQ ID NO：198中所列氨基酸序列或由其组成的肽。5.根据权利要求1
‑
4任一项的结合蛋白，其中，当结合蛋白由人T细胞表达时，当存在表达肽的HLA
‑
A*02
+
肿瘤细胞时，人T细胞具有升高的CD137表达，其中肽包含SEQ ID NO:198中列出的氨基酸序列或由其组成，任选地在进一步存在外源性IFN
‑
γ的情况下，其中CD137表达与以下相比升高：(i)当参考人T细胞存在肿瘤细胞时，不表达结合蛋白的参考人T细胞表达CD137；和/或(ii)当不存在肿瘤细胞和/或不存在表达肽:HLA复合物的抗原呈递细胞时，表达结合蛋白的人T细胞表达CD137，其中肽包含SEQ ID NO：198中列出的氨基酸序列或由其组成，并且其中HLA任选地是HLA
‑
A*02：01。6.根据权利要求1
‑
5任一项的结合蛋白，其中，当结合蛋白由人T细胞表达时，当肽以至少约10
‑
10
M、至少约10
‑9M和/或至少约10
‑8M的浓度存在时，当存在包含SEQ ID NO.:198所示氨基酸序列或由其组成的肽时，人T细胞产生IFN
‑
γ。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的结合蛋白，其中，表达结合蛋白的多个人T细胞的至少约10％、至少约15％、至少约20％或至少约25％的多个人T细胞当存在10
‑9M肽时产生IFN
‑
γ。8.根据权利要求6或7所述的结合蛋白，其中，表达结合蛋白的多个人T细胞的至少约25％、至少约30％、或至少约35％的多个人T细胞当存在10
‑8M肽时产生IFN
‑
γ。9.根据权利要求4
‑
8中任一项所述的结合蛋白，其中当存在0.1ng/mL或更多肽时，人T细胞或多个人T细胞产生IFN
‑
γ，其中肽包含氨基酸序列KLVVVGAVGV(SEQ ID NO:198)或由其组成，其中任选地，当存在1ng/mL包含氨基酸序列KLVVVGAVGV(SEQ ID NO:198)或由其组成的肽时比存在10,000ng/mL包含SEQ ID NO：1的5
‑
14氨基酸或由其组成的肽时，人T细胞或多个人T细胞产生更多的IFN
‑
γ。10.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的结合蛋白，结合蛋白对于包含SEQ ID NO：198中列出的氨基酸序列或由其组成的肽具有log
10
EC50，其中，SEQ ID NO：198具有小于
‑
8.0，任选约
‑
8.5或更小，进一步任选约
‑
8.5、约
‑
8.6、约
‑
8.7、约
‑
8.8、约
‑
8.9、约
‑
9、约
‑
9.1或约
‑
9.2。11.根据权利要求4
‑
10中任一项所述的结合蛋白，其中：(i)结合蛋白由与人T细胞异源的多核苷酸编码；(ii)人T细胞包括CD8
+
T细胞、CD4
+
T细胞或两者；(iii)表达包含SEQ ID NO:198所示氨基酸序列或由其组成的肽的肿瘤细胞是HLA
‑
A*02:01
+
；和/或
(iv)肿瘤细胞包含CFPAC
‑
1细胞。12.根据权利要求1
‑
11中任一项所述的结合蛋白，其中结合蛋白能够不依赖于或不存在CD8而结合肽:HLA复合物。13.根据权利要求1
‑
12中任一项所述的结合蛋白，其中：(i)Vα结构域包含根据Vα氨基酸序列的CDR1α、CDR2α和/或CDR3α氨基酸序列，其中Vα氨基酸序列是以下SEQ ID NO.中任一项：351、343、359、367、375、383、391、399、407、415、423、431、439、447、455、463、471或479；和/或(ii)Vβ结构域包含根据Vβ氨基酸序列的CDR1β、CDR2β和/或CDR3β氨基酸序列，其中Vβ氨基酸序列是以下的SEQ ID NO.中任一项：354、346、362、370、378、386、394、402、410、418、426、434、442、450、458、466、474、482或490。14.根据权利要求1
‑
13任一项的结合蛋白，包含Vα和Vβ氨基酸序列的CDR1α、CDR2α、CDR3α和CDR1β、CDR2β和CDR3β氨基酸序列，Vα和Vβ氨基酸序列为如下：(i)分别为SEQ ID NO：351和354；(ii)分别为SEQ ID NO：343和346；(iii)分别为SEQ ID NO：359和362；(iv)分别为SEQ ID NO：367和370；(v)分别为SEQ ID NO：375和378；(vi)分别为SEQ ID NO：383和386；(vii)分别为SEQ ID NO：391和394；(viii)分别为SEQ ID NO：399和402；(ix)分别为SEQ ID NO：407和410；(x)分别为SEQ ID NO：415和418；(xi)分别为SEQ ID NO：423和426；(xii)分别为SEQ ID NO：431和434；(xiii)分别为SEQ ID NO：439和442；(xiv)分别为SEQ ID NO：447和450；(xv)分别为SEQ ID NO：455和458；(xvi)分别为SEQ ID NO：463和466；(xvii)分别为SEQ ID NO：471和474；(xviii)分别为SEQ ID NO：479和482；或(xix)分别为SEQ ID NO：487和490。15.根据权利要求1
‑
14任一项的结合蛋白，包括：(i)SEQ ID NO：228、222、234、240、246、252、258、264、270、276、282、288、294、300、306、312、318、324或340或其变体中任一项所列的CDR3α氨基酸序列，其中变体包括一种、二种或三种氨基酸置换；和/或(ii)SEQ ID NO:225、219、231、237、243、249、255、261、267、273、279、285、291、297、303、309、315、321或327，或其变体中任一项所示的CDR3β氨基酸序列，其中变体包括一种、二种或三种氨基酸置换，和/或(iii)SEQ ID NO:226、220、232、238、244、250、256、262、268、274、280、286、292、298、304、316、322或328或其变体中任一项所示的CDR1α氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或
三个氨基酸取代；和/或(iv)SEQ ID NO:223、217、229、235、241、247、253、259、265、271、277、283、289、295、301、307、313、319或325，或其变体中任一项所示的CDR1β氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(v)SEQ ID NO:227、221、233、239、245、251、257、263、269、275、281、287、293、299、305、311、317、323、或329，或其变体中任一项所示的CDR2β氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(vi)SEQ ID NO:224、218、230、236、242、248、254、260、266、272、278、284、290、296、302、308、314、320或326，或其变体中任一项所示的CDR2β氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代。16.根据权利要求1
‑
15中任一项所述的结合蛋白，其包含以下所列的CDR1α、CDR2α、CDR3α、CDR1β、CDR2β和CDR3β氨基酸序列：(i)SEQ ID NO:分别226、227、228、223、224、和225；(ii)SEQ ID NO:分别220、221、222、217、218、和219；(iii)SEQ ID NO:分别232、233、234、229、230、和231；(iv)SEQ ID NO:分别238、239、240、235、236、和237；(v)SEQ ID NO:分别244、245、246、241、242、和243；(vi)SEQ ID NO:分别250、251、252、247、248、和249；(vii)SEQ ID NO:分别256、257、258、253、254、和255；(viii)SEQ ID NO:分别262、263、264、259、260、和261；(ix)SEQ ID NO:分别268、269、270、265、266、和267；(x)SEQ ID NO:分别274、275、276、271、272、和273；(xi)SEQ ID NO:分别280、281、282、277、278、和279；(xii)SEQ ID NO:分别286、287、288、283、284、和285；(viii)SEQ ID NO:分别292、293、294、289、290、和291；(xiv)SEQ ID NO:分别298、299、300、295、296、和297；(xv)SEQ ID NO:分别304、305、306、301、302、和303；(xvi)SEQ ID NO:分别310、311、312、307、308、和309；(xvii)SEQ ID NO:分别316、317、318、313、314、和315；(xviii)SEQ ID NO:分别322、323、324、319、320、和321；(xix)SEQ ID NO:分别328、329、330、325、326、和327。17.根据权利要求1
‑
16中任一项所述的结合蛋白，其中：(i)Vα结构域包含氨基酸序列或由其组成，所述氨基酸序列具有与以下任一项至少90％的同一性：SEQ ID NO.:351、343、359、367、375、383、391、399、407、415、423、431、439、447、455、463、471或479；和/或(ii)Vβ结构域包含氨基酸序列或由其组成，所述氨基酸序列具有与以下任一项至少90％的同一性：SEQ ID NO.:354、346、362、370、378、386、394、402、410、418、426、434、442、450、458、466、474、482或490。18.根据权利要求1
‑
17中任一项所述的结合蛋白，其中所述Vα结构域和所述Vβ结构域
包含以下氨基酸序列或由以下氨基酸序列组成：(i)分别为SEQ ID NO：351和354；(ii)分别为SEQ ID NO：343和346；(iii)分别为SEQ ID NO：359和362；(iv)分别为SEQ ID NO：367和370；(v)分别为SEQ ID NO：375和378；(vi)分别为SEQ ID NO：383和386；(vii)分别为SEQ ID NO：391和394；(viii)分别为SEQ ID NO：399和402；(ix)分别为SEQ ID NO：407和410；(x)分别为SEQ ID NO：415和418；(xi)分别为SEQ ID NO：423和426；(xii)分别为SEQ ID NO：431和434；(viii)分别为SEQ ID NO：439和442；(xiv)分别为SEQ ID NO：447和450；(xv)分别为SEQ ID NO：455和458；(xvi)分别为SEQ ID NO：463和466；(xvii)分别为SEQ ID NO：471和474；(xviii)分别为SEQ ID NO：479和482；或(xix)分别为SEQ ID NO：487和490。19.根据权利要求1
‑
18中任一项所述的结合蛋白，进一步包含TCRα链恒定域(Cα)和/或TCRβ链恒定域(Cβ)。20.根据权利要求19的结合蛋白，其中Cα包含与SEQ ID NO.:85或86中列出的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或由其组成。21.根据权利要求19或20的结合蛋白，其中Cβ包含与SEQ ID NOs.:87
‑
99中任一项所述的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或由其组成。22.根据权利要求1
‑
21任一项的结合蛋白，包含TCRα链和TCRβ链，其中TCRα链和TCRβ链包含与下述氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或由其组成：(i)分别为SEQ ID NO：350和353；(ii)分别为SEQ ID NO：342和345；(iii)分别为SEQ ID NO：358和361；(iv)分别为SEQ ID NO：366和369；(v)分别为SEQ ID NO：374和377；(vi)分别为SEQ ID NO：382和385；(vii)分别为SEQ ID NO：390和393；(viii)分别为SEQ ID NO：398和401；(ix)分别为SEQ ID NO：406和409；(x)分别为SEQ ID NO：414和417；(xi)分别为SEQ ID NO：422和425；
ID NO:3所示氨基酸序列或由其组成的肽时，并且其中(i)
‑
(vi)中任一项的肽任选地在人T细胞存在下由肿瘤细胞表达：(i)包含SEQ ID NO:2所列氨基酸序列或由其组成的肽；(ii)包含SEQ ID NO:3所列氨基酸序列或由其组成的肽；(iii)包含SEQ ID NO:4所列氨基酸序列或由其组成的肽；(iv)包含SEQ ID NO:5所列氨基酸序列或由其组成的肽；(v)包含SEQ ID NO:2所列氨基酸序列或由其组成的肽和包含SEQ ID NO:3所列氨基酸序列或由其组成的肽；和/或(vi)包含SEQ ID NO.:4所列氨基酸序列或由其组成的肽和包含或由SEQ ID NO:5中列出的氨基酸序列组成的肽；其中当参考人T细胞存在肽时，与不表达结合蛋白的参考人T细胞的CD137表达相比，和/或与表达结合蛋白的人T细胞的CD137表达相比，当存在包含SEQ ID NO.:2或SEQ ID NO:3所示氨基酸序列或由其组成的肽时，CD137表达升高，并且其中(i)
‑
(vi)中任一项的肽任选地在人T细胞存在下由肿瘤细胞表达。32.根据权利要求27
‑
31中任一项所述的结合蛋白，其具有：(i)包含SEQ ID NO.:2或3中列出的氨基酸序列或由其组成的肽的log
10
EC50小于
‑
6.5，任选地约
‑
7.0、约
‑
7.5或约
‑
8.0或小于
‑
8.0，任选地约
‑
8.0、约
‑
8.1、约
‑
8.2、约
‑
8.3、约
‑
8.4、约
‑
8.5；和/或(ii)包含SEQ ID NO.:4或5中列出的氨基酸序列或由其组成的肽的log
10
EC50小于
‑
7.0或小于
‑
8.0，任选地约
‑
7.5、约
‑
7.6、约
‑
7.7、约
‑
7.8、约
‑
8.0、约
‑
8.1、约
‑
8.2、约
‑
8.3、约
‑
8.4、约
‑
8.5、约
‑
8.6、约
‑
8.7、约
‑
8.8，或大约
‑
8.9。33.根据权利要求27
‑
32中任一项所述的结合蛋白，其中，当所述结合蛋白由人T细胞表达时，当存在以下情况时，所述人T细胞产生IFN
‑
γ：(i)包含或由SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列组成的肽；和/或(ii)包含或由SEQ ID NO:3中列出的氨基酸序列组成的肽；和/或(iii)包含或由SEQ ID NO:4中列出的氨基酸序列组成的肽；和/或(v)包含或由SEQ ID NO:5中列出的氨基酸序列组成的肽，当肽以至少约10
‑
11
M、至少约10
‑
10
M、至少约10
‑9M和/或至少约10
‑8M的浓度存在时。34.根据权利要求33的结合蛋白，其中，在表达结合蛋白的多个人T细胞中，当存在10
‑8M肽、10
‑7M肽或10
‑6M肽时，至少约50％、至少约55％、至少约60％或更多人T细胞产生IFN
‑
γ。35.根据权利要求33或34中任一项所述的结合蛋白，其中，在表达所述结合蛋白的多个人T细胞中：(i)当存在10ng/mL包含或由SEQ ID NO:4中列出的氨基酸序列组成的肽时，至少约10％、15％、20％或25％的多个人T细胞产生IFN
‑
γ；(ii)当存在100ng/mL包含SEQ ID NO:4中列出的氨基酸序列或由其组成的肽时，至少约25％的多个人T细胞产生IFN
‑
γ；(iii)当存在10ng/mL包含SEQ ID NO:3中列出的氨基酸序列或由其组成的肽时，至少约10％、15％、20％或25％的多个人T细胞产生IFN
‑
γ；和/或(iii)当存在100ng/mL包含SEQ ID NO:3中列出的氨基酸序列或由其组成的肽时，至少
约50％或至少约75％的多个人T细胞产生IFN
‑
γ。36.根据权利要求1
‑
35中任一项所述的结合蛋白，其中，当结合蛋白由人T细胞表达时，当存在包含SEQ ID NO.:1的氨基酸7
‑
16或8
‑
16或由其组成的肽时，人T细胞基本上不产生IFN
‑
γ。37.根据权利要求27
‑
36中任一项所述的结合蛋白，其中：(i)Vα结构域包含根据Vα氨基酸序列的CDR1α、CDR2α和/或CDR3α氨基酸序列，Vα氨基酸序列是以下所示的任一个：SEQ ID NO.:76、62、64、68、70、72、74、78、80、82、84、502、512、522、532、542、552、562、572、582、592、602或612；和/或(ii)Vβ结构域包含根据Vβ氨基酸序列的CDR1β、CDR2β和/或CDR3β氨基酸序列Vβ氨基酸序列是以下所示中的任一个：SEQ ID NO.:75、61、63、65、67、69、71、73、77、79、81、83、501、511、521、531、541、511、531、541、551、561、571、581、591、601或611。38.根据权利要求27
‑
37任一项的结合蛋白，包含CDR1α、CDR2α、CDR3α和CDR1β、CDR2β和CDR3β氨基酸序列，根据以下所列的Vα和Vβ氨基酸序列：(i)分别为SEQ ID NO：76和75；(ii)分别为SEQ ID NO：62和61；(iii)分别为SEQ ID NO：64和63；(iv)分别为SEQ ID NO：66和65；(v)分别为SEQ ID NO：68和67；(vi)分别为SEQ ID NO：70和69；(vii)分别为SEQ ID NO：72和71；(viii)分别为SEQ ID NO：74和73；(ix)分别为SEQ ID NO：78和77；(x)分别为SEQ ID NO：80和79；(xi)分别为SEQ ID NO：82和81；(xii)分别为SEQ ID NO：84和83；(xiii)分别为SEQ ID NO：522和521；(xiv)分别为SEQ ID NO：532和531；(xv)分别为SEQ ID NO：542和541；(xvi)分别为SEQ ID NO：552和551；(xvii)分别为SEQ ID NO：562和561；(xviii)分别为SEQ ID NO：572和571；(xix)分别为SEQ ID NO：582和581；(xx)分别为SEQ ID NO：592和591；(xxi)分别为SEQ ID NO：602和601；(xxii)分别为SEQ ID NO：612和611；(xxiii)分别为SEQ ID NO：502和501；或(xxiv)分别为SEQ ID NO：512和511。39.根据权利要求27
‑
38中任一项所述的结合蛋白，包括：(i)SEQ ID NO:660、27、10、618、12、624、14、15、630、19、17、636、21、642、23、648、25、
654、29、666、31、672、33、678、35、684、495、505、515、525、535、545、555、565、575、585、595或605，或其变体中任一项所列的CDR3α氨基酸序列，其中，变体包含一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(ii)SEQ ID NO：659、26、9、617、11、623、13、629、18、16、635、20、641、22、647、24、653、26、659、28、665、30、671、32、677、498、508、518、528、538、548、558、568、578、588、598或608或其变体中任一项所示的CDR3β氨基酸序列，其中变体包括一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(iii)SEQ ID NO:656、614、620、626、632、638、644、650、656、662、668、674、680、493、503、513、523、533、543、553、563、573、583、或603，或其变体中任一项所示的CDR1α氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(iv)SEQ ID NO.:655、613、619、625、631、637、643、649、661、667、673、679、496、506、516、526、536、546、556、566、576、586、596、或606，或其变体中任一项所示的CDR1β氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(v)SEQ ID NO.:658、616、622、628、634、640、646、652、664、670、676、682、494、504、514、524、534、544、554、564、574、584、594、或604，或其变体中任一项所示的CDR2α氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代；和/或(vi)SEQ ID NO.:657、615、621、627、633、639、645、651、657、663、669、675、681、497、507、517、527、537、547、557、567、587、597、或607，或其变体中任一项所示的CDR2β氨基酸序列，其中变体包含一个、两个或三个氨基酸取代。40.根据权利要求27
‑
39中任一项所述的结合蛋白，其包含以下所列的CDR1α、CDR2α、CDR3α、CDR1β、CDR2β和CDR3β氨基酸序列：(i)SEQ ID NO：分别为656、658、660或27、655、657和659或26；(ii)SEQ ID NO：分别为614、616、618或10、613、615和617或9；(iii)SEQ ID NO：分别为620、622、624或12、619、621和629或13；(iv)SEQ ID NO：分别为626、628、630或14或15、625、627和629或13；(v)SEQ ID NO：分别为632、634、636或17或19、631、633和635或18或16；(vi)SEQ ID NO：分别为638、640、642或21或17、637、639和641或20或16；(vii)SEQ ID NO：分别为644、646、648或23、643、645和647或22；(viii)SEQ ID NO：分别为650、652、654或25、649、651和653或24；(ix)SEQ ID NO：分别为662、664、666或29、661、663和665或28；(x)SEQ ID NO：分别为668、670、672或31、667、669和671或30；(xi)SEQ ID NO：分别为674、676、678或33、673、675和677或32；(xii)SEQ ID NO：分别为680、682、684或35、679、681和683或34；(xii)SEQ ID NO：分别为493
‑
498；(xiv)SEQ ID NO：分别为503
‑
508；(xv)SEQ ID NO：分别为513
‑
518；(xvi)SEQ ID NO：分别为523
‑
528；(xvii)SEQ ID NO：分别为533
‑
538；(xviii)SEQ ID NO：分别为543
‑
548；

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：弗雷德哈钦森癌症研究中心，
类型：发明
国别省市：