一种脐带间充质干细胞体外培养方法技术

本发明专利技术公开了一种脐带间充质干细胞体外培养方法，其步骤如下：取脐带近胎段5cm；将脐带组织放入预先装有含量90U/ml青霉素和90U/ml链霉素的PBS液的蓝色广口瓶中；将组织剪切过程中滴加DMEM/F12培养液保持组织湿润；使用90U/ml青霉素和90U/ml链霉素洗涤3次，取用15ml的离心管将脐带组织离心5min备用；消化酶的制备；分别在消化后1h、2h、3h用含10％FBS、90U/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素的DMEM/F12培养基终止消化，得到脐带间充质干细胞；将分离的脐带间充质干细胞以1×10

An in vitro culture of umbilical cord mesenchymal stem cells

The invention discloses an umbilical cord mesenchymal stem cells in vitro culture method, comprising the following steps: umbilical cord in fetal 5cm; umbilical cord tissue in PBS solution with the content of 90U/ml and 90U/ml pre penicillin streptomycin blue jar; the organization in the process of shear dropping DMEM/F12 medium keeps moist; the use of 90U/ml penicillin and streptomycin 90U/ml washed 3 times with 15ml centrifugal tube will be the umbilical cord tissue centrifugal 5min standby; digestive enzyme preparation; respectively in 1H, 2h, 3h after digestion with DMEM/F12 containing 10%FBS, 90U/ml and 0.1mg/ml of penicillin and streptomycin medium termination of digestion, get the umbilical cord mesenchymal stem cells were separated; umbilical cord mesenchymal stem cells to 1 x 10

【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞体外培养方法
本专利技术属于干细胞培养
，更具体地说，尤其涉及一种脐带间充质干细胞体外培养方法。
技术介绍
干细胞即为起源细胞，是具有增殖和分化潜能的细胞，具有自我更新复制的能力(Self-renewing)，能够产生高度分化的功能细胞。简单来讲，它是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞，是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞。干细胞在形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。干细胞是自我复制还是分化功能细胞，主要由于细胞本身的状态和微环境因素所决定。包括调节细胞周期的各种周期素(Cyclin)和周期素依赖激酶(Cyclin－DependentKinase)、基因转录因子、影响细胞不对称分裂的细胞质因子。微环境因素，包括干细胞与周围细胞，干细胞与外基质以及干细胞与各种可溶性因子的相互作用。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonicstemcell，ES细胞)和成体干细胞(somaticstemcell)。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞(totipotent本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脐带间充质干细胞体外培养方法，其特征在于：该脐带间充质干细胞体外培养方法具体步骤如下：S1：无菌状态下取正常足月剖腹产的脐带近胎段5cm，将脐带组织均分为5等分；S2：将S1等分好的脐带组织放入预先装有含量90U/ml青霉素和90U/ml链霉素的PBS液的蓝色广口瓶中，在4℃下保存，并且在2小时内采用90U/ml青霉素和90U/ml链霉素进行洗涤剔除组织中残余的血渍和静脉组织；S3：将脐带组织剪成2mm×2mm×2mm大小的碎片状组织，在剪切过程中滴加DMEM/F12培养液保持组织湿润；S4：使用90U/ml青霉素和90U/ml链霉素洗涤3次，取用15ml的离心管将脐带组织离心5min备用...

【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞体外培养方法，其特征在于：该脐带间充质干细胞体外培养方法具体步骤如下：S1：无菌状态下取正常足月剖腹产的脐带近胎段5cm，将脐带组织均分为5等分；S2：将S1等分好的脐带组织放入预先装有含量90U/ml青霉素和90U/ml链霉素的PBS液的蓝色广口瓶中，在4℃下保存，并且在2小时内采用90U/ml青霉素和90U/ml链霉素进行洗涤剔除组织中残余的血渍和静脉组织；S3：将脐带组织剪成2mm×2mm×2mm大小的碎片状组织，在剪切过程中滴加DMEM/F12培养液保持组织湿润；S4：使用90U/ml青霉素和90U/ml链霉素洗涤3次，取用15ml的离心管将脐带组织离心5min备用；S5：消化酶的制备，配置Ⅱ型胶原酶0.1-0.3w/v％、胰酶0.1-0.3w/v％、EDTA0.03w/v％、透明质酸酶0.2w/v％和DNA酶0-0.2w/v％混合在灭过菌的培养基内，将S4中处理好的脐带组织混合在消化酶培养基内，37.5℃震荡消化；S6：分别...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡小东，赵翔，邱阳，王仁杰，宋彩霞，熊华强，
申请(专利权)人：重庆金时代生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50