一种分离制备牙髓干细胞的方法技术

本发明专利技术涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种分离制备牙髓干细胞的方法。本发明专利技术在牙髓干细胞制备过程中使用天然化合物氯化两面针碱作为抑菌剂，安全性高、稳定性好、抑菌效果明显，能够有效地减少细菌、真菌或支原体的感染，优越于以往的单纯用抗生素的方法。并且本发明专利技术在培养过程中，用透明质酸与明胶包被培养皿，增加了牙髓干细胞贴壁的数量，并且促进细胞生长，从而达到有效扩增的目的。实验表明，采用本发明专利技术提供的方法对牙髓间充质干细胞进行扩增获得的细胞量大、污染率低，且获得的牙髓干细胞表面标志物检测都符合标准，阳性表达的表面标志物≥95％，阴性表达的表面标志物≤2％。

【技术实现步骤摘要】
一种分离制备牙髓干细胞的方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种分离制备牙髓干细胞的方法。
技术介绍
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞，具有再生各种组织器官和完整个体的潜在功能。干细胞的来源有很多，包括骨髓、脐带、脐带血、牙齿、脂肪、皮肤及毛囊等。间充质干细胞(mesenchymalstemcell，MSC)是可形成多种细胞类型的多能干细胞。具有多向分化潜能、能支持造血和促进造血干细胞植入、调节免疫以及分离培养操作简便等特点，正日益受到人们的关注。随着间充质干细胞及其相关技术的日益成熟，许多难治愈的疾病，有了新的治疗方法。牙髓干细胞(DentalPulpStemCells，DPSCs)属于多功能的成体干细胞，是从牙髓组织中分离出的间充质干细胞。现在牙髓干细胞已经被证实具有多向分化能力，能够分化为骨、脂肪和血管内皮等组织细胞。现已有研究表明，牙髓干细胞能够用于牙本质、牙髓、牙体、牙冠的组织修复与再生，还可以用于颅骨、颌骨及面骨的损伤修复。牙髓干细胞在其他疾病方面的研究应用也有很多，例如：牙髓干细胞可以用于治疗脑血管意外损伤、脊髓本文档来自技高网...

【技术保护点】
氯化两面针碱在牙髓间充质干细胞分离制备中的应用。

【技术特征摘要】
1.氯化两面针碱在牙髓间充质干细胞分离制备中的应用。2.一种牙髓间充质干细胞培养液，其特征在于，由胎牛血清、转铁蛋白、双抗、氯化两面针碱和DMEM/F12培养基组成。3.根据权利要求2所述的培养液，其特征在于，由15％V/V胎牛血清、1～150μg/mL转铁蛋白、1％V/V双抗、0.5～10μg/mL氯化两面针碱。4.一种牙髓组织消毒剂，其特征在于，为含有0.5～10μg/mL氯化两面针碱的生理盐水。5.一种牙齿运输液，其特征在于，为含有双抗和0.5～10μg/mL氯化两面针碱的生理盐水。6.一种牙髓间充质干细胞的分离制备方法，其特征在于，牙髓组织清洗消毒后进行消化，所得细胞以权利要求2或3所述的培养液重悬，接种于经透明...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓光，鲍永利，王雪，李玉新，石晓川，李首一，
申请(专利权)人：吉林省太阳鸟再生医学工程有限责任公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22