一种Cas蛋白的用途及靶标核酸分子的检测方法和试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种Cas蛋白的用途及靶标核酸分子的检测方法和试剂盒，靶标核酸分子的检测方法包括向含有待检靶标核酸分子的反应体系中加入向导RNA、Cas12a、核酸探针，反应完成后对其进行检测。使用本发明专利技术的方法可快速检测样品中是否含有靶标核酸序列。通过与核酸扩增技术的结合，该检测方法的灵敏度可以得到大幅度提高。根据该方法的特点，将其命名为HOLMES(one HOur Low‑cost Multiplex Efficient Simple assay)，即一小时、低成本、多通道、高效、简单的分析方法,该方法可用于快速检测病原微生物、基因突变和特异靶标DNA等。

Use of a Cas protein and detection method and kit for target nucleic acid molecules

The present invention provides a method and kit for detection of Cas protein and the use of target nucleic acid molecules, detection method of target nucleic acid molecules including RNA, Cas12a, nucleic acid probe guide to the reaction system to be detected containing target nucleic acid molecules, after the reaction of the test. The method of the present invention can be used to quickly detect whether the target nucleic acid sequence is contained in the sample. By combining with nucleic acid amplification technology, the sensitivity of the detection method can be greatly improved. According to the characteristics of the method, named HOLMES (one HOur Low cost Multiplex Efficient Simple assay,) analysis method that an hour, low cost, multi-channel, efficient and simple, this method can be used for rapid detection of pathogenic microorganisms, gene mutation and specific target DNA.

【技术实现步骤摘要】
一种Cas蛋白的用途及靶标核酸分子的检测方法和试剂盒
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术涉及一种用于靶标核酸分子检测的方法。
技术介绍
特异性检测核酸分子(Nucleicaciddetection)方法具有重要的应用价值，例如病原体的检测，遗传病检测等。在病原体检测方面，由于每种病原体微生物都有其独一无二的特征核酸分子序列，因此可以开发出针对特定物种的核酸分子检测，也称为核酸诊断(NADs,nucleicaciddiagnostics)，在食品安全、环境微生物污染检测，人体病原菌感染等领域具有重要意义(O'ConnorandGlynn2010,Scheler,Glynnetal.2014)。另一个方面是对人或其他物种的单核苷酸多态性(SNPs,singlenucleotidepolymorphisms)的检测。在基因组水平上去理解遗传变异和生物学功能之间的关系为现代分子生物学提供了新视角，而其中SNPs对生物学的功能、进化和疾病等密切相关，因此SNPs的检测与分析技术的发展尤为重要。目前已建立了不少NADs的方法，主要是针对特异性DNA分子的检测，也有部分方法针对RNA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，向含有待检靶标核酸分子的体系中加入向导RNA、Cas蛋白、核酸探针、缓冲液，然后对核酸探针进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，向含有待检靶标核酸分子的体系中加入向导RNA、Cas蛋白、核酸探针、缓冲液，然后对核酸探针进行检测。2.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述Cas蛋白为Cas12a或者具有与Cas12a的旁路单链DNA切割活性类似的Cas蛋白；所述的Cas12a优选为FnCas12a、AsCas12a、LbCas12a、Lb5Cas12a、HkCas12a、OsCas12a、TsCas12a、BbCas12a、BoCas12a或Lb4Cas12a中一种；所述的Cas12a优选为LbCas12a。3.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，向导RNA是指引导Cas蛋白特异性结合靶标DNA的RNA。4.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述核酸探针为单链DNA；所述的单链DNA优选为荧光标记的单链DNA；所述的单链DNA优选为在5...

【专利技术属性】
技术研发人员：成秋香，
申请(专利权)人：上海吐露港生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31