复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用，该复合肝素生物抗凝涂层液具有抗组织增生、抗炎性反应等功能，对于人造血管、血管支架、血管补片等植入器械在人体内减少血栓形成，降低术后并发症，提高产品的使用寿命至关重要。

Compound heparin biological anticoagulant coating liquid and its preparation method and Application

The invention discloses a composite coating liquid and heparin anticoagulant biological preparation and application of the composite coating liquid has the anti heparin anticoagulant biological tissue hyperplasia, inflammatory reaction and other functions, for artificial blood vessels and vascular stents, vascular patch implants reduce thrombus formation in the human body, reduce the postoperative complications, improve the service life of the product is very important.

【技术实现步骤摘要】
复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用
本专利技术涉及一种复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用，属于生物医用材料

技术介绍
随着人们生活水平的提高，动脉粥样硬化，血管栓塞以及动脉瘤等心血管疾病对人类的健康造成了极大的威胁。因上述疾病等原因导致人体自身血管无法正常供血时，则需采用人工血管进行外科更换手术。人体内血管口径由2mm至30mm不等，在这其中，小口径(直径<6mm)极易发生内膜增生以及血栓形成，进而导致小口径血管远期通畅率低。目前，医院手术中使用的人造血管材料多为ePTFE，PU等材料，但这些材料本身不具备良好的抗凝血性能，需在材料表面进行抗凝血涂层。现有常用的抗凝血涂层有肝素涂层，其涂层方法各异，不同的方法所制备的肝素涂层材料性能也有所差异。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用。为实现上述目的，本专利技术所提供的复合肝素生物抗凝涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素-肝素。本专利技术的复合肝素生物抗凝涂层液中起效的部分为交联状态的联氨基姜黄素-肝素。所述联氨基姜黄素通过其上的氨基与肝素交联。本专利技术还提供了一种上述复合肝素生物抗凝涂层液的制备方法，步骤如下：将联氨基姜黄素溶解于乙醇溶液中，配置成姜黄素醇溶液，向姜黄素醇溶液中加入MES缓冲液，再加入肝素，然后再加入EDC和NHS交联剂，搅拌1～2h，使联氨基姜黄素中的氨基与肝素充分反应，将反应完成的溶液放入透析袋透析24～72h，透析完成后，得到复合肝素生物抗凝涂层液。上述方案中，所述联氨基姜黄素和肝素的添加重量比为1～10:40。该比例是联安姜黄素和肝素的较佳反应比值，本专利技术中的有效成分为交联状态的联氨基姜黄素-肝素，所以只要能够生成它的联氨基姜黄素和肝素任意配比添加量都是可以使用的。需要说明的是，上述涂层液在单独作为涂层液使用时效果并不理想，它需要和生物活性蛋白联用发挥功效。如胶原蛋白、丝素蛋白、粘连蛋白。在研究过程中，专利技术人发现在一定的配比下，联氨基姜黄素-肝素和丝素蛋白联用有较好的效果。因此，本专利技术还提供了一种联氨基姜黄素-肝素及丝素蛋白的生物抗凝涂层液，所述生物抗凝涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素-肝素，还包括丝素蛋白；所述生物抗凝涂层液中所述联氨基姜黄素-肝素在的浓度为0.5～5％wt，所述丝素蛋白的浓度为5～15％wt，且联氨基姜黄素-肝素与丝素蛋白的浓度比值为1:1～10。本专利技术利用姜黄素具有的抗组织增生、抗炎症反应等特性，将它和肝素结合在一起，以克服植入性医疗器械(如人造血管)在植入人体之后易发生的问题(如凝血作用会导致血小板聚集引起血栓导致血管再次狭窄，而组织过度增生和炎性反应也会引起排异反应而导致血管狭窄，最终使人造血管等植入器械的生物相容性变差而植入失败)。本专利技术的有益效果：现代药理研究表明姜黄素类成分具有抗凝血、抗组织增生、抗炎性反应等多种药理作用，本专利技术将姜黄素与肝素两者连用不仅可以增强肝素涂层的抗凝血功能，还能起到单纯用肝素或蛋白等涂层所无法达到的抗组织增生、抗炎性反应等功能，对于人造血管、血管支架、血管补片等植入器械在人体内减少血栓形成，降低术后并发症，提高产品的使用寿命至关重要。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细描述。需要说明的是，下述例子中使用的人造血管(ePTFE)在涂层之前均经过前处理，以提高其对涂层的结合力，使生物涂层能够稳定且有效的发挥抗凝血等功能。人造血管(ePTFE)基材，前处理过程如下：第一层将ePTFE人造血管浸没于异丙醇(IPA)5～10mins，然后用镊子取出再浸泡于4％聚乙烯亚胺(PEI)和IPA混合液(体积比PEI:IPA＝1:1)15～30mins后，取出浸泡的人造血管，用去离子水浸泡冲洗人造血管。待冲洗完后，将人造血管放置于0.05％戊二醛溶液中15～20mins进行交联，待反应完成后将人造血管再次浸泡在0.5％PEI溶液中15～30mins，用去离子水对构造后的人造血管进行浸泡冲洗。冲洗完成后，将人造血管浸泡在氰基硼氢化钠溶液中反应15～30mins，反应完成后用去离子水浸泡冲洗。第二层将上述处理后的人造血管浸泡于0.05％戊二醛溶液中进行交联，待反应完成后将人造血管再次浸泡在0.5％PEI溶液中反应，用去离子水对构造后的人造血管进行浸泡冲洗。冲洗完成后，将人造血管浸泡在氰基硼氢化钠溶液中反应反应完成后用去离子水浸泡冲洗。第三层将0.15g硫酸葡聚糖和100gNaCl溶解于1L去离子水中，将上述第二层处理后的人造血管浸泡于混合液中，在60℃反应1～2h，待反应完成后，用去离子水对人造血管反复冲洗。制备中间电荷层。第四层将第三层处理后的人造血管浸泡于0.3％PEI溶液中0.5～1h，用50g/L的氯化钠溶液对人造血管浸泡冲洗，再用去离子水浸泡冲洗，得到人造血管(ePTFE)基材。实施例1联氨基姜黄素-肝素一种复合肝素生物抗凝涂层液，涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素-肝素。该复合肝素生物抗凝涂层液的制备方法，步骤如下：将联氨基姜黄素溶解于乙醇溶液中，配置成浓度为5mg/mL的姜黄素醇溶液，向姜黄素醇溶液中加入MES缓冲液使姜黄素浓度降低为2.5mg/mL，向300mL姜黄素溶液中加入10g肝素后，再加入4gEDC和4gNHS，搅拌1～2h，使联氨基姜黄素中的氨基与肝素充分反应，将反应完成的溶液放入透析袋透析24～72h，透析完成后，得到复合肝素生物抗凝涂层液。可以对该涂层液进行冷冻干燥制得复合肝素生物抗凝涂层冻干粉，长期保存。实施例2联氨基姜黄素-肝素与丝素蛋白涂层联氨基姜黄素-肝素与丝素蛋白混合的生物抗凝涂层人造血管制备方法，步骤如下：1)将实施例1制得的冻干粉溶于丝素蛋白大分子溶液，得到的混合涂层溶液中联氨基姜黄素-肝素浓度为1％wt，丝素蛋白浓度为10％wt，为联氨基姜黄素-肝素及丝素蛋白的生物抗凝涂层液。2)将人造血管(ePTFE)基材浸没在步骤1)的生物抗凝涂层液中10～30mins，随后取出置于通风处，待干燥完全后，浸泡在30～75％甲醇溶液中2～4h，浸泡完成后放置于通风处干燥。3)重复步骤2)两次，给人造血管(ePTFE)涂第二、三层涂层。其中，步骤1)的丝素蛋白制备方法：将20～30g生丝放入10～12L含有Na2CO3(2.12g/L)溶液中沸水煮20～30mins，随后用去离子水反复冲洗煮好后的脱胶丝以去除残余丝胶。将洗净后的蚕丝蛋白纤维平铺于通风处干燥。称取15～25g干燥蚕丝纤维溶于60℃100～150mL的LiBr溶液中(9.3M)，待溶解完成后，用透析袋对蚕丝蛋白溶液进行偷袭36～72h，透析完成后对溶液进行离心去除杂质，得到丝素蛋白大分子溶液。实施例3联氨基姜黄素-肝素与丝素蛋白涂层本实施例和实施例2基本相同，区别在于，联氨基姜黄素-肝素及丝素蛋白的生物抗凝涂层液中联氨基姜黄素-肝素浓度为0.7％wt，丝素蛋白浓度为5.6％wt。实施例4联氨基姜黄素-肝素与丝素蛋白涂层本实施例和实施例2基本相同，区别在于，联氨基姜黄素-肝素及丝素蛋白的生物抗凝涂层液中联氨基姜黄素-肝素浓度为5％wt，丝素蛋白浓度为15％wt。实施例5肝素/聚-L-赖氨酸涂层肝素/聚-L-赖氨酸涂层人造血管本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合肝素生物抗凝涂层液，其特征在于：所述涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素‑肝素。

【技术特征摘要】
1.一种复合肝素生物抗凝涂层液，其特征在于：所述涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素-肝素。2.根据权利要求1所述的复合肝素生物抗凝涂层液，其特征在于：所述联氨基姜黄素通过其上的氨基与肝素交联。3.一种权利要求1所述复合肝素生物抗凝涂层液的制备方法，其特征在于，步骤如下：将联氨基姜黄素溶解于乙醇溶液中，配置成姜黄素醇溶液，向姜黄素醇溶液中加入MES缓冲液，再加入肝素，然后再加入EDC和NHS交联剂，搅拌1～2h，使联氨基姜黄素中的氨基与肝素充分反应，将反应完成的溶液放入透析袋透析24～72h，透析完成后，得到复合肝素生物抗凝涂层液。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：严拓，欧阳晨曦，刘雅文，刘思诗，刘园，
申请(专利权)人：武汉杨森生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42