含有抗血栓形成且不出血肝素的组合物及其制备方法和治疗应用技术

具有抗血栓形成和基本上不出血活性的肝素组合物。本发明专利技术的目的是消除与肝素关联的出血危险，与此同时保持其主要特性。为此，本发明专利技术组合物（Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３）由被鱼精蛋白体外中和肝素得到的肝素成分组成。本发明专利技术还涉及制备这些组合物的方法。这些组合物适用于制备药物。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
含有抗血栓形成且不出血肝素的组合物及其制备方法和治疗应用本专利技术涉及含有肝素的组合物及其制备方法和治疗应用。更特别地，本专利技术涉及由鱼精蛋白中和的含肝素组合物，该组合物具有抗血栓形成活性但却明显降低了出血和抗凝活性。人们已知道和使用肝素数十年了。肝素被用于制备具有抗血栓形成和/或抗凝活性的药物；这种活性可特别用作静脉和动脉血栓形成的预防性和治疗性处理，或者用作预防体外循环中的凝固活性。人们在数十年前就知道如何制备低分子量肝素，该肝素已经具备抗血栓形成活性，但其抗凝活性却降低了。尽管如此，对于不分级的肝素或低分子量肝素，出血危险仍然是基于肝素治疗方法的主要并发问题。由此极大地限制了特别对于具有出血素因的患者、患有十二指肠溃疡或胃溃疡的病人或最近进行过外科手术的患者使用肝素，在这些患者中借助肝素进行抗血栓形成治疗可能会引起出血。因此，当考虑到与这种永恒的出血危险有关的可观副作用时，肝素的优越性能，即抗血栓形成活性或抗凝活性，不能被正确地利用。当利用肝素治疗过程中出现出血时，该治疗可使用能产生体内肝素中和效果的硫酸鱼精蛋白。尽管鱼精蛋白如此使用过多年，但鱼精蛋白中和肝素的机理却不十分清楚。相对近期的研究简单地表明：低分子量肝素可比不分级的肝素中和至较低的程度(“In Vitro Prota分钟e Neutralization Profile 0f HeparineDiffering in Source and Molecular Weight”，SE分钟ARS INTHROMBOSIS AND IN HEMOSTASIS，vol.15，No.4，1989)。因此，本专利技术所要解决的问题之一是降低上述可观的出血危险，该问题限制了肝素的治疗用途。更确切地，本专利技术的目的是尽可能地消除与肝素有关的出血危险，与此同时能够保持其主要的性能，特别是其抗血栓形成活性。由此，本专利技术的目的是提供具有非常优越的药理性能特别是抗血栓形-->成性能的肝素组合物，该组合物与目前使用的肝素组合物基本相同，而并不表现出可观出血危险的主要缺陷。本专利技术的另一目的是提供制备这类组合物的方法，该方法操作简单且便宜，而且可发展该组合物的治疗应用。本专利技术还涉及这些组合物的治疗应用。这些目的可通过使用本专利技术的肝素组合物达到，所述组合物具有抗血栓形成活性且基本上没有出血活性。这些组合物的特征在于基本上由通过鱼精蛋白体外中和肝素得到的肝素成分组成。所述鱼精蛋白中和的肝素成分应当理解为由天然或已经分级的肝素或由合成肝素衍生的任何成分，该肝素的出血能力已被鱼精蛋白或任何具有相似的降低出血能力的类似物或其等同物的作用中和。本专利技术组合物优越地由通过利用鱼精蛋白体外中和不分级的肝素或低分子量肝素得到的肝素成分组成。根据本专利技术的一个实施方案，组合物是由其中25％为分子量小于2.5kDa和40％为分子量大于20kDa的肝素成分组成。根据本专利技术的另一实施方案，组合物只是由分子量小于2.5kDa的肝素成分组成。在另外的实施方案中，肝素成分的分子量光谱依赖于所使用的鱼精蛋白中和的模式。本专利技术组合物基本上不含鱼精蛋白。本专利技术还提供了制备上述组合物的方法，其特征在于包括借助鱼精蛋白体外中和肝素的步骤。本专利技术人惊奇地发现：肝素的出血活性可在体外被中和，特别是可使用鱼精蛋白来中和，而且与此同时能够保持其抗血栓形成性能。更确切地，本专利技术的方法包括在溶液中，使肝素与特别是以鱼精蛋白盐形式存在的鱼精蛋白以不同的肝素/鱼精蛋白比例进行反应。根据本专利技术的一个优选实施方案，将肝素溶液与鱼精蛋白盐溶液优选在室温下混合，再将所得混合物进行离心并收集上清液。根据本专利技术，术语肝素溶液是指天然或已分级的肝素或合成肝素的溶液。-->鱼精蛋白盐优越地由硫酸鱼精蛋白组成。根据本专利技术，可使用任何具有相似的中和肝素能力并因此降低出血能力的鱼精蛋白类似物或等同物。然后可将上清液冻干。可使用能够基本消除与肝素有关的出血危险的不同比例待处理肝素和鱼精蛋白。该方法包括利用鱼精蛋白或等同物中和肝素的步骤，优选的肝素/鱼精蛋白比例为2/1至1/2。根据该方法的一个实施方案，肝素/鱼精蛋白比例约为1/1。在此情况下，得到了含有其中至少25％的分子量小于2.5kDa和至少40％的分子量大于20kDa的成分的肝素组合物。根据本专利技术的另一实施方案，肝素/鱼精蛋白比例约为1/2。在此情况下，得到了基本上含有分子量小于2.5kDa的成分的肝素组合物。根据本专利技术的方法，可得到不含鱼精蛋白的肝素组合物。本专利技术肝素组合物的药理研究出人意料地揭示：该组合物基本上没有出血活性，而且保持其抗血栓形成性能。药理研究还出人意料地揭示：根据本专利技术鱼精蛋白中和得到的肝素成分具有抗血栓形成活性，该活性随着给药剂量的增加而增强，而不会同时增加其出血或抗凝活性。另外的实验步骤可以表明：本专利技术组合物能够比不分级的肝素更有效地抑制人体白细胞弹性蛋白酶的水解活性。根据本专利技术，抑制出血危险可使得在治疗某些支气管肺病中设想通过非肠道路径或通过作为气溶胶的支气管肺路径给药成为可能；上述支气管肺病可能涉及白细胞弹性蛋白酶过高，如急性呼吸窘迫综合症、胰纤维性囊肿病和妨碍性慢性支气管肺病。本专利技术稳定且无毒的肝素组合物可用于制备用在各种治疗应用中的药物。这些应用为肝素及其标准衍生物的应用场合，包括根据患者存在的出血危险禁忌肝素的情形。所述组合物可特别地用于制备治疗和预防静脉或动脉血栓形成或预防体外循环中凝固作用的药物。因此本专利技术还涉及包含与可药用载体组合的治疗有效量的上述本专利技术肝素组合物的药物组合物。-->它们可以是如抗血栓形成药物组合物或者是用于抑制人白细胞弹性蛋白酶水解活性的组合物。这些组合物的肝素成分可以由标准方法得到的可药用盐形式存在。本专利技术药物组合物优越地为特别是通过非肠道给药的注射制剂。对于其它应用，如抑制白细胞弹性蛋白酶，可优越地提供适用于支气管肺给药的剂型。本专利技术的其它特征和优点将通过阅读下文给出的非限定性实施例和附图而变得明显，其中：图1为不分级的肝素、低分子量肝素和本专利技术肝素组合物中不出血肝素(S1、S2、S3)的出血活性比较图；图2为不分级的肝素、低分子量肝素和本专利技术肝素组合物(S1、S2、S3)的抗血栓形成活性比较图。实施例使用的产品：标准肝素(LEO)、硫酸鱼精蛋白(CHOAY)和低分子量肝素(“依诺肝素”，商品名为“Lovenox”(PHARMUKA))。—实施例1：制备上清液S1制备14.4ml滴定度为72,000IU(480mg)的标准肝素溶液和48ml滴定度为48,000HAU的硫酸鱼精蛋白溶液。将这些溶液在室温下一起混合。肝素/鱼精蛋白的比例为1∶1，也就是说，用1mg硫酸鱼精蛋白中和lmg肝素。将所得混合物离心10分钟，回收上清液并冻干。—实施例2：制备上清液S2根据实施例1中描述的方法进行，使用9ml标准肝素溶液(即45,000IU，300mg)和60ml硫酸鱼精蛋白(即60,000HAU)。肝素/鱼精蛋白的比例为1/2，也就是说，用2mg硫酸鱼精蛋白中和1mg肝素。-->—实施例3：制备上清液S3根据实施例1中描述的方法进行，使用4ml低分子量肝素溶液(“依诺肝素”(Lovenox))(即400mg)和40本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有抗血栓形成活性且基本上没有出血活性的肝素组合物，其特征在于该组合物由通过鱼精蛋白体外中和肝素得到的肝素成分组成。

【技术特征摘要】
FR 1994-8-29 94/103801.具有抗血栓形成活性且基本上没有出血活性的肝素组合物，其特征在于该组合物由通过鱼精蛋白体外中和肝素得到的肝素成分组成。2.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物由通过鱼精蛋白体外中和不分级的肝素得到的肝素成分组成。3.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物由通过鱼精蛋白体外中和低分子量肝素得到的肝素成分组成。4.根据上述权利要求之一的组合物，其特征在于该组合物由其中至少25％的分子量小于2.5kDa的肝素成分组成。5.根据权利要求4的组合物，其特征在于该组合物由其中至少40％分子量大于20kDa的肝素成分组成。6.根据权利要求1至4之一的组合物，其特征在于该组合物由分子量小于2.5kDa的肝素成分组成。7.根据权利要求5的组合物，其特征在于该组合物由具有如表I给出的分子量分布的肝素成分组成。8.根据权利要求7的组合物，其特征在于该组合物由如表II给出的分子量分布的肝素成分组成。9.根据上述权利要求中任意一项的组合物，其特征在于该组合物基本上不含鱼精蛋白。10.根据权利要求1至9中任意一项的组合物，其特征在于该组合物具有抑制人白细胞弹性蛋白酶水解活性的性能。11.制备权利要求1至1...

【专利技术属性】
技术研发人员：CR多里米普奇，FEPM萨顿布雷，
申请(专利权)人：德比奥法姆股份有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]