The invention provides a carboxylesterase metal ion complexes, first make a concentration of phosphate buffer solution 5~50 mM, pH range is 6.8~8.5, the carboxylesterase freeze-dried powder into the solution, the concentration of carboxylesterase 0.1~0.6 mg/mL, in the solution of adding metal ions, making the final concentration the metal ion is 0.25~1.5 M, mixed and incubated for 12 36 hours, the solution of centrifugal after incubation, the precipitate was freeze-dried to obtain carboxylesterase metal ion complexes. The invention also provides a method for using the carboxylesterase metal complex, hydrolysis of pyrethroid pesticides, hydrolysis of carboxylesterase metal ion complexes used in pyrethroid, single hydrolysate m-phenoxybenzaldehyde. The method can be widely used for qualitative and quantitative detection of pyrethroid pesticide residues of type I and II type.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化工领域,涉及一种拟除虫菊酯类农药的水解方法,具体来说是一种羧酸酯酶-金属离子复合物及其水解拟除虫菊酯类农药的方法。
技术介绍
拟除虫菊酯类农药是人工合成的一类杀虫剂,其广谱性的杀虫作用和对哺乳动物较低的毒性,但一定的残留剂量会导致接触生物体的中枢神经系统严重损害。因此,新型拟除虫菊酯类农药残留快速检测方法的研究受到了广泛关注。目前,针对拟除虫菊酯类农药残留速测通常依赖酯键水解,建立针对水解产物中的氰基或间苯氧基苯甲醛及其衍生物的检测方法。但是,严苛的水解条件(强碱性试剂)和水解产物的不确定性,在一定程度上限制了拟除虫菊酯类农药速测的应用。有报道羧酸酯酶能够专一地水解拟除虫菊酯农药,并且水解条件温和、操作简便,在酶法农药快检领域显示出巨大的潜力和优越性。但是,通过湿法固定的羧酸酯酶表观活性较低,水解产物得率偏低,限制了基于酶水解速测拟除虫菊酯农药方法的灵敏度。
技术实现思路
针对现有技术中的上述技术问题,本专利技术提供了一种羧酸酯酶-金属离子复合物及其水解拟除虫菊酯类农药的方法,所述的这种羧酸酯酶-金属离子复合物及其水解拟除虫菊酯类农药的方法要解决现有 ...
【技术保护点】
一种羧酸酯酶‑金属离子复合物,其特征在于按照如下方法制备:先配制浓度为5~50 mM的磷酸缓冲溶液,pH值范围为6.8~8.5,取羧酸酯酶冻干粉加入上述溶液中,使得羧酸酯酶的浓度为0.1~0.6 mg/mL,在上述溶液中加入金属离子,使其金属离子的终浓度为0.25~1.5 M,混合均匀后置于20~35℃恒温箱中孵育12‑36小时,将孵育后的溶液离心,将沉淀物进行冷冻干燥即得羧酸酯酶‑金属离子复合物。
【技术特征摘要】
1.一种羧酸酯酶-金属离子复合物,其特征在于按照如下方法制备:先配制浓度为5~50mM的磷酸缓冲溶液,pH值范围为6.8~8.5,取羧酸酯酶冻干粉加入上述溶液中,使得羧酸酯酶的浓度为0.1~0.6mg/mL,在上述溶液中加入金属离子,使其金属离子的终浓度为0.25~1.5M,混合均匀后置于20~35℃恒温箱中孵育12-36小时,将孵育后的溶液离心,将沉淀物进行冷冻干燥即得羧酸酯酶-金属离子复合物。2.根据权利要求1所述的一种羧酸酯酶-金属离子复合物,其特征在于:所述的金属离子为钙离子、锌离子或者铜离子中的任意一种。3.一种采用羧酸酯酶-金属离子复合物水解拟除虫菊酯类农药的方法,其特征在于包括如下步骤:1)一个制备羧酸酯酶-金属离子复合物的步骤,先配制浓度为5~50mM的磷酸缓冲溶液,pH值范围为6.8~8.5,取羧...
【专利技术属性】
技术研发人员:叶泰,徐斐,彭开敏,刘安,袁敏,曹慧,于劲松,
申请(专利权)人:上海理工大学,
类型:发明
国别省市:上海;31
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