一种fruC基因过表达的重组梭菌、其构建方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种fruC基因过表达的重组梭菌、其构建方法及应用，属于生物化工技术领域。所述fruC基因的序列为SEQ ID NO.1，fruC基因编码的蛋白质的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。所述梭菌的构建方法包括(1)fruC基因过表达重组质粒构建；(2)过表达重组质粒构建的甲基化；(3)fruC基因过表达重组菌株构建；(4)重组菌株丁醇发酵性能检测。本发明专利技术将fruC基因在C.acetobutylicum ATCC 824中过表达能显著提高丁醇发酵果糖、果糖与葡萄糖混合糖以及菊芋水解液利用率及丁醇产量。

Recombinant Clostridium with over expression of fruC gene, construction method and application thereof

The invention discloses a recombinant Clostridium with over expression of fruC gene, its construction method and application, which belongs to the field of biochemical technology. The sequence of fruC gene of SEQ ID NO.1 protein amino acid sequence of fruC gene encoding the SEQ ID NO.2. Including the construction method of the Clostridium (1) overexpression of fruC gene recombinant plasmid; (2) the over expression of methylation of the recombinant plasmid; (3) overexpression of fruC gene recombinant strain; (4) the recombinant strain detection of butanol fermentation performance. The expression of fruC gene can significantly improve the butanol fermentation of fructose, fructose and glucose mixed with sugar and the hydrolysate of Jerusalem artichoke utilization and butanol production in C.acetobutylicum ATCC in 824.

【技术实现步骤摘要】
一种fruC基因过表达的重组梭菌、其构建方法及应用
本专利技术涉及一种提高丁醇产量的重组梭菌、构建方法与应用，尤其是涉及一种可用于生产丁醇的重组梭菌、其构建方法及应用。
技术介绍
人类社会的发展与能源的利用密切相关。在远古时期，人类开始使用火，从而进入文明时代；第一次工业革命又将人类带入以煤炭为能源的时代；第二次工业革命后，人类开始利用石油等自然。而石油、煤炭等都属于不可再生能源，储量有限而且污染严重。能源问题已经属于迫切需要解决的问题。新型绿色环保、可持续发展的能源，已经成为世界各国共同的需求。其中一种理想的可再生资源是生物质资源，生物质资源具有年产量大，可再生，绿色环保等优点。利用生物质资源进行生物燃料的生产则是一种新型的解决能源危机的方法。生物燃料主要包括生物乙醇，生物丁醇。其中，生物丁醇比生物乙醇具有更多的优点，如能量密度高；可以与汽油任意比例混合；而且运输方便，不需对现有的运输管道做技术修改等。实际上，生物丁醇具有数十亿美元的市场，而且全世界对丁醇的需求以3％的比例增长，预计到2020年具有接近百亿美元的市场。利用传统的化工合成丁醇需要以石油为原料，投资高，设备技术复杂。因本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于构建高产丁醇重组菌的fruC基因片段，其特征在于，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于构建高产丁醇重组菌的fruC基因片段，其特征在于，具有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。2.一种如权利要求1所述的fruC基因编码的氨基酸序列，其特征在于，具有如SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。3.一种如权利要求1所述fruC基因片段相关的生物材料，其特征在于，为下述一种：(1)含有权利要求1所述的fruC基因的表达盒；(2)含有权利要求1所述的fruC基因的重组载体或含有(1)所述表达盒的重组载体；(3)含有(2)所述重组载体的重组菌。4.一种高效生产丁醇的重组梭菌，其特征在于，含有核苷酸序列为SEQIDNO.1的fruC基因，且所述fruC基因在梭菌内过表达。5.根据权利要求4所述的高效生产丁醇的重组梭菌，其特征在于，还含有核苷酸序列为SEQIDNO.3的硫解酶的启动子。6.根据权利要求4所述的重组梭菌的构建方法，其特征在于，所述梭菌选自丙酮丁醇梭菌(Clostridiumacetobutylicum)，拜氏梭菌(Clostridiumbeijerinckii)，糖乙酸多丁醇梭菌(Clostridiumsaccharoperbutylacetonicum)及糖丁酸梭菌(Clostridiumsaccharobutylicum)中的野生型菌株，或者为经过诱变或遗传改造后的菌株。7.如权利要求6所述的重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽杰，徐飞，薛闯，白凤武，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21