通过与免疫测定法偶联的核酸扩增的固体支持物上的分析物检测制造技术

本发明专利技术的实施方案提供了一种用于检测来源于样品中的至少一种分析物的方法，所述方法包括步骤：a)使所述样品沉积在固体支持物的表面上；b)将至少一部分所述固体支持物转移至适于针对关注的一种或多种分析物进行特异性结合测定的容器；c)任选洗涤所述部分；d)向所述容器中加入用于各关注分析物的单个特异性结合配偶体，所述结合配偶体经寡核苷酸序列标记；e)将所述部分与核酸扩增试剂混合；f)使所述寡核苷酸序列扩增；和g)检测扩增的核酸。本发明专利技术亦提供用于使用所述方法检测来源于样品中的至少一种分析物的试剂盒。

Nucleic acid amplification by means of nucleic acid amplification coupled with immunoassay for detection of solid support

Embodiments of the present invention provides a method for at least one analyte for detecting sources in the sample, the method includes the steps of: a) the sample is deposited on the surface of solid support; b) at least a portion of the solid support for transfer to suitable for one or more pay attention to the analyte specific binding was determined by the vessel; c) optionally washing the part; d) adding to the container for a single specific attention to each analyte binding partner, the binding partner by oligonucleotide sequence tags; E) the portion with nucleic acid amplification reagents; F) the oligonucleotide sequences were amplified; and G) amplified nucleic acid detection. The present invention also provides a kit for detecting at least one analyte from a sample using the method.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过与免疫测定法偶联的核酸扩增的固体支持物上的分析物检测专利
本专利技术涉及用于检测来源于样品的至少一种分析物的方法。更具体而言，本专利技术涉及用于固体支持物上的分析物的超灵敏检测法，以及用于进行所述方法的试剂盒。专利技术背景免疫-聚合酶链式反应(iPCR)为用于蛋白质及其他抗原的超灵敏分析的有前景的技术。其将已充分建立的ELISA方法与PCR的信号放大能力组合在一起。与常规ELISA相比，iPCR得到在灵敏性上约1000倍至10,000倍的增加(Adler,M.、Wacker,R.&NiemeyerC.M.用于蛋白质的常规超灵敏定量的实时免疫PCR测定法(Areal-timeimmune-PCRassayforroutineultrasensitivequantificationofproteins).生物化学和生物物理学研究通讯(BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications)(2003)308，240-250。)，并显示了高达六个数量级的非常宽的线性动态范围。因此，使用免疫聚合酶链式反应(iPCR)和实时iPCR测定法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测来源于样品中的至少一种分析物的方法，所述方法包括步骤：a)使所述样品沉积在固体支持物的表面上；b)将至少一部分所述固体支持物转移至适于针对关注的一种或多种分析物进行特异性结合测定的容器；c)任选洗涤所述部分；d)向所述容器中加入用于各关注分析物的单个特异性结合配偶体，所述结合配偶体用寡核苷酸序列标记；e)将所述部分与核酸扩增试剂混合；f)使所述寡核苷酸序列扩增；和g)检测扩增的核酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.18 US 62/0935301.一种用于检测来源于样品中的至少一种分析物的方法，所述方法包括步骤：a)使所述样品沉积在固体支持物的表面上；b)将至少一部分所述固体支持物转移至适于针对关注的一种或多种分析物进行特异性结合测定的容器；c)任选洗涤所述部分；d)向所述容器中加入用于各关注分析物的单个特异性结合配偶体，所述结合配偶体用寡核苷酸序列标记；e)将所述部分与核酸扩增试剂混合；f)使所述寡核苷酸序列扩增；和g)检测扩增的核酸。2.权利要求1的方法，其进一步包括：基于扩增核酸的数量来定量所述关注的分析物。3.权利要求1的方法，其中所述固体支持物包括：纤维素基纸、机织或非机织纤维材料(包括人造的或天然存在的聚合纤维，例如藻酸盐)、矿物纤维基材料(例如玻璃纤维材料)或者经表面处理的固体材料，例如化学处理或机械处理的材料，包括激光蚀刻表面，均提供粗糙度足以支持的表面微粗糙度，均任选经稳定试剂或稳定试剂混合物进行化学处理。4.权利要求1的方法，其中所述固体支持物表面为经化学品浸透的，例如弱碱、螯合剂、阴离子表面活性剂及任选抗氧化剂。5.权利要求1的方法，其中所述固体支持物表面为经离液剂浸透的。6.权利要求1的方法，其中所述固体支持物为经表面活性剂处理的纤维素基固体支持物。7.权利要求1的方法，其中在存在多价螯合剂的情况下进行所述添加和混合步骤，以抵消酶活性或特异性结合配偶体结合的表面活性剂抑制。8.权利要求7的方法，其中所述多价螯合剂为环糊精。9.权利要求1的方法，其中所述固体支持物包被有特异性结合部分或者表面电荷改性剂。10....

【专利技术属性】
技术研发人员：KL拉梅顿，JK霍顿，PJ塔特内尔，
申请(专利权)人：通用电气医疗集团英国有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB