一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法技术方案

本发明专利技术涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法。不需要打开细胞反应器就能够对细胞进行收集，并且能够减小对细胞和滤膜的伤害，从而提高细胞的培养和收集效率。一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，包括：在细胞扩增完成后，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器，利用重力和离心力对扩增后的细胞进行扰动，以使得所述扩增后的细胞分散和脱落；将脱落后的细胞在营养液的驱动下排出得以收集。本发明专利技术用于细胞的收集。

Cell collection method for closed cell amplification system

The invention relates to the technical field of cell culture, in particular to a cell collection method of a closed cell amplification system. Without opening the cell reactor, the cells can be collected, and the damage to cells and membranes can be reduced, thereby improving cell culture and collection efficiency. Methods collect a closed cell amplification system including: cell after cell expansion, change of nutrient solution cavity and / or cell growth chamber pressure in the nutrient solution cavity and the pressure difference between the cell growth chamber, through the pressure of the amplified cells are disturbed and / or rotation, cell reaction is the amplified cell disturbance by gravity and centrifugal force, so that the amplified cells dispersed and exfoliated; will fall off after the cells in nutrient solution driven out to collect. The present invention is used for cell collection.

【技术实现步骤摘要】
一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法。
技术介绍
细胞扩增培养是将细胞在适宜的条件下进行养育，以达到细胞数倍增的一种生物工程方式。在现有技术中，通过滤膜将细胞反应器分隔为营养液腔和细胞生长腔，将细胞接种于细胞生长腔中进行扩增培养已成为细胞培养的主流，由于滤膜的作用，营养液腔内的营养液可不断渗透至细胞生长腔为细胞提供营养，进而使得营养液腔内的营养液可与细胞生长腔内的细胞代谢物进行交换，模拟体内细胞代谢环境，可保持细胞生存环境的稳定与优化。但是，采用该细胞反应器对细胞进行扩增培养完成之后，通常采用机械或者酶解的方法对细胞进行收集。比如，可将细胞反应器打开，将细胞从细胞生长腔的腔壁上刮除，或者，在细胞生长腔内加入消化酶对细胞进行消化，以对细胞进行收集。在此过程中，机械刮除和酶解的方式都会对细胞和滤膜造成不同程度的伤害，达不到细胞培养和收集的最好效果。
技术实现思路
本专利技术的实施例提供一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法。不需要打开细胞反应器就能够对细胞进行收集，并且能够减小对细胞和滤膜的伤害，从而提高细胞的培养和收集效率。为达到上述目的，本专利技术的实施例采用如下技术方案：本专利技术实施例提供一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，包括：在细胞扩增完成后，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器，利用重力和离心力对扩增后的细胞进行扰动，以使得所述扩增后的细胞分散和脱落；将脱落后的细胞在营养液的驱动下排出得以收集。可选的，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差具体包括：将营养液输送泵以脉冲的形式输送营养液，以使得营养液腔和细胞生长腔之间的压差正负交替变化。可选的，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差具体包括：交替向压力扩展箱内充入气体和排出气体，以使得营养液腔和细胞生长腔之间的压差正负交替变化。可选的，当所述细胞为贴壁细胞时，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器，对扩增后的细胞进行扰动，所述方法还包括：对所述扩增后的细胞进行消化。可选的，所述压差为20-80kPa。可选的，所述压差正负交替变化的频度为2-5次/分钟。可选的，转动细胞反应器具体包括：控制所述细胞反应器的两端绕所述细胞反应器的中心在竖直平面内往复转动。可选的，所述往复转动的角度大于0度小于等于180度，所述往复转动的次数为3-10次。可选的，所述往复转动的速度为2-10转/分钟。本专利技术实施例提供的一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，由于在通过细胞反应器对细胞进行扩增时，细胞反应器内通过滤膜分隔为细胞生长腔和营养液腔，细胞接种于细胞生长腔内，营养液腔中的营养液渗透该滤膜为细胞提供营养，在此过程中，细胞在狭窄的腔室内扩增之后，大量细胞会聚集在一起，并且还有的细胞附着于细胞生长腔的壁面上，在细胞扩增完成后，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器，利用重力和离心力，对扩增后的细胞进行扰动，以使得细胞分散并脱落，而后，通过营养液的驱动将细胞排出并收集，不需要打开细胞反应器就能够对细胞进行收集，并且，通过营养液对细胞进行扰动，与机械刮除和酶解相比，能够减小对细胞和滤膜的伤害，从而能够提高细胞的培养和收集效率。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例提供的一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法的流程示意图；图2为本专利技术实施例提供的一种封闭式细胞扩增系统的结构示意图；图3为本专利技术实施例提供的一种转动细胞反应器的结构示意图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。在本专利技术的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。本专利技术实施例提供一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，参见图1与图2，包括：步骤1)在细胞扩增完成后，改变营养液腔11和/或细胞生长腔12的压力，在营养液腔11和细胞生长腔12之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器1，利用重力和离心力对扩增后的细胞进行扰动，以使得所述扩增后的细胞分散和脱落；步骤2)将脱落后的细胞在营养液的驱动下排出得以收集。本专利技术实施例提供的一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，由于在通过细胞反应器1对细胞进行扩增时，细胞反应器1内通过滤膜2分隔为细胞生长腔12和营养液腔11，细胞接种于细胞生长腔12内，营养液腔11中的营养液渗透该滤膜2为细胞提供营养，在此过程中，细胞在狭窄的腔室内扩增之后，大量细胞会聚集在一起，并且还有的细胞附着于细胞生长腔12的壁面上，在细胞扩增完成后，改变营养液腔11和/或细胞生长腔12的压力，在营养液腔11和细胞生长腔12之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器1，对扩增后的细胞进行扰动，以使得细胞分散并脱落，而后，通过营养液的驱动将细胞排出并收集，不需要打开细胞反应器1就能够对细胞进行收集，并且，通过营养液对细胞进行扰动，与机械刮除和酶解相比，能够减小对细胞和滤膜的伤害，从而能够提高细胞的培养和收集效率。需要说明的是，本专利技术实施例的细胞收集方法中的细胞反应器1，可适用于绝大多数细胞的培养，尤其适用于悬浮细胞和贴壁细胞的培养。其中，悬浮细胞在培养时可直接注入到细胞培养器1内进行培养，贴壁细胞在培养前需要对细胞反应器1内的细胞生长腔12的壁面进行处理，以便于细胞贴壁生长，例如，将具有附着功能的蛋白铺在细胞生长腔12壁面后，再进行贴壁细胞的培养。在扩增完成后，对细胞进行收集时，通过对所述细胞进行扰动，以使得细胞从细胞生长腔12的壁面脱落，对于悬浮细胞而言，随着细胞的扩增，大量细胞聚集成细胞团，并有部分细胞粘附在细胞生长腔12的腔壁上，通过轻轻扰动就能够使细胞从壁面脱落，并将细胞团打散；本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，其特征在于，包括：在细胞扩增完成后，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器，利用重力和离心力对扩增后的细胞进行扰动，以使得所述扩增后的细胞分散和脱落；将脱落后的细胞在营养液的驱动下排出得以收集。

【技术特征摘要】
1.一种封闭式细胞扩增系统的细胞收集方法，其特征在于，包括：在细胞扩增完成后，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差，通过压差对扩增后的细胞进行扰动，和/或，转动细胞反应器，利用重力和离心力对扩增后的细胞进行扰动，以使得所述扩增后的细胞分散和脱落；将脱落后的细胞在营养液的驱动下排出得以收集。2.根据权利要求1所述的细胞收集方法，其特征在于，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差具体包括：将营养液输送泵以脉冲的形式输送营养液，以使得营养液腔和细胞生长腔之间的压差正负交替变化。3.根据权利要求1所述的细胞收集方法，其特征在于，改变营养液腔和/或细胞生长腔的压力，在营养液腔和细胞生长腔之间产生压差具体包括：交替向压力扩展箱内充入气体和排出气体，以使得营养液腔和细胞生长腔之间的压差正负交替变化。4.根据权利要求1所述的细胞收集方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：于净，王维军，周飞彪，李朝辉，曾亦达，杨红磊，
申请(专利权)人：奥凯苏州生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32