一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法技术

本发明专利技术提供了一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法，包括以下操作步骤：（1）微载体混悬液的准备；（2）细胞贴壁阻滞剂制备；（3）准备6孔板，将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里，静置风干，再将制备好的细胞以10

【技术实现步骤摘要】
一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法
本专利技术涉及一种病毒培养用的体外模型，具体地，涉及一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法。
技术介绍
在病毒学的发展史中，常利用易感动物如家兔、小白鼠、豚鼠等对目的病毒进行实验。动物模型可以观察病毒对机体的侵害，造成病理变化的部位，但动物个体差异大，价格昂贵，还需要特殊的动物房，因此推广起来成本巨大。随着科学的发展，也出现了很多体外培养病毒的模型，但常规的细胞培养技术模型往往并不能反应病毒在体内的致病过程。
技术实现思路
专利技术目的：为了克服以上不足，本专利技术提供了一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法，运用三维培养技术，既能避免动物体内实验带来的高成本，又能最大程度的模拟动物体内生长模式，使所培养的细胞呈现立体生长方式，形成类似体内的组织结构，进而有助于模拟病毒体内的致病过程，该模型方法简便，成本低廉，推广方便。技术方案：为了克服现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法，包括以下操作步骤：（1）微载体混悬液的准备：称取1-3份的微载体，置于玻璃容器内，按照微载体1份：50ml磷酸盐缓冲液的比例加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法，其特征在于：包括以下操作步骤（1）微载体混悬液的准备：称取1‑3份的微载体，置于玻璃容器内，按照微载体1份：50ml磷酸盐缓冲液的比例加入磷酸盐缓冲液，混匀1‑3h，然后再用新鲜的清洗液洗涤2‑3次，再按照微载体1份：50ml磷酸盐缓冲液的比例加入新鲜的磷酸盐缓冲液，高压灭菌，冷却后4℃保存；（2）细胞贴壁阻滞剂制备：按照2.5%的浓度制备，称取细胞贴壁阻滞剂粉末，加入无水乙醇，密封后混匀10‑30分钟，4℃保存；（3）准备6孔板，将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里，静置风干，再将制备好的细胞以10

【技术特征摘要】
1.一种简便的病毒体外三维培养模型的建立方法，其特征在于：包括以下操作步骤（1）微载体混悬液的准备：称取1-3份的微载体，置于玻璃容器内，按照微载体1份：50ml磷酸盐缓冲液的比例加入磷酸盐缓冲液，混匀1-3h，然后再用新鲜的清洗液洗涤2-3次，再按照微载体1份：50ml磷酸盐缓冲液的比例加入新鲜的磷酸盐缓冲液，高压灭菌，冷却后4℃保存；（2）细胞贴壁阻滞剂制备：按照2.5%的浓度制备，称取细胞贴壁阻滞剂粉末，加入无水乙醇，密封后混匀10-30分钟，4℃保存；（3）准备6孔板，将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里，静置风干，再将制备好的细胞以105/ml的浓度接种于6孔板中，所述细胞培养基包括70-90%的基础培养基以及10-30%的胎牛血清，所述基础培养基以重量组分计，包括以下组分：葡萄糖82-88份、碳酸氢钠12-25份、丙酮酸钠10-16份、人血白蛋白5-9份、氯化钾35-45份、无水硫酸镁6-10份、氯化钠70-78份、无水磷酸二氢钠10-14份、PHA-植物血球凝集素0.4-0.8份、叶酸0.3-0.5份、肌醇0.8-1.2份、烟酰胺0.3-0.6份、无水氯化钙25-35份、硝酸铁0.2-0.4份、丁二酸6-8份、丁二酸钠12-16份、D-泛酸钙0.3-0.6份、酒石酸胆碱0.6-0.8份、核黄素0.1-0.3份、盐酸硫胺0.2-0.4份、盐酸吡哆辛0.3-0.5份、还原谷胱甘肽0.2-0.6份、胆固醇2-4份、抗坏血酸磷酸酯0.6-1份、聚碳酸酯0.4-0.9份、酚...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱智杰，
申请(专利权)人：苏州诚晟信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32