【技术实现步骤摘要】
一种低成本的病毒体外三维培养模型的建立方法
本专利技术涉及一种病毒培养用的体外模型,具体地,涉及一种低成本的病毒体外三维培养模型的建立方法。
技术介绍
在病毒学的发展史中,常利用易感动物如家兔、小白鼠、豚鼠等对目的病毒进行实验。动物模型可以观察病毒对机体的侵害,造成病理变化的部位,但动物个体差异大,价格昂贵,还需要特殊的动物房,因此推广起来成本巨大。随着科学的发展,也出现了很多体外培养病毒的模型,但常规的细胞培养技术模型往往并不能反应病毒在体内的致病过程。
技术实现思路
专利技术目的:为了克服以上不足,本专利技术提供了一种低成本的病毒体外三维培养模型的建立方法,运用三维培养技术,既能避免动物体内实验带来的高成本,又能最大程度的模拟动物体内生长模式,使所培养的细胞呈现立体生长方式,形成类似体内的组织结构,进而有助于模拟病毒体内的致病过程,该模型方法简便,成本低廉,推广方便。技术方案:为了克服现有技术中存在的不足,本专利技术提供了一种低成本的病毒体外三维培养模型的建立方法,包括以下操作步骤:(1)微载体混悬液的准备:称取1-3份的微载体,置于玻璃容器内,按照微载体1份:5 ...
【技术保护点】
一种低成本的病毒体外三维培养模型的建立方法,其特征在于:包括以下操作步骤(1)微载体混悬液的准备:称取1‑3份的微载体,置于玻璃容器内,按照微载体1份:50ml磷酸盐缓冲液的比例加入磷酸盐缓冲液,混匀1‑3h,然后再用新鲜的清洗液洗涤2‑3次,再按照微载体1份:50ml磷酸盐缓冲液的比例加入新鲜的磷酸盐缓冲液,高压灭菌,冷却后4℃保存;(2)细胞贴壁阻滞剂制备:按照2.5%的浓度制备,称取细胞贴壁阻滞剂粉末,加入无水乙醇,密封后混匀10‑30分钟,4℃保存;(3)准备6孔板,将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里,静置风干,再将制备好的细胞以10
【技术特征摘要】
1.一种低成本的病毒体外三维培养模型的建立方法,其特征在于:包括以下操作步骤(1)微载体混悬液的准备:称取1-3份的微载体,置于玻璃容器内,按照微载体1份:50ml磷酸盐缓冲液的比例加入磷酸盐缓冲液,混匀1-3h,然后再用新鲜的清洗液洗涤2-3次,再按照微载体1份:50ml磷酸盐缓冲液的比例加入新鲜的磷酸盐缓冲液,高压灭菌,冷却后4℃保存;(2)细胞贴壁阻滞剂制备:按照2.5%的浓度制备,称取细胞贴壁阻滞剂粉末,加入无水乙醇,密封后混匀10-30分钟,4℃保存;(3)准备6孔板,将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里,静置风干,再将制备好的细胞以105/ml的浓度接种于6孔板中,所述细胞的培养基包括70-90%的基础培养基以及10-30%的胎牛血清,所述基础培养基以重量组分计,包括以下组分:葡萄糖80-90份、碳酸氢钠10-20份、丙酮酸钠8-18份、转铁蛋白2-10份、氯化钾30-50份、无水硫酸镁5-12份、氯化钠60-80份、氯化锂3-10份、无水磷酸二氢钠8-16份、叶酸0.2-0.6份、肌醇0.5-1.5份、烟酰胺0.2-0.8份、无水氯化钙20-40份、硝酸铁0.1-0.5份、丁二酸5-10份、丁二酸钠9-18份、D-泛酸钙0.2-0.8份、酒石酸胆碱0.5-1份、核黄素0.1-0.3份、盐酸硫胺0.1-0.5份、盐酸吡哆辛0.1-0.6份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.2-0.8份、亚麻油0.5-2份、聚脂肪酸酯0.5-1.8份、酚红钠0.8-1.5份...
【专利技术属性】
技术研发人员:朱智杰,
申请(专利权)人:苏州诚晟信息技术有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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