用于调节免疫反应的介孔二氧化硅组合物制造技术

一种组合物包括介孔二氧化硅棒，所述介孔二氧化硅棒包括免疫细胞募集化合物和免疫细胞活化化合物，以及任选的包括抗原，例如肿瘤抗原溶解产物。该组合物用于引发对疫苗抗原的免疫反应。

Mesoporous silica composition for modulating immune response

A composition comprising a mesoporous silica rod, wherein the mesoporous silica rod including immune cell recruitment and activation of the immune cell compound compound, and optionally including antigens, such as tumor lysate antigen. The composition is used to initiate an immune response to vaccine antigens.

【技术实现步骤摘要】
用于调节免疫反应的介孔二氧化硅组合物本申请是2013年04月16日递交的申请号为201380019880.0，专利技术名称为“用于调节免疫反应的介孔二氧化硅组合物”的分案申请。政府支持本申请具有政府支持，由国家健康研究院授权的第R01DE019917号权利支持。政府享有本专利技术的某些权利。
本专利技术涉及生物相容性可注射性组合物。
技术介绍
需要体外操作的疫苗，例如大多数基于细胞的治疗，会导致不理想的淋巴结定位以及有限的效力。
技术实现思路
本专利技术为现有方法中相关的一些问题和缺陷提供了一种解决方案。因此，本专利技术的特点在于一种组合物，所述组合物包括介孔二氧化硅(MPS)棒，所述介孔二氧化硅(MPS)棒包括一种免疫细胞募集化合物和一种免疫细胞活化化合物。所述棒包括直径在2-50纳米之间的孔，例如，直径在5-25纳米之间的孔或者直径在5-10纳米之间的孔。在优选的实施方案中，所述棒包括直径大约为8纳米的孔。微棒的长度在5微米到500微米之间。在一个实施例中，所述棒的长度为5-25微米，例如，10-20微米。在其他实施例中，所述棒的长度为50微米-250微米。使用介孔二氧化硅(MPS)微颗粒组合物可以实现细胞的稳固的募集，所述介孔二氧化硅(MPS)微颗粒组合物的特点在于具有较高的宽高比，例如，所述棒的长度为80微米到120微米。示例性的免疫细胞募集化合物包括粒细胞巨噬细胞-菌落刺激因子(GM-CSF)。其他募集化合物的实施例包括趋化因子，例如，选自由趋化因子(C-C基序)配位体21(CCL-21,基因银行编目号:(aa)CAG29322.1(01:47496599),(na)EF064765.1(01:117606581),通过引证在此并入本文)，趋化因子(C-C基序)配位体19(CCL-19,基因银行编目号:(aa)CAG33149.1(01:48145853),(na)NM_006274.2(01:22165424),通过引证在此并入本文)，以及FMS-样酪氨酸激酶3配位体(Flt3)配位体；基因银行编目号:(aa)AAI44040(01:219519004),(na)NM_004119(01:01:121114303)通过引证在此并入本文)所组成的组中。免疫细胞活化化合物包括Toll样受体激动剂。这种激动剂包括病原相关分子模型(PAMP)，例如，一种感染-模拟组合物，例如，细菌衍生的免疫调节剂(也叫做危险信号)。Toll样受体(TLR)激动剂包括核酸或者脂类组合物(例如，单磷酸脂A(MPLA))。在一个实施例中，Toll样受体(TLR)激动剂包括TLR9激动剂，例如，一种胞嘧啶-鸟嘌呤低聚核苷酸(CpG-ODN)、一种聚(氮丙啶)(PEI)-浓缩的低聚核苷酸(ODN)(例如，聚(氮丙啶)(PEI)-胞嘧啶-鸟嘌呤低聚核苷酸(CpG-ODN))、或者双链脱氧核糖核酸(DNA)。例如，所述装置包括5微克、10微克、25微克、50微克、100微克、250微克或者500微克的胞嘧啶-鸟嘌呤低聚核苷酸(CpG-ODN)。在另一个实施例中，Toll样受体(TLR)激动剂包括TLR3激动剂，例如，聚肌苷-聚胞苷酸(聚I:C)、一种聚(氮丙啶)(PEI)-聚(I:C)、聚腺尿苷酸(聚(A:U))、聚(氮丙啶)(PEI)-聚(A:U)、或者双链核糖核酸(RNA)。脂多糖(LPS)同样可以用于实现此目的。为了产生免疫反应，所述组合物包括此免疫反应所需要的抗原。例如，所述组合物包括肿瘤抗原。在优选的实施方案中，所述抗原包括一种肿瘤细胞溶解产物(例如，从被治疗的主体中收集的肿瘤活组织切片样品中提取的)。所述主体优选是人类患者，但是所述组合物/系统还可以用于兽医用途，例如，用于治疗功能性动物，比如狗、猫以及性能动物，例如，马和家畜，比方说家牛、公牛、羊、山羊，等。抗原递呈细胞，比如树突状细胞(DC)，通过介孔二氧化硅(MPS)装置，那就是说，细胞不是永久居住在装置中。向装置中募集免疫细胞，并且使其短时间内居住在装置中，当他们遇到抗原时被活化。然后免疫细胞(比如树突状细胞(DC))定位向淋巴结。他们聚集在淋巴结处，例如，一种引流淋巴结，而不是在介孔二氧化硅(MPS)装置中。在淋巴结处聚集的细胞进一步增加了对疫苗抗原的免疫反应，产生更有力的针对该抗原的细胞反应和体液反应。因此，一种诱导对疫苗产生全身性抗原特异性免疫反应的方法包括对主体施用如上所述的介孔二氧化硅(MPS)组合物。所述组合物被装入注射器并注入受试者的身体中。例如，少量(例如，50-500微升，例如，150微升)进行皮下注射。一般地，在施用后第2天，使用细胞渗透所述装置(介孔二氧化硅(MPS)组合物)，并在施用后第5-7天，引流淋巴结中充满从装置中迁移出来的细胞和迁移到淋巴结组织中的细胞，这些细胞在此聚集并进一步的传播抗原-特异性反应。因此，所述组合物可以有效用于诱导免疫细胞向淋巴结的定位。在接种疫苗治疗剂之后，不比去除所述介孔二氧化硅(MPS)组合物。这些组合物可以在施用位点处保存，并在此降解。例如，通过巨噬细胞随着时间来消耗介孔二氧化硅(MPS)颗粒，并直至从身体内清除。制备疫苗的方法包括，提供一种介孔二氧化硅棒悬浮液，将所述棒与疫苗抗原、免疫细胞募集化合物和免疫细胞活化化合物相接触。所述疫苗抗原一种肿瘤细胞溶解产物，所述募集化合物包括粒性白细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)，并且所述活化化合物包括胞嘧啶-鸟嘌呤低聚核苷酸(CpG-ODN)。有时候，在将所述棒与一个或一个以上下列化合物相接触之前用羟基乙酸或者乳酸修饰所述棒：疫苗抗原、募集化合物或者活化化合物。选择性的，所述介孔二氧化硅(MPS)组合物/装置是使用介孔二氧化硅(MPS)棒、一种免疫细胞募集化合物和一种免疫细胞活化化合物(选择性地，与羟基乙酸或者乳酸修饰)来制备的，被储存和/或运往应用位点，因此，在施用前，向棒悬浮液中加入病人特异性肿瘤抗原制剂或者溶解产物，例如，在对病人施用前1、2、6、12、24或者48小时之前加入。所述装入介孔二氧化硅(MPS)组合物中的化合物是被加工或者纯化的。例如、多聚核苷酸、多肽或者其他试剂，可以被纯化和/或分离。具体地说，如这里所使用的，“分离的”或者“纯化的"核苷酸分子、多聚核苷酸、多肽或者蛋白质是指在通过重组技术产生时基本上不含有其他细胞物质或者培养基的物质，或者是指通过化学合成的化学前体物或者其他化学试剂。纯化后的化合物按重量计算(干重)占所关心化合物的至少60％。优选的，所述制剂按重量计算占所关心化合物的至少75％，更优选的占至少90％，并且最优选的占至少99％。例如，纯化后的化合物按重量计算占理想化合物的至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，98％，99％，或者100％(重量/重量)。可以通过任何适当的标准方法来测量纯度，例如，通过柱形色谱法、薄层色层分析法、或者高效液相色谱(HPLC)进行分析。纯化后的或者分离的多聚核苷酸(核糖核酸(RNA)或者脱氧核糖核酸(DNA))不含有那些在其天然存在形式中存在的侧链基因或者序列。纯化的也用于定义一种灭菌程度，这种灭菌程度可以安全的对人类主体给药，例如，不具有传染性或者毒剂。就肿瘤抗原而言，所述抗原可以被本文档来自技高网...

【技术保护点】
包括介孔二氧化硅棒的组合物，所述介孔二氧化硅棒包括免疫细胞募集化合物和免疫细胞活化化合物。

【技术特征摘要】
2012.04.16 US 61/624,5681.包括介孔二氧化硅棒的组合物，所述介孔二氧化硅棒包括免疫细胞募集化合物和免疫细胞活化化合物。2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒包括孔，所述孔的孔径在2-50纳米之间。3.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒包括孔，所述孔的孔径在5-25纳米之间。4.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒包括孔，所述孔的孔径在5-10纳米之间。5.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒包括孔，所述孔的孔径大约为8纳米。6.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒的长度为5微米到500微米。7.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒的长度为5微米到25微米。8.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述棒的长度为80微米到120微米。9.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述募集化合物包括粒细胞巨噬细胞-菌落刺激因子(GM-CSF)、趋化因子(C-C基序)配位体21(CCL-21)、趋化因子(C-C基序)配位体19(CCL-19)或者FMS-样酪氨酸激酶3(Flt-3)配位体。10.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述募集化合物包括GM-CSF。11.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物进一步包括一种抗原。12.根据权利要求11所述的组合物，其中，所述抗原包括肿瘤抗原。13.根据权利要求11所述的组合物，其中，所述抗原包括肿瘤细...

【专利技术属性】
技术研发人员：金在允，W·A·李，D·J·穆尼，
申请(专利权)人：哈佛学院董事会，
类型：发明
国别省市：美国,US