类风湿性关节炎标志物制造技术

本发明专利技术提供通过简便的方法高灵敏度且可靠地评价类风湿性关节炎的疾病活动性的方法以及用于该方法的试剂盒。进一步地，本发明专利技术还提供类似的类风湿性疾病类风湿性多发肌痛症和复发性多发软骨炎的正确的诊断方法、类风湿性关节炎的鉴别方法以及用于该方法的试剂盒。本发明专利技术提供作为负相关性的类风湿性关节炎诊断用标志物的Jacalin结合性O‑结合型糖链抗原表位，并且通过将血液中的MMP‑3与Jacalin的结合量的倒数乘以血液中的MMP‑3的量或血液中的MMP‑3与ABA、ACA或ACG的结合量得到的值的变化量，更客观地判定类风湿性关节炎的疾病活动性，从而使更正确的病情把握成为可能。另外，发现血液中的MMP‑3上的LEL或STL反应性糖链成为类风湿性多发肌痛症和复发性多发软骨炎诊断用糖链标志物，提供了类风湿性多发肌痛症和复发性多发软骨炎的正确的诊断方法。进一步地，通过测定血液中的MMP‑3上的LEL或STL结合量与MMP‑3上的Jacalin或ACG等的结合量之比，提供了可以与类似的类风湿性疾病鉴别的类风湿性关节炎的正确的诊断方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】类风湿性关节炎标志物
本专利技术涉及类风湿性关节炎的简便且正确的疾病活动性评价方法和评价用试剂盒。
技术介绍
类风湿性关节炎(RA)是近1％人口罹患的高频度的疾病，是伴随关节的滑膜增殖发生关节破坏的进展性且难治性的炎症性疾病。从在全身关节发生滑膜炎并增殖了的滑膜组织分泌IL-1β、TNF-α等炎症性细胞因子和各种蛋白酶，关节软骨和骨逐渐被侵蚀，如果继续进展，则关节被破坏而变形。由被炎症性细胞因子活化的软骨细胞和滑膜细胞分泌的细胞外基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases：MMPs)强烈参与软骨破坏，其中，已知基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在类风湿性关节炎的滑膜细胞中大量产生，强烈参与软骨破坏的进展(非专利文献1～3)。同时，已知这些炎症性细胞因子也通过破骨细胞的活化、骨芽细胞的抑制引起骨破坏，由关节破坏引起功能障碍，使患者的日常生活动作(activitiesofdailyliving，ADL)显著降低(非专利文献4)。对于类风湿性关节炎患者，除了肾上腺皮质甾体药以外，也进行非甾体系消炎剂(NSAID)、抗风湿药剂(DMARD)和生物学药剂(抗TNF受体拮抗剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
提供用于判定类风湿性关节炎的疾病活动性的数据的方法，所述方法包括：测定受试体液试样中的MMP‑3上的O‑结合型糖链的糖链结构的变化的工序。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.30 JP 2014-2220961.提供用于判定类风湿性关节炎的疾病活动性的数据的方法，所述方法包括：测定受试体液试样中的MMP-3上的O-结合型糖链的糖链结构的变化的工序。2.如权利要求1所记载的方法，所述方法如下进行：前述糖链结构的变化的测定是将显示受试体液试样中的MMP-3总量的测定信号乘以显示MMP-3上的Jacalin结合性O-结合型糖链总量的测定信号的倒数，或者，前述糖链结构的变化的测定是将显示受试体液试样中的MMP-3总量的测定信号的倒数乘以显示MMP-3上的Jacalin结合性O-结合型糖链总量的测定信号，计算下述糖链修饰判别指数X或Y；X＝显示受试体液试样中的MMP-3总量的测定信号/显示同一MMP-3上的Jacalin结合性O-结合型糖链总量的测定信号，Y＝显示受试体液试样中的MMP-3上的Jacalin结合性O-结合型糖链总量的测定信号/显示同一MMP-3总量的测定信号。3.如权利要求2所记载的方法，其中，糖链修饰判别指数X的值越高，判定为类风湿性关节炎的疾病活动性越高；或者，糖链修饰判别指数Y的值越高，判定为类风湿性关节炎的疾病活动性越低。4.如权利要求2或3所记载的方法，其中，显示前述MMP-3上的Jacalin结合性O-结合型糖链总量的测定信号是使用Jacalin凝集素测定的值。5.如权利要求2～4中任意一项所记载的方法，其中，显示前述MMP-3总量的测定信号是体液试样中的MMP-3存在量的测定值或者是根据体液试样中的MMP-3存在量而增减的测定信号。6.如权利要求5所记载的方法，其中，根据前述MMP-3存在量而增减的测定信号是使用对MMP-3的多肽链特异性地识别的抗MMP-3抗体测定的信号值或者是显示体液试样中的MMP-3与从ABA、ACA和ACG中选择的任意一种凝集素的结合量的测定信号值。7.判定类风湿性关节炎的疾病活动性的方法，所述方法包括下述(1)～(5)的工序：(1)测定显示受试体液试样中的MMP-3与Jacalin的结合量的信号的工序；(2)测定显示同一受试体液试样中的MMP-3存在量、或者同一MMP-3与从ABA、ACA和ACG中选择的任意一种凝集素的结合量或与抗MMP-3抗体的结合量的信号的工序；(3)将由工序(1)得到的测定值的倒数乘以由工序(2)得到的测定值来计算糖链修饰判别指数X，或者将由工序(1)得到的测定值乘以由工序(2)得到的测定值的倒数来计算糖链修饰判别指数Y的工序；(4)将由工序(3)计算的值(X)或(Y)与基准值(X0)或(Y0)进行比较的工序；(5)在工序(4)中X高于基准值X0的情况下(X>X0)，判定为类风湿性关节炎的疾病活动性高或者正在罹患类风湿性关节炎的工序，或者在工序(4)中Y低于基准值Y0的情况下(Y<Y0)，判定为类风湿性关节炎的疾病活动性高或者正在罹患类风湿性关节炎的工序。8.如权利要求7所记载的方法，其中，前述基准值X0或Y0是对来自于健康个体的体液试样经工序(1)～(3)计算的值。9.判定受试者的类风湿性关节炎的疾病活动性的经时性的病情变化的方法，所述方法包括下述(1)～(5)的工序：(1)测定显示受试体液试样中的MMP-3与Jacalin的结合量的信号的工序；(2)测定显示同一受试体液试样中的MMP-3存在量、或者同一MMP-3与从ABA、ACA和ACG中选择的任意一种凝集素的结合量或与抗MMP-3抗体的结合量的信号的工序；(3)将由工序(1)得到的测定值的倒数乘以由工序(2)得到的测定值计算糖链修饰判别指数X’，或者将由工序(1)得到的测定值乘以由工序(2)得到的测定值的倒数计算糖链修饰判别指数Y’的工序；(4)将由工序(3)计算的值(X’)或(Y’)与对同一受试者的检测日以前的体液试样经工序(1)～(3)计算的值(X’0)或(Y’0)进行比较的工序；(5)在工序(4)的比较工序中，对于X’在出现比检测日以前高的数值的情况下(X’>X’0)、对于Y’在出现比检测日以前低的数值的情况下(Y’<Y’0)，判定为受试者的类风湿性关节炎的疾病活动性恶化，在出现低的数值的情况下(X’<X’0)或出现高的数值的情况下(Y’>Y’0)，判定为疾病活动性改善的工序。10.如权利要求9所记载的方法，其中，前述受试体液试样是来自于类风湿性关节炎治疗后的受试者的体液试样，前述检测日以前的体液试样是来自于治疗前的同一受试者的体液试样；在工序(4)的比较工序中，对于X’在比治疗前低的情况下(X’<X’0)、对于Y’在比治疗前高的情况下(Y’>Y’0)，判定为通过对受试者实施的类风湿性关节炎的治疗具有治疗效果；在比治疗前高或者没有变化的情况下(X’≧X’0)、或者比治疗前低或者没有变化的情况下(Y’≦Y’0)，判定为没有治疗效果。11.成为类风湿性关节炎活动性判定用标志物的糖链抗原表位，其特征在于，其为MMP-3上的O-结合型糖链，而且是Jacalin非结合性的。12.成为类风湿性关节炎活动性判定用标志物的糖链抗原表位，其特征在于，其为MMP-3上的O-结合型糖链，而且在MMP-3的肽链中的Ser/Thr上结合的GalNAc被α2,6唾液酸修饰。13.由如权利要求11或12所记载的糖链抗原表位形成的类风湿性关节炎活动性判定用标志物。14.MMP-3上的O-结合型糖链、并且在MMP-3的肽链中的Ser/Thr上结合的GalNAc被α2,6唾液酸修饰的O-结合型糖链在类风湿性关节炎的疾病活动性的判定方法中的使用。15.在类风湿性关节炎的疾病活动性的判定方法中使用的、在MMP-3的肽链中的Ser/Thr上结合的GalNAc被α2,6唾液酸修饰的O-结合型糖链。16.可适用于受试体液试样的类风湿性关节炎疾病活动性判定用试剂，所述试剂包含：特异性地识别权利要求11或12所记载的糖链抗原表位的物质或特异性地识别含有多个该糖链抗原表位的MMP-3的物质。17.如权利要求16所记载的类风湿性关节炎疾病活动...

【专利技术属性】
技术研发人员：久野敦，松田厚志，成松久，竹内勤，铃木胜也，竹下胜，
申请(专利权)人：国立研究开发法人产业技术综合研究所，学校法人庆应义塾，格莱克白欧马克领先创新有限公司，
类型：发明
国别省市：日本,JP