本发明专利技术提供基本同源物增强子(Enhancer of rudimentary homolog，ERH)或其片段在制备用于监测药物对于类风湿性关节炎疗效的试剂中的用途。本发明专利技术通过高密度蛋白质芯片与RA血清杂交筛选到35种蛋白质为候选ACPA阴性RA自身抗原，8种蛋白质为候选预测疾病活动度的自身抗原，6种蛋白质为候选预测治疗效果的自身抗原。6种候选预测疾病疗效的自身抗原中，有1种自身抗原，ERH，能够成功判断RA对药物治疗的效果，其预测疗效的AUC可达0.733。
Diagnostic marker for predicting curative effect of RA medicine and application thereof
The present invention provides basic homolog enhancer (Enhancer of rudimentary homolog, ERH) or a fragment thereof in the preparation of drugs for use of reagents for monitoring therapeutic effect of rheumatoid arthritis in the. The present invention by high density protein chip and RA serum hybridization to 35 proteins as candidate ACPA negative RA antigen, 8 proteins as candidate prediction of disease activity of self antigens, 6 proteins as a candidate autoantigen to predict treatment effect. The 6 candidate antigens that predict the efficacy of the disease have 1 autoantigens, ERH, which can successfully determine the effect of RA on drug therapy, with a predicted AUC of up to 0.733.
【技术实现步骤摘要】
一种预测RA药物疗效的诊断标志物及其应用
本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种预测RA药物疗效的诊断标志物及其应用。
技术介绍
类风湿性关节炎(Rheumatoidarthritis,RA)是一种慢性的自身免疫性疾病，主要是以引起全身多处小关节局部滑膜的炎症反应，进而造成关节局部的骨质破坏为一组临床表现的疾病。在发展中国家，类风湿性关节炎影响了近0.5％-1％左右的人群。总体来说，RA在女性中的发病率要高于男性，在老年人中的发病率要高于年轻人。类风湿性关节炎的临床表现差异很大，可以是轻微症状的自限性疾病，也可以是快速进展的炎症伴关节破坏及严重身体残疾。由于疾病表现的差异性，人们制定了分类标准作为疾病定义、标准化临床试验入选人群选择以及多中心研究比较的基础。因此1987诞生了由年美国风湿病学会(ACR)制定的RA的分类标准。但在实际应用过程中，由于该分类标准对于关节炎的定义要求严格，致使它对于RA诊断的敏感性不高，有相当一部分早期的RA并没有从中被识别出来。但同时，尤为重要的是新发RA病例有可能从早期的有效干预中获益，以避免进展为慢性、侵蚀状态RA，进一步导致残疾，影响长期生活质量，增加疾病死亡率。因此，对于类风湿性关节炎来说，早期的诊断和治疗是阻止不可逆性关节破坏的关键。于是2009年，ACR/EULAR标准更新，该标准诊断RA的敏感性较高，能够在疾病早期诊断RA并进行治疗，缺点是特异性较差。在2009年最新的RA的分类标准中，血清中ACPA(抗瓜氨酸多肽抗体)的阳性被纳入诊断标准。这一抗瓜氨酸化的蛋白抗体被认为是类风湿性关节炎的血清特异性的标志物，它的出现也增加了我们对RA发病机制的理解。但是直至现在，RA的确切病因仍然未知，环境因素和遗传因素被公认为是引起RA临床症状的“扳机”。同时，临床上也存在着一类ACPA抗体阴性的RA患者，并且随着研究者对疾病的认识不断加深，他们逐渐认识到ACPA抗体阳性的RA患者和ACPA抗体阴性的RA患者存在一定的临床异质性。但是由于目前临床上对于ACPA抗体阴性的RA患者缺乏特异性的生物标志物，这使得这类患者的诊断难度大大增加。RA患者的血清中发现自身抗体已经超过70年。类风湿因子以人类IgG的Fc片段为靶点，是发现的第一组自身抗体，包括IgG和IgM等各类亚型。遗憾的是RF并不是针对RA的特异性抗体，在其他自身免疫病和高龄人群中也会有RF的出现。更重要的是，在高达15％的健康人群中也可以检测到RF。随着研究的深入，1964年和1979年，人们分别发现了RA患者中存在的其它抗体，即抗核周因子抗体(APF)和抗角蛋白抗体(AKA)。尽管这两种抗体对诊断RA的特异性很高，但这些自身抗体很难测到。因此，在日常实践中，RF仍被辅助用于RA的诊断。为此，RF阳性被纳入1987年ACR的RA标准。直到1995年人们才发现抗核周蛋白和抗角蛋白抗体是相同的自身抗体，它们共同的靶点都来自精氨酸残基的去亚胺化所形成的的瓜氨酸残基。于是，2002年通过研发瓜氨酸化肽(CCP)-2技术出现了首个测定ACPA的商业化测试，使ACPA能够作为RA常规检查的生物标志物。对这个独特的自身抗体系统进行深入研究，加深了人们对RA的理解和分类，因此，RF和ACPA都成为ACR/EULAR2010分类标准的一部分。最近，有文献报道了RA患者血清识别氨基甲酰化蛋白(抗CarP)的新的自身抗体亚型。这个抗体系统独立于ACPA，因为RA患者的血清抗体能够区分瓜氨酸化和氨基甲酰化抗原。相应的，有相当部分ACPA阴性患者存在抗CarP抗体。在过去的数年，由于RA特异性针对瓜氨酸化蛋白和氨基甲酰化蛋白自身抗体的发现，人们对RA的发病及病因学有了深入的认识。氨基甲酰化和瓜氨酸化都是翻译后修饰，分别引起蛋白氨基甲酰化和瓜氨酸化，使带正电荷的氨基酸为中性氨基酸所替代。瓜氨酸化蛋白由PAD酶产生，而氨基甲酰化蛋白是氨基酸赖氨酸通过化学反应转化为高瓜氨酸。瓜氨酸和高瓜氨酸在化学结构上相似，但位于蛋白质的不同位点，因为精氨酸和赖氨酸在不同的部位。而且，高瓜氨酸只是多了一个甲酰基。尽管一些抗体对两种结构都有反应性，但有些抗CarP抗体对瓜氨酸不产生反应，同样，一些抗瓜氨酸抗体也对CarP不产生反应。2009年Auger等人用含有8268个蛋白的芯片筛选ACPA阴性的RA病人，成功筛选出PAD4和BRAF两个候选标志物。以涉及蛋白质瓜氨酸化的酶为靶点的抗PAD抗体受到很多关注，因为人们发现这些抗体不只是与靶点结合，还对PAD有激活作用。它能够通过降低该瓜氨酸化酶钙的需要量从而增加PAD4的催化能力。CharpinC等人通过研究发现：RA病人体内存在着抗BRAF催化结构域的抗体，主要集中在416位到766位的氨基酸序列上，而且这一抗体存在于30％的ACPA阴性的RA患者中。同时，抗BRAF抗体阳性的RA病人中有高达33％的病人是ACPA阴性的。4％的AS患者和6％的健康对照中也存在该自身抗体。如前所述，RA是一种慢性的自身免疫性疾病，自身抗体标记物的检测在疾病的诊断中具有重要作用。RA以临床表现差异大为特征，可以是轻度自限性疾病，也可能是快速进展性炎症、关节破坏及严重的功能残疾。RA临床特征的差异导致患者治疗反应的极大差别。目前，我们没办法预测某项特定治疗对特定患者的疗效，因为我们缺乏对RA患者进行分组的高效能生物标志物。血清标志物ACPA的发现有着深远的影响，因为这是首次可以根据血清标志物对RA不同的疾病特征进行分组。但ACPA阳性和ACPA阴性的RA患者在疾病的遗传学和环境决定因素、受累关节的分子特征、缓解率以及最重要的对治疗的应答率方面都存在着显著差异。对于很多ACPA阴性的RA患者，能够进行亚组区分的靶点有限，主要示由于缺乏强有力的生物标志物对RA的临床表现进行区分。因此鉴定更多的尤其是ACPA阴性的自身抗体可能有助于揭示RA的发病机制，特别是自身抗体在其中的作用。由于在发展中国家RA的发病率一直居高不下，中国也是罹患RA一大国家，加之RA的致残率，因此早期正确的识别RA非常重要。鉴定更多ACPA阴性的RA相关的自身抗体标记物和一些能够预测病情活动度和疗效的自身抗原，对于降低RA的致残率十分重要。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供预测RA药物疗效的诊断标志物及其应用。本专利技术提供基本同源物增强子(Enhancerofrudimentaryhomolog，ERH)或其片段在制备用于监测药物对于类风湿性关节炎疗效的试剂中的用途。在本专利技术的实施方案中，所述监测药物对于类风湿性关节炎疗效包括：测定获自未用药的初治的类风湿性关节炎患者的生物样品中对ERH或其片段的反应性的抗体的水平；若生物样品中存在与ERH或其片段结合的抗体，则可预测该患者在规律服用药物后的3-6个月后，病情将达到中度及以上的缓解，若生物样品中不存在与ERH或其片段结合的抗体，则可预测该患者在规律服药的3-6个月后病情将不能达到有效缓解。其中，所述生物样品为血清样品。其中，所述药物可为本领域用于治疗或缓解类风湿性病的任何药物，优选自小剂量激素和/或传统的改善类风湿性病情的药物DMARDs。在本专利技术具体的实施方案中，ERH抗体的水平通过以下步骤来测量，包括本文档来自技高网...
【技术保护点】
基本同源物增强子，即ERH或其片段在制备用于监测药物对于类风湿性关节炎疗效的试剂中的用途。
【技术特征摘要】
1.基本同源物增强子，即ERH或其片段在制备用于监测药物对于类风湿性关节炎疗效的试剂中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述监测药物对于类风湿性关节炎疗效包括：测定获自未用药的初治的类风湿性关节炎患者的生物样品中对ERH或其片段的反应性的抗体的水平；若生物样品中存在与ERH或其片段结合的抗体，则可预测该患者在规律服用药物后的3-6个月后，病情将达到中度及以上的缓解，若生物样品中不存在与ERH或其片段结合的抗体，则可预测该患者在规律服药的3-6个月后病情将不能达到有效缓解。3.如权利要求1或2所述的用途，其中，所述生物样品为血清样品。4.如权利要求1或2所述的用途，其中，所述药物选自小剂量激素和传统的改善类风湿性病情的药物DMARDs。5.如权利要求1或2所述的用途...
【专利技术属性】
技术研发人员：张烜，莫文秀，李永哲，胡朝军，刘国振，武丽君，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，北京衡定联合生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。