补骨脂酚用于制备感染性心肌损伤药物的应用制造技术

本发明专利技术公开了补骨脂酚用于制备感染性心肌损伤药物的应用。发明专利技术人通过离体细胞和在体动物证实，补骨脂酚可浓度依赖性的降低促炎症因子水平，恢复心肌细胞活力，减少心肌凋亡率，发挥显著地抗炎和抗心肌凋亡作用；减少心肌组织破坏与炎细胞浸润，减少心肌凋亡率，减轻内质网应激反应，发挥较强的抗炎，抗心肌坏死及凋亡，改善心脏收缩功能的作用，有着很好的临床应用前景。

Application of Psoralen in preparation of medicine for treating myocardial injury

The invention discloses an application of Psoralen in preparing an infectious myocardial injury drug. The inventor by in vitro and in vivo animal cells confirmed that bakuchiol concentration dependent decrease of proinflammatory factors, the recovery of myocardial cell viability, reduce myocardial apoptosis, play a significant anti-inflammatory and anti myocardial apoptosis; reduce myocardial tissue damage and inflammatory cell infiltration, reduce myocardial apoptosis, reduce the endoplasmic reticulum stress reaction play a strong anti-inflammatory, anti myocardial necrosis and apoptosis, improve cardiac systolic function, has a good prospect of clinical application.

【技术实现步骤摘要】
补骨脂酚用于制备感染性心肌损伤药物的应用
本专利技术涉及补骨脂酚在治疗及预防心脏疾病中的应用，特别是涉及补骨脂酚在治疗或者预防细菌性内膜炎，系统性或者其他脏器感染所致菌血症或脓毒血症等导致的心肌炎性病变心肌损伤中的一种或者多种应用。
技术介绍
补骨脂酚是从豆科植物补骨脂果实中提取的单萜烯类化合物，具有广泛的药理活性。研究表明，补骨脂酚具有抗菌活性、抗肿瘤活性、消炎作用、降糖降血脂作用、抗氧化活性、抗抑郁、植物雌激素样作用等。
技术实现思路
专利技术人通过败血症细胞模型并观察炎症及心肌损伤各项指标发现，补骨脂酚可浓度依赖性的降低白介素-1(IL-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，恢复心肌细胞活力，减少心肌凋亡率，发挥显著地抗炎和抗心肌凋亡作用；通过败血症动物模型，证实补骨脂酚可浓度依赖性地降低小鼠血清中IL-1、TNF-α、乳酸脱氢酶1(LDH1)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平，提高左室射血分数(LVEF％)和左室短轴缩短率(LVFS％)值，减少心肌组织破坏与炎细胞浸润，减少心肌凋亡率，发挥较强的抗炎，抗心肌坏死及凋亡，改善心脏收缩功能的作用。研究表明，补骨脂酚较强的抗炎，抗心肌坏死及凋亡，改善心脏收缩功能的作用，有着很好的临床应用前景。本专利技术提供了补骨脂酚用于制备感染性心肌损伤药物或保护剂的应用。本专利技术的药物或保护剂为静脉注射给药制剂。本专利技术的药物或保护剂给药剂量为每千克体重25mg-100mg。本专利技术的优点：1、补骨脂酚可以抑制炎症引起的心肌细胞凋亡，具有抗炎抗凋亡作用。2、补骨脂酚可以抑制炎症引起的心肌损伤，提高心功能，改善心脏收缩功能。3、补骨脂酚能够激活Sirt1信号通路，降低内质网应激反应，较少心肌细胞凋亡，保护心肌细胞。附图说明图1为不同浓度BAK对LPS心肌细胞损伤模型炎症因子及细胞活力的影响。(A)不同浓度的BAK处理脓毒血症细胞模型后培养基中的IL-1和TNF-α浓度；(B)不同浓度的BAK处理脓毒血症细胞模型后的细胞活性，OD值即吸光度值。结果以均数±标准差表示，n＝6。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01，bbbP<0.001；与BAK1μM+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01，cccP<0.001；与BAK5μM+LPS组比较dP<0.05，ddP<0.01。图2为不同浓度BAK对LPS心肌细胞损伤模型细胞凋亡的影响。结果以均数±标准差表示，n＝6。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01，bbbP<0.001；与BAK1μM+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01，cccP<0.001；与BAK5μM+LPS组比较dP<0.05，ddP<0.01。图3为不同浓度BAK处理后小鼠心功能。(A)不同浓度BAK处理后小鼠超声心动图。(B)不同浓度BAK处理后小鼠左心室LVEF％和LVFS％。结果以均数±标准差表示，n＝20。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01，bbbP<0.001；与BAK25mg/kg+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01；与BAK50mg/kg+LPS组比较dP<0.05。图4为不同浓度BAK处理后小鼠血清炎症因子水平及LDH-1、CK-MB水平。(A)小鼠血清TNF-α水平(B)小鼠血清IL-1水平(C)小鼠血清LDH-1水平(D)小鼠血清CK-MB。结果以均数±标准差表示，n＝20。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01，bbbP<0.001；与BAK25mg/kg+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01；与BAK50mg/kg+LPS组比较dP<0.05,ddP<0.05。图5为不同浓度BAK处理后小鼠心肌HE染色及视野内细胞核数，放大倍数200×。结果以均数±标准差表示，n＝5。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01；与BAK25mg/kg+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01；与BAK50mg/kg+LPS组比较dP<0.05,ddP<0.05。图6为不同浓度BAK处理后小鼠心肌凋亡水平检测，放大倍数400×。结果以均数±标准差表示，n＝5。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01；与BAK25mg/kg+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01；与BAK50mg/kg+LPS组比较dP<0.05,ddP<0.05。图7为不同浓度BAK处理后小鼠SIRT1通路，ERS及凋亡相关蛋白表达情况。所有数据表示为Control组的倍数变化，结果以均数±标准差表示，n＝6。与Control组比较aP<0.05，aaP<0.01，aaaP<0.001；与LPS组比较bP<0.05，bbP<0.01，bbbP<0.001；与BAK25mg/kg+LPS组比较cP<0.05，ccP<0.01，cccP<0.01；与BAK50mg/kg+LPS组比较dP<0.05,ddP<0.05。具体实施方式本专利技术所述的感染性心肌损伤，特别是①细菌性心内膜炎；②系统性或者其他脏器感染所致菌血症导致的心肌炎性病变；③系统性或者其他脏器感染所致脓毒血症导致的心肌炎性病变。以下通过实施例对本专利技术做进一步的阐述。实施例是对本专利技术进行详细说明，但本专利技术并不受这些的任何限定。以下实验所用的补骨脂酚购自大连美仑生物技术有限公司，纯度为HPLC≥98％。实施例1:专利技术人研究发现补骨脂酚能够减轻LPS诱导的心肌原代细胞炎症反应，减少细胞凋亡。方案：采用LPS处理心肌原代细胞，在细胞水平模拟细菌性心肌炎导致心肌损伤的模型，给予不同浓度补骨脂酚进行处理。步骤：1)大鼠心肌原代细胞分离与培养：无菌条件下取SD大鼠乳鼠心室部分，PBS漂洗后剪成0.5mm2的小块，加入II型胶原酶消化，收集细胞，离心。将所得细胞置于含10％胎牛血清的DMEM培养基中，于37℃、5％CO2培养箱中贴壁60-90min，差速贴壁去除贴壁的心肌成纤维细胞，将培养基转移至明胶处理过的培养板培养，前3天加入BrdU抑制成纤维细胞生长，获得心肌细胞。倒置显微镜下观察，可见到视野中细胞产生有节律自主收缩，随机选取5个视野进行计数，可自主收缩细胞占总细胞数95％以上即本文档来自技高网...

【技术保护点】
补骨脂酚用于制备感染性心肌损伤药物的应用。

【技术特征摘要】
1.补骨脂酚用于制备感染性心肌损伤药物的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物为静脉注射给药制剂。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物给药剂量为每千克体重25mg-100mg。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：易蔚，秦志刚，谭延振，孙阳，杨阳，赵施皓，王晓武，狄守印，李步潆，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61