本发明专利技术涉及LINC01094在诊治缺血性脑卒中的应用。发明专利技术通过采集缺血性脑卒中和健康人群外周血进行高通量测序，运用生物信息学工具分析，初步筛选到在脑卒中组差异表达的mRNA和1ncRNA，并挑选部分候选基因进行大样本验证和初步干扰实验。本发明专利技术所提供的LINC01094为临床早期缺血性脑卒中分子检测奠定基础。
The application of LINC01094 in the diagnosis and treatment of ischemic stroke
The present invention relates to the use of LINC01094 in the diagnosis and treatment of ischemic stroke. The invention through the acquisition of ischemic stroke and peripheral blood of healthy people by using high-throughput sequencing, bioinformatics analysis, preliminary screening in the stroke group differences in the expression of mRNA and 1ncRNA, and select some candidate genes for large sample validation and preliminary interference test. The LINC01094 provided by the invention lays the foundation for the molecular detection of the early ischemic cerebral apoplexy.
【技术实现步骤摘要】
LINC01094在诊治缺血性脑卒中的应用
本专利技术涉及生物医药
，具体涉及缺血性脑卒中的分子生物标志物，更具体的涉及LINC01094及其相关基因在诊治缺血性脑卒中的应用。
技术介绍
长链非编码RNA(longnon-codingRNA，lncRNA)是一类转录本长度超过200个核苷酸的非编码RNA，根据其基因位置可分为五种类型：正义lncRNA(senselncRNA)、反义lncRNA(antisenselncRNA)、双向lncRNA(bidirectionallncRNA)、基因内lncRNA(introniclncRNA)及基因间lncRNA(intergeniclncRNA)。未来，lncRNA有望成为肿瘤诊断、治疗和预后新的标志物，同时也为肿瘤的治疗提供了新的靶点。但是脑卒中后1ncRNAs的表达变化如何，1ncRNAs是否参与脑卒中的病程调控，目前尚不清楚。脑卒中是一种严重危害人类健康和生命安全的脑血管疾病，具有发病率高、致残率高和死亡率高等特点，数据显示，我国每年新发脑卒中患者约200万人，其中70％-80％的脑卒中患者因为残疾不能独立生活，给家庭带来巨大的生活压力和精神压力，全国每年用于该病的治疗费用高达100亿元之多，给国家造成了沉重的经济负担。探求脑卒中的发病机制及有效提前预防和治疗方法的研究愈显重要。由血栓形成或栓子脱落导致的大脑主干血管或其分支血管阻塞而引起的缺血性脑卒中约占全部脑卒中的80％左右。寻找到有效的分子调控靶点，通过血液检测早期诊断缺血性脑卒中会使患者获益良多，用血液标志早期诊断缺血性脑卒中将有望成为一个具有实际应用价值的辅助诊断方法。本专利技术通过高通量测序检测脑卒中和正常对照人群中mRNA和1ncRNAs的表达谱变化，运用生物信息学工具分析在脑卒中组差异表达的mRNA和1ncRNAs，筛选出候选基因LINC01094，继而采用RT-PCR实验进行大样本验证和相关性分析以及初步的干扰实验，结果表明本专利技术挑选的LINC01094与缺血性脑卒中密切相关，为临床早期缺血性脑卒中分子检测奠定基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种防治脑卒中的试剂，所述试剂包含：(a)抑制剂和/或抑制剂组合物，所述抑制剂和/或抑制剂组合物下调LINC01094的转录和/或阻断LINC01094的活性；(b)药剂学上能接受的载体。进一步的，所述脑卒中为缺血性脑卒中。优选的，通过siRNA、shRNA、反义核酸等方法下调LINC01094的转录和/或阻断LINC01094的活性。优选的，所用siRNA靶序列为SEQIDNO.8和SEQIDNO.11。优选的，所用siRNA序列为SEQIDNO.9和SEQIDNO.10；或SEQIDNO.12和SEQIDNO.13。本专利技术的目的在于提供调控LINC01094表达的制剂在制备防治脑卒中试剂中的应用。进一步，防治脑卒中试剂包括下调LINC01094的转录，或抑制LINC01094活性的试剂。本专利技术的目的在于提供一种脑卒中诊断制剂，该试剂检测LINC01094表达。进一步，脑卒中诊断制剂能够检测脑卒中样本中LINC01094的转录或免疫检测方法检测脑卒中样本中LINC01094调控的基因的表达情况。进一步的，所述脑卒中为缺血性脑卒中。优选的，缺血性脑卒中样本为外周血。进一步，诊断缺血性脑卒中试剂包括基于高通量测序方法和/或基于定量PCR方法和/或基于探针杂交方法检测缺血性脑卒中样本中LINC01094转录或基于免疫检测方法检测缺血性脑卒中样本中LINC01094调控的基因的表达情况。优选的，基于定量PCR方法包括特异性扩增LINC01094的引物，进一步优选，特异性扩增LINC01094的引物序列为SEQIDNO.1和SEQIDNO.2；基于探针杂交方法包括与LINC01094的核酸序列杂交的探针；免疫检测方法包括与LINC01094调控基因表达蛋白特异性结合的抗体。本专利技术的目的在于提供上述脑卒中诊断制剂在制备脑卒中检测工具中的应用。本领域人员熟知，本专利技术提供的lncRNA序列既可通过生物学方法获得，又可通过化学合成方法获得，若通过化学合成方法制备，只要将其核苷酸序列提供给有关专业公司，委托其合成即可。lncRNA还可含有另外的或可替换的碱基修饰体或取代体，如硫代修饰或/和甲氧基修饰得到的核苷酸序列。与其90％以上同源的核苷酸序列也在本专利技术保护范围之内。本专利技术的目的在于提供一种诊断脑卒中生物制剂，该生物制剂检测与LINC01094表达相关的基因。所述与LINC01094表达相关的基因包括正相关基因和负相关基因。所述正相关基因为表达趋势与LOC105372881表达一致的基因，所述负相关基因为表达趋势与LOC105372881表达相反的基因。进一步，正相关的基因为TESC、JAZF1、NEDD4L、EIF3B、ANP32B、RAD23A、STRADB、BCKDK、CCNY、ASCC2、UTS2或/和MMP17。进一步，负相关的基因为KIAA1324L、MIS18A、C1QTNF6、MTERF2、MAP6D1、ZNF530、DNAH1、CRACR2A、TTC22和/或MIB2。优选的，与LINC01094表达相关的基因为JAZF1。进一步，脑卒中为缺血性脑卒中。进一步，诊断缺血性脑卒中生物制剂包括基于高通量测序方法和/或基于定量PCR方法和/或基于探针杂交方法检测缺血性脑卒中样本中与LINC01094表达相关的基因转录或基于免疫检测方法检测缺血性脑卒中样本中与LINC01094表达相关的基因的表达情况。优选的，缺血性脑卒中样本为外周血。优选的，基于定量PCR方法包括特异性扩增与LINC01094表达相关的基因的引物，进一步优选，特异性扩增JAZF1基因的引物序列为SEQIDNO.3和SEQIDNO.4；基于探针杂交方法包括与JAZF1核酸序列杂交的探针；免疫检测方法包括与JAZF1基因表达蛋白特异性结合的抗体。本专利技术的目的在于提供上述生物制剂在制备诊断脑卒中工具中的应用。本专利技术的目的在于提供一种防治脑卒中的试剂，该试剂调控与LINC01094表达相关的基因的表达。进一步，脑卒中为缺血性脑卒中。进一步，防治脑卒中试剂包括下调与LINC01094表达正相关的基因的转录，或上调与LINC01094表达负相关的基因的转录。优选的，通过siRNA、shRNA、反义核酸等方法下调与LINC01094表达正相关的基因的转录或通过构建过表达载体等方法上调与LINC01094表达负相关的基因的转录。本专利技术的目的在于提供上述防治脑卒中的试剂在制备脑卒中治疗药物中的应用。定义：在此所用的“同源的”是指两个聚合分子之间(例如，两个核酸分子如两个DNA分子之间)的亚单元序列相似性。当两个分子中的亚单元位置都被相同的单体亚单元所占据(例如，如果两个DNA分子的一个位置都被腺嘌呤所占据)，则它们在那个位置上是同源的。两个序列之间的同源性是相配的或同源的位置的数量的直接函数。例如，两个化合物序列的10个位置中的5个是相配的或同源的，则两个序列是50％同源的，如果10个位置中的9个是相配的或同源的，则两个序列是90％同源的。“诊断”表示对病理状况的存在或特性进行检测。本文档来自技高网...
【技术保护点】
调控LINC01094表达的制剂在制备防治缺血性脑卒中试剂中的应用。
【技术特征摘要】
1.调控LINC01094表达的制剂在制备防治缺血性脑卒中试剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，防治缺血性脑卒中试剂包括下调LINC01094的转录，或抑制LINC01094活性的试剂，优选的，通过siRNA、shRNA、反义核酸等方法下调LINC01094的转录和/或阻断LINC01094的活性。3.一种检测LINC01094表达的制剂在制备诊断缺血性脑卒中试剂中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，诊断缺血性脑卒中试剂包括基于高通量测序方法和/或基于定量PCR方法和/或基于探针杂交方法检测缺血性脑卒中样本中LINC01094转录或基于免疫检测方法检测缺血性脑卒中样本中LINC01094调控的基因的表达情况。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，缺血性脑卒中样本为外周血。6.一种防治缺血性脑卒中的试剂，所述试剂调控与...
【专利技术属性】
技术研发人员：何文贞，陈思洽，徐声亮，蔡德，
申请(专利权)人：汕头大学医学院第一附属医院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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