一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法技术

一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，包括以下步骤：（1）将猫须草破碎，过筛，提取，冷却，过滤，回收溶剂，过滤，得浓缩液；（2）将浓缩液上氧化铝柱层析，先水洗，再先后用低度醇和高度醇水溶液洗脱，分别收集洗脱液并回收醇，得黄酮类浸膏和酚酸类浸膏；（3）将黄酮类浸膏进行超临界CO

Method for extracting high-purity orange flavone from cat's tail grass

A cat from the orange flavone extraction method of high purity in the grass, which comprises the following steps: (1) the MaoXuCao crushing, sieving, cooling, extraction, filtration, solvent recovery, filtration, concentrated solution; (2) will concentrate on alumina column chromatography, first washed, and then successively by solution low alcohol and high alcohol water elution, collecting the eluent respectively and recovering alcohol to extract flavonoids and phenolic acid extract; (3) the flavonoids extract by supercritical CO

【技术实现步骤摘要】
一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法
本专利技术涉及一种提取高纯度橙黄酮的方法，具体涉及一种从猫须草中提取橙黄酮含量≥98%产品的方法。
技术介绍
猫须草（Clerodendranthusspicathus(Thunb.)C.Y.Wu）为唇形科，肾茶属植物，原名肾茶，又名猫须公、牙努秒等。猫须草为多年生草本植物，生于林下阴凉潮湿处，主要分布于印度尼西亚、马来西亚等东南亚地区，我国主产于广东、广西、云南、福建及台湾等。猫须草是一种药食两用的植物，性凉，味苦，气清香。猫须草具有显著的药理疗效，现代药理研究证明，猫须草的药理功能主要体现在以下几个方面：利尿排石、凉血、消炎；改善肾脏功能；抗氧化；消炎抗菌；治疗糖尿病；降血压；抗肿瘤等。猫须草的化学成分主要为黄酮类、酚酸类及萜类等，其中，黄酮类以多甲基取代为主，为脂溶性成分，而水溶性性成分以酚酸居多。橙黄酮（Sinensetin）是猫须草黄酮类成分中的一种，化学名：5,6,7,3’,4’-五甲氧基黄酮，分子式：C20H20O7，分子量：372.27，分子结构式如下：橙黄酮微溶于水，易溶于甲醇、乙醇及乙酸乙酯等有机溶剂。CN101143160A公开了一种肾茶提取物及制备方法和用途，是将肾茶用乙醇回流提取，后经大孔吸附树脂分离纯化，获得含肾茶酚酸50～85%的提取物。该方法使用D-101树脂纯化，虽能获得高含量的肾茶酚酸，但优越树脂的选择性较差，最终获得的产品是肾茶酚酸和黄酮类的混合物，不能获得高纯产品。CN103127214A公开了一种治疗糖尿病肾病的肾茶有效部位及其制备方法，是将肾茶使用30～80%的乙醇回流提取2次，然后大孔吸附树脂纯化，从而获得肾茶总黄酮50%以上提取物，该提取物主要由佩兰素、橙黄酮、3’-羟基-5,6,7,4’-四甲氧基黄酮等甲氧基黄酮类组成，得到产品可与现有可知的食品、药物赋形剂混合通过剂型制备工艺，制成具有治疗糖尿病肾病的药物、食品及保健品。该方法工艺简单，虽可获得肾茶总黄酮提取物，但只是一种粗品，并没有提到或解决从中提取高纯度橙黄酮的技术。CN105687309A公开了一种猫须草药效成分的萃取方法，是先将猫须草原料烘干，破碎过筛，再使用超临界CO2对原料进行萃取，萃取温度为40～60℃，萃取压力15～25MPa，萃取时间60～120min，夹带剂为乙醇，夹带剂加入量为萃取釜体积1/10～1/20。该萃取工艺主要对猫须草中的熊果酸、迷迭香酸和齐墩果酸的萃取效果较好，并没有公开对猫须草中橙黄酮的萃取效果，而且采用超临界CO2技术对原料直接萃取，渗透率较低，有效成分的提取也较低。CN104072464A公开了一种橙黄酮提取分离方法，是使用香藜为原料，加生物酶酶解8～10h，酶解原料，再用60～80%乙醇溶液微波或超声提取2～3次，提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后用大孔吸附树脂分离纯化，树脂型号为NK-9、ADS-21和HPD-417，先用水洗脱，再用50～70%乙醇洗脱，洗脱液浓缩后用溶液制备型液相色谱分离，流动相为30～40%乙腈。该方法采用先酶解，再使用60～80%乙醇提取方法，虽然一定程度上提高了橙黄酮的提取率，但由于橙黄酮在水中有一定的溶解性，酶解又在水溶液中进行，会增大橙黄酮的损耗。且大孔吸附树脂虽可以起到很好的分离效果，但由于其选择性较差，洗脱浓缩液不经过进一步纯化，直接使用制备型液相色谱分离，对制备色谱填料污染较大，增大后续纯化的难度，而且产品质量稳定性较差。CN104193710A公开了一种橙黄酮的制备方法及其在抗白血病药物中的运用，是取香藜地上部分，用饱和1%氨水浸泡2～6h，晒干，用85～95%乙醇溶液为提取溶剂，加入闪式提取容器中提取，提取液过滤浓缩，经氧化铝柱层析纯化，氯仿-丙酮混合溶液洗脱，再经制备型液相色谱分离得到橙黄酮。该方法使用闪式提取器，具有提取时间短，提取率高等优点，但是存在生产连续性较差的缺陷，且使用85～95%的高浓度乙醇会提取出大量脂溶性杂质，比如叶绿素、挥发油等，回收完溶剂后，会产生大量沉淀，导致后续氧化铝层析分离纯化效果较差。综上，现有技术主要是针对猫须草中的总酚酸类和总黄酮类的分离纯化，没有对猫须草中橙黄酮的纯化分离进行研究，而目前市场上的猫须草提取物都对橙黄酮有0.2～98%的含量要求，需求量较大，市场前景广阔，亟待寻找一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种工艺简单、成本低，选择性好，所得产品纯度、回收率高，适用于工业化生产的从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，包括以下步骤：（1）提取、浓缩、过滤：将猫须草破碎，过筛，置于提取溶剂中连续逆流提取，冷却，过滤，真空回收滤液中的溶剂，过滤，得浓缩液；（2）氧化铝柱层析分离纯化：将步骤（1）所得浓缩液上氧化铝柱层析，先用水洗至水洗脱液无色，再先后用低度醇水溶液和高度醇水溶液进行洗脱，分别收集洗脱液并真空回收洗脱液中的醇，得酚酸类浸膏和黄酮类浸膏；（3）超临界CO2萃取：将步骤（2）所得黄酮类浸膏进行超临界CO2萃取，得萃取浸膏；（4）制备液相色谱分离纯化：将步骤（3）所得萃取浸膏用甲醇溶解，进样至制备液相设备中，然后用洗脱剂进行洗脱，并收集目标洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得高纯度橙黄酮产品。本专利技术方法所用原料为猫须草地上茎叶，橙黄酮的质量含量为0.05～0.15%。优选地，步骤（1）中，所述过筛的目数为20～60目。优选地，步骤（1）中，所述提取的温度为40～80℃，提取的时间为2～4h。优选地，步骤（1）中，猫须草原料与提取溶剂的质量体积比（kg/L）为1:8～20（更优选1:10～15）。优选地，步骤（1）中，所述提取溶剂为体积分数20～70%（更优选30～50%）的甲醇水溶液或体积分数30～60%（更优选40～55%）的乙醇水溶液。猫须草中主要含有酚酸类和黄酮类两大成分，其中的橙黄酮在水中具有一定溶解性，所以宜用醇提，但醇浓度不宜太高，因为猫须草原料为地上茎叶，大部分为叶子，若醇度太高了会导致大量脂溶性杂质成分比如叶绿素，被提取出来，回收完溶剂后，将产生大量沉淀物，对后续过滤及纯化不利，而使用体积分数20～70%的甲醇水溶液或体积分数30～60%的乙醇水溶液提取，则可在保证高提取率的条件下又可避免此问题。优选地，步骤（1）中，所述连续逆流提取设备为串联连续逆流提取设备，可串联两套以上使用，提高生产效率；所述提取液用过板式换热器进行冷却。优选地，步骤（1）中，所述逆流提取后的溶液，用100～400目滤网过滤。优选地，步骤（1）中，所述真空回收的温度为40～70℃，压力为-0.10～-0.07MPa，回收至固含量为5～10%；所述真空回收的设备为单效浓缩器、双效浓缩器或三效浓缩器。优选地，步骤（1）中，所述真空回收后的溶液，用陶瓷膜或超滤膜过滤。优选地，所述陶瓷膜的孔径为0.2～1.0μm（更优选0.4～0.6μm），过滤的膜压为1～4MPa，温度为30～60℃（更优选35～45℃）。优选地，所述超滤膜为高分子材料超滤膜，分子量为0.5～10万道尔顿（更优选2～6万道尔顿），过滤的膜本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取、浓缩、过滤：将猫须草破碎，过筛，置于提取溶剂中连续逆流提取，冷却，过滤，真空回收滤液中的溶剂，过滤，得浓缩液；（2）氧化铝柱层析分离纯化：将步骤（1）所得浓缩液上氧化铝柱层析，先用水洗至水洗脱液无色，再先后用低度醇水溶液和高度醇水溶液进行洗脱，分别收集洗脱液并真空回收洗脱液中的醇，得酚酸类浸膏和黄酮类浸膏；（3）超临界CO

【技术特征摘要】
1.一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取、浓缩、过滤：将猫须草破碎，过筛，置于提取溶剂中连续逆流提取，冷却，过滤，真空回收滤液中的溶剂，过滤，得浓缩液；（2）氧化铝柱层析分离纯化：将步骤（1）所得浓缩液上氧化铝柱层析，先用水洗至水洗脱液无色，再先后用低度醇水溶液和高度醇水溶液进行洗脱，分别收集洗脱液并真空回收洗脱液中的醇，得酚酸类浸膏和黄酮类浸膏；（3）超临界CO2萃取：将步骤（2）所得黄酮类浸膏进行超临界CO2萃取，得萃取浸膏；（4）制备液相色谱分离纯化：将步骤（3）所得萃取浸膏用甲醇溶解，进样至制备液相设备中，然后用洗脱剂进行洗脱，并收集目标洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得高纯度橙黄酮产品。2.根据权利要求1所述从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述过筛的目数为20～60目；所述提取的温度为40～80℃，提取的时间为2～4h；猫须草原料与提取溶剂的质量体积比为1:8～20；所述提取溶剂为体积分数20～70%的甲醇水溶液或体积分数30～60%的乙醇水溶液；所述逆流提取后的溶液，用100～400目滤网过滤。3.根据权利要求1或2所述从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述真空回收的温度为40～70℃，压力为-0.10～-0.07MPa，回收至固含量为5～10%；所述真空回收后的溶液，用陶瓷膜或超滤膜过滤；所述陶瓷膜的孔径为0.2～1.0μm，过滤的膜压为1～4MPa，温度为30～60℃；所述超滤膜为高分子材料超滤膜，分子量为0.5～10万道尔顿，过滤的膜压为1～3MPa，温度为10～30℃。4.根据权利要求1～3之一所述从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述低度醇水溶液的体积分数为20～30%，所述高度醇水溶液的体积分数为60～80%；所述低度醇水溶液或高度醇水溶液中的醇为甲醇或乙醇；所述洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈钱，龙伟岸，黄华学，
申请(专利权)人：湖南华诚生物资源股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43