一种稳定性强且成本低的己糖激酶法葡萄糖检测试剂制造技术

本发明专利技术涉及一种己糖激酶法检测血液GLU检测技术领域，特别涉及一种稳定性强且成本低的液态己糖激酶法血液GLU检测试剂。本发明专利技术为液体的双试剂，试剂1中的主要含量为缓冲液、Mg2+、离子平衡剂、防腐剂、NAD(氧化型性辅酶I)、保护剂、表面活性剂，试剂2的组成成分有缓冲液、保护剂、表面活性剂、防腐剂、己糖激酶（HK）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6P-DH）、ATP.NA2等。本发明专利技术为了保障试剂中酶类的稳定性，在试剂中有针对性的添加了聚乙烯二醇2万、吐温-80、FAD等多种保护剂，为了降低成本，尤其是降低酶类的使用，在试剂中添加了多种表面活性剂，增加对酶类的乳化以及提高酶的使用效率，从而大大降低了试剂的成本，非常方便于临床中的使用和推广。

【技术实现步骤摘要】
一种稳定性强且成本低的己糖激酶法葡萄糖检测试剂
本专利技术涉及一种稳定性强的己糖激酶法检测试剂，属于临床体外检测

技术介绍
血清中的糖称为血糖，绝大多数情况下都是葡萄糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在清晨空腹血糖浓度为80～120毫克%。空腹血糖浓度超过130毫克%称为高血糖。如果血糖浓度超过160～180毫克%，就有一部分葡萄糖随尿排出，这就是糖尿。血糖浓度低于70毫克%称为低血糖。葡萄糖存在于人体的血浆和淋巴液中，是生命活动中不可缺少的物质，它在人体内能直接参与新陈代谢过程。在消化道中，葡萄糖比任何其它单糖都容易被吸收，而且被吸收后能直接被人体组织利用。人体摄取的低聚糖(如蔗糖)和多糖(如淀粉)也都必须先转化为葡萄糖之后，才能被人体组织吸收和利用。由于血糖浓度是许多疾病的病症诊断、鉴别诊断、病情观察、治疗监控和疾病预防等必不可少的首选指标，因此，对其准确测定具有重要意义。血清葡萄糖检测方法众多，检测方法主要有氧化酶偶联，比色法，微电流法，氧速率法，已糖激酶法，邻甲苯胺法，葡萄糖脱氢酶法，气相、色谱、同位素稀释质谱法，微创测定法等，其中在医学中最常用的使用方法为氧化酶法和己糖激酶法，其他方法多数准确度差，成本较高，操作复杂，对仪器和操作人员要求较高等因素，真正使用的较少，而现在使用较多的为氧化酶法，由于检测过程中尿酸、维生素C、胆红素等可与色原性物质竞争过氧化氢而抑制反应，引起结果偏低，且此法线性范围较窄，给临床中的应用带来很大的不变，而己糖激酶法测定血清中葡萄糖，针对于具有轻度溶血、脂血、黄疸，维生素C、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不易干扰本法测定，适用于自动分析仪，是目前国际上公认的参考方法，可以非常好的弥补氧化酶法检测血液葡萄糖的缺陷，但是本检测方法中涉及到己糖激酶（HK）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6P-DH）以及ATP等原材料，这些原材料多半需要以干粉的状态储存在-20℃环境下，一旦配置成试剂则容易衰减，现有的一些产品多为制作成干粉状或者增加试剂中的主要成分的含量来减缓液态试剂中主要成分的衰减，干粉的试剂则需要在使用前复溶，给操作带来不便，且一旦复溶则需要尽快使用完，不然会在短期内失效，而增加主要原材料的量则会大大增加成本，但是也无法从根本上保护试剂中的有效成分，因此专利技术一种稳定的低成本的液态己糖激酶法检测血清葡萄糖检测试剂具有很大的前景。本专利技术以现有的己糖激酶法检测血液葡萄糖（GLU）的方法，专利技术了一种稳定性强且成本低的己糖激酶法葡萄糖（GLU）检测试剂。
技术实现思路
本专利技术涉及一种稳定性强的且成本低的己糖激酶法葡萄糖（GLU）检测试剂，以及检测方法。基本原理：己糖激酶在ATP存在时能催化葡萄糖变成6-磷酸葡萄糖和ADP，6-磷酸葡萄糖在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（氧化态，NADP）存在的情况下，由6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化生成6-磷酸葡萄糖酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（还原态，NADPH），后者在340nm波长处有吸收峰，其峰值的高低与葡萄糖含量成正比：HK第一步：葡萄糖+ATP葡萄糖-6-磷酸+ADP；G6P-DH第二步：葡萄糖-6-磷酸+NAD+6-磷酸葡萄糖酸+NADH+H+。本专利技术是通过以下步骤得到的：一种稳定性强的且成本低的己糖激酶法葡萄糖（GLU）检测试剂组成成分如下：试剂1(R1)的组成成分：缓冲液··········································100mmol/LMg2+··········································..2mmol/L-4mmol/L离子平衡剂······································2g/L-5g/L防腐剂··········································0.1g/L-1g/LNAD(氧化型性辅酶I)······························0.5mmol/L-1mmol/L保护剂··········································5g/L-10g/L表面活性剂1·····································1ml/L-5ml/L表面活性剂2·····································1ml/L-5ml/L试剂2(R2)的组成成分：缓冲液··········································10mmol/L保护剂1·········································10g/L-20g/L保护剂2········································.2ml-5ml/L保护剂3·········································1mg/L-3mg/L表面活性剂·········.····························1ml/L-3ml/L防腐剂···············.··························0.1g/L-1g/L己糖激酶（HK）····································100U/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6P-DH）·····················80U/LATP.NA2·········································4mmol/L。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R1中缓冲液为25℃，PH=7.4的浓度为100mmol/L的TRIS（三羟甲基氨基甲烷）缓冲液。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R2中缓冲液为25℃，PH=8.6的浓度为50mmol/L的甘氨酸-NaOH缓冲液。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R1中所述离子平衡剂为硫酸钠。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R1所述防腐剂为叠氮钠。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R2所述防腐剂为MIT(2-甲基-4-异噻唑啉-3酮盐酸盐)。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R1所述保护剂为海藻糖。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R1所述的表面活性剂1为PluorinicF68（上海西宝）。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R1所述的表面活性剂2为Tetronic1307（上海西宝）。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R2中所述的保护剂1为聚糖2万。所述的一种稳定性强且成本低的己糖激酶法血液葡萄糖（GLU）检测试剂，试剂R2中所述的保护剂2为吐温-80。所述的一种稳定性强且成本低的己本文档来自技高网...

【技术保护点】
1)一种稳定性强的且成本低的己糖激酶法葡萄糖（GLU）检测试剂组成成分如下：试剂1(R1)的组成成分：PH=7.4, TRIS(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液

【技术特征摘要】
1.1)一种稳定性强的且成本低的己糖激酶法葡萄糖（GLU）检测试剂组成成分如下：试剂1(R1)的组成成分：PH=7.4,TRIS(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液··················100mmol/LMg2+··················································2mmol/L-4mmol/L离子平衡剂············································2g/L-5g/L叠氮钠················································0.1g/L-1g/LNAD(氧化型性辅酶I)····································0.5mmol/L-1mmol/L保护剂················································5g/L-10g/L表面活性剂1···········································1ml/L-5ml/L表面活性剂2···········································1ml/L-5ml/L试剂2(R2)的组成成分：缓冲液················································10mmol/L保护剂1···············································10g/L-20g/L保护剂2···············································2ml-5ml/L保护剂3············································..·1mg/L-3mg/L表面活性剂······································...

【专利技术属性】
技术研发人员：包兴艳，罗维晓，谭柏清，李志明，
申请(专利权)人：山东博科生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37