用于测试元件的稳定化学作用制造技术

本发明专利技术涉及用于测试元件的稳定化学作用，具体而言涉及诊断元件以及用于其生产的方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 本申请是申请日为2010年12月10日、申请号为201080056135.X、专利技术名称为"用于 测试元件的稳定化学作用"的PCT申请的分案申请。
本专利技术设及诊断元件W及用于其生产的方法。
技术介绍
诊断元件是临床上相关的分析方法的重要组分。运主要设及分析物例如代谢物或 底物的测量，所述分析物例如可W借助于对于分析物特异性的酶直接或间接测定。分析物 借助于酶-辅酶复合物进行转变且随后进行定量。在运个过程中，使待测定的分析物接触合 适的酶、辅酶和任选的介质，其中辅酶通过酶促反应得到物理化学改变，例如被氧化或还 原。 如果另外使用介质，则它通常将在分析物的转变过程中释放的电子从还原型辅酶 转移到光学指示物或电极的传导组分上，从而使得该过程可W例如光度或电化学检测。校 准提供在测量的值和待测定分析物的浓度之间的直接关系。[000引此种测试元件的可灭菌性就作为诊断剂的用途而言具有重大意义。在运方面，由 现有技术已知且例如用于测定血糖的诊断元件具有下述缺点：它们就电离福射或照常规用 于灭菌的其他物理或化学试剂而言具有低稳定性，并且在灭菌后显示出尤其对于酶系统的 显著损害。因此，目前商购可得的测试元件例如Accu-Check Active?、Ac州-check Aviva? 或EP 1 430 831 A1中所述的生物传感器，其含有化咯并哇嘟酿(PQQ)依赖性酶和用于电子 传递的介质，在用电离福射灭菌后显示酶活性的显著丧失。 用于补偿通过灭菌引起的对于生物化学测试元件的酶系统损害的已知措施是将 酶系统过量用药(overdose)dEP 1 293 574 B1公开了包含与吩嚷嗦介质组合的PQQ依赖性 葡糖脱氨酶的电化学传感器，其中PQQ依赖性葡糖脱氨酶W20酶单位的浓度使用。在使用电 子福射(剂量25 kGy)灭菌后，尽管由于灭菌的损失，由于酶系统的过量用药，取决于具有高 绝对量的功能酶的酶系统的制剂获得传感器。 然而，在生物化学测试元件中酶系统的过量用药具有缺点。尽管当在大工业规模 上生产消耗品时，组分的过量用药是不经济的且导致显著更高的生产成本的事实，高浓度 的酶特别还可W引起与可溶性或/和粘性相关的问题，并且使得难W将酶应用于合适载体。 本专利技术基于其的目的因此是提供稳定的生物化学测试元件，特别是用于测定葡萄 糖，对于其现有技术的缺点至少部分被消除。特别地，在灭菌后且无需酶系统的过量用药， 测试元件应具有高比例的活性酶或活性辅酶且确保良好性能。
技术实现思路
运个目的根据本专利技术通过包含化学检测试剂的诊断元件来达到，所述化学检测试 剂包含对电离福射敏感的至少一种组分，其中已对诊断元件实施灭菌，并且基于在灭菌前 在诊断元件中组分的总量，对电离福射敏感的组分W含80 %比例的功能性形式存在。 令人惊讶的是，在本专利技术的范围内发现，包含化学检测试剂的诊断元件例如测试 带或测试条在灭菌后未显示对那种组分的损害或仅显示出轻微损害，所述化学检测试剂含 有对电离福射敏感的至少一种组分。 在根据本专利技术的诊断元件中使用的化学检测试剂可W基本上包含适合于测定分 析物的任何组分，例如使用光学或电化学工具。此种组分的例子是本领域技术人员已知的， 并且特别包含多肤、辅酶、光学指示物、介质W及辅助物质或/和添加剂，但并不限于运些。 在运方面，化学检测试剂可W为任何形式，但优选是应用于合适载体的至少一个试剂层的 组分，并且在适当时，可W同时使用W检测分析物。【具体实施方式】 对电离福射敏感的组分可W是化学检测试剂的任何组分，其是待测定的分析物诊 断所需的，即直接或间接与分析物的物理化学转变有关的那种，如本文使用的，其中术语 "对电离福射敏感"意指组分可W被物理化学改变或/和在各自的环境条件下即在每种情况 下流行的压力、溫度和相对空气湿度下，其功能可W通过电离福射被损害。 在运方面，根据本专利技术在诊断元件灭菌后，基于在灭菌前在诊断元件中组分的总 量，对电离福射敏感的组分也W100%比例的功能性形式存在是可能的，其中在每种情况下 上述稳定性标准应用于总诊断元件。 对电离福射敏感的组分优选是多肤、辅酶、光学指示物或其组合，其中多肤是特别 优选的。在运种情况下，任何多肤开始被考虑作为满足各自需求且由本领域技术人员视为 合适的多肤。多肤优选是酶，特别是辅酶依赖性酶。此种酶的例子尤其包含脱氨酶、氧化酶 例如葡糖氧化酶(EC 1.1.3.4)或胆固醇氧化酶(EC 1.1.3.6)、转氨酶例如天冬氨酸转氨酶 或丙氨酸转氨酶、5 核巧酸酶、肌酸激酶和屯、肌黄酶(EC 1.6.99.2)。[001引在更优选的实施方案中，烟酷胺腺嚷岭二核巧酸(NAD/NADH)依赖性或烟酷胺腺嚷 岭二核巧酸憐酸（N A D P / N A D P Η )依赖性脱氨酶用作酶，其中酶特别选自醇脱氨酶（E C 1.1.1.1;60 1.1.1.2)、1^-氨基酸脱氨酶巧0 1.4.1.5)、葡糖脱氨酶巧0 1.1.1.47)、葡糖- 6-憐酸脱氨酶(EC 1.1.1.49)、甘油脱氨酶(EC1.1.1.6)、3-径下酸脱氨酶(EC 1.1.1.30)、 乳酸脱氨酶(EC 1.1.1.27; 1.1.1.28)、苹果酸脱氨酶(EC 1.1.1.37)和山梨糖醇脱氨酶。酶 最优选是葡糖脱氨酶(EC 1.1.1.47)或葡糖-6-憐酸脱氨酶(EC 1.1.1.49)。 对电离福射敏感的组分可W进一步是辅酶。本专利技术基本上设想了任何辅酶的使 用;然而，NAD(P)/NAD(P)H化合物优选用作辅酶。如在本申请的范围内使用的，术语NAD(P)/ NAD(P)H化合物包含天然存在的NAD(P)/NAD(P)H化合物，例如烟酷胺腺嚷岭二核巧酸(NAD/ NADH)和烟酷胺腺嚷岭二核巧酸憐酸(NADP/NADPH)，W及可W通过天然NAD(P)/NAD(P化化 合物的化学修饰获得的人工NAD(P)/NAD(P)H化合物，并且尤其包含3-乙酷化晚腺嚷岭二核 巧酸(3-乙酷NAD)和3-乙酷化晚腺嚷岭二核巧酸憐酸(3-乙酷NADP)。 在一个实施方案中，辅酶是稳定的辅酶。在本专利技术的意义上的稳定辅酶是运样的 辅酶，其与天然辅酶相比较，已被化学修饰，并且与天然辅酶相比较，在大气压下具有针对 湿气、尤其是在〇°C - 50°C范围中的溫度、尤其是在抑4 - pH 10范围中的酸和碱或/和亲 核体例如醇或胺的更高稳定性，并且在运方面在等同环境条件下在比天然辅酶更长的时间 段内可w是活性的。 与天然辅酶相比较，稳定辅酶优选具有更高的水解稳定性，其中在测试条件下对 于水解的完全稳定性是特别优选的。与天然辅酶相比较，稳定辅酶可W具有关于酶减少或 增加的结合常数，例如减少1/^2或更多或增加1倍或更多的结合常数。 如果NAD(P)/NAD(P)H化合物用作辅酶，则它优选选自通式(I)的化合物、或其盐或 还原形式：其中 A =腺嚷岭或其类似物， T =在每种情况下独立地0、S， U =在每种情况下独立地0H、SH、B也-、BCN也-， V =在每种情况下独立地0H或憐酸基，或形成环状憐酸基的2个基团， W = COOR、CON(R)2、COR、CSN(R)2，其中R = 在每种情况下独立地H本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含化学检测试剂的灭菌的诊断元件，所述化学检测试剂包含对电离辐射敏感的组分，其特征在于所述灭菌的诊断元件不包含介质，并且基于在灭菌前在所述诊断元件中各组分的总量，对电离辐射敏感的所述组分以≥ 80 ％比例特别是以≥ 90％比例的功能性形式存在，其中对电离辐射敏感的所述组分是酶和辅酶，其中所述酶是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD/NADH)依赖性或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP/NADPH)依赖性脱氢酶，且其中所述辅酶是NAD/NADH，NADP/NADPH，或通式(I)的稳定的NAD(P)/NAD(P)H化合物，或其盐或还原形式其中A = 腺嘌呤或其类似物，T = 在每种情况下独立地O、S，U = 在每种情况下独立地OH、SH、BH3‑、BCNH2‑，V = 在每种情况下独立地OH或磷酸基，或形成环状磷酸基的2个基团，W = COOR、CON(R)2、COR、CSN(R)2，其中R = 在每种情况下独立地H或C1‑C2烷基，X1、X2 = 在每种情况下独立地O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH、NCH3，Y = NH、S、O、CH2，Z = 线型或环状有机残基，或通式(III)的稳定的NAD(P)/NAD(P)H化合物。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：C霍恩，N施泰因克，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH